北京pET-28a(+) Vector 表达载体厂商

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北京pET-28a(+) Vector 表达载体厂商由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多pET-28a(+) Vector 表达载体等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。

名称：北京pET-28a(+) Vector 表达载体厂商
编号：SY0296
规格：1μg
产地：国产|进口
pET系列载体是目前应用最广泛的重组蛋白表达载体，载体构建时目的片段被克隆入载体噬菌体T7转录翻译系统下，经转化在宿主T7RNA聚合酶的诱导下进行表达。T7RNA聚合酶具有超强并特异的启动T7启动子基因表达功能，当其被完全诱导时，可使宿主本身的表达几乎全部转化为目的基因的表达，诱导几个小时后即可使得最终目的基因表达产物超过细胞总蛋白的50%。

pET-28a载体带有一个N端的His/Thrombin/T7蛋白标签，同时含有一个可以选择的C端His标签。pET28a载体的单一的多克隆位方便目的片段的克隆。

产品性质：
质粒类型：细菌表达
表达水平：高
大小：5369
5测序引物：T7 Fwd
5测序引物序列：5d[TAATACGACTCACTATAGGG]3
抗性：Kanamycin
类型：Nonviral

注意事项
1）载体序列是以pBR322质粒的编码原则进行编码的，所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：≤-20℃，避免反复冻融。

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·HRP标记小鼠抗β-actin单克隆抗体
编号：SY0634
英文名称：HRP-conjugated β-actin, Mouse mAb
规格：100μl(＞200次)
本品为HRP标记的 小鼠抗β-actin单克隆抗体。推荐稀释倍数：WB（1:4000）

产品类型：小鼠单抗（Mouse Monoclonal, mAb）IgG; Mouse IgG1
反应性：人、小鼠、非洲绿猴
应用：WB
克隆号（Clone NO.）：2F3
免疫原：偶联到KLH上的合成多肽【D(Ac)DDIAALVIDNGSGLC】
储存缓冲液：含50%甘油的PBS，pH7.3
储存条件：-20℃。

·线粒体深红色荧光探针(Deep Red FM)
编号：SY0574
英文名称：Mitochondrial Deep Red FM
规格：50μg
Deep Red FM是一种细胞渗透型的carbocyanine-based的远红外红色荧光探针（Ex=644 nm，Em=665nm），包含标记线粒体的弱巯基反应性的氯甲基官能团，只需简单孵育细胞，即可被动运输穿过细胞膜并直接聚集在活性线粒体上。一旦线粒体被染色后，还能根据后续实验的需求进行固定（醛类固定剂如甲醛）和透化（醛类去污剂如Triton X-100），探针依然维持在细胞内。本品适合双标实验，因其红色荧光与其他的绿色荧光探针具有良好的分辨率。

虽然传统的线粒体荧光探针如TMR和罗丹明123，也能很容易的聚集在功能线粒体上，但是一旦线粒体膜电位丧失即会被洗掉，从而在一些需要细胞进行醛类固定或者包含线粒体能量状态影响因子的实验中，使其应用大受限制。

分子式：C34H36Cl2N2
分子量：543.58
外观：Blue solid
激发波长：644nm
发射波长：665nm
储存条件：-20℃避光干燥
结构式




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·SYBR Green I 核酸凝胶染料
编号：SY0257
英文名称：SYBR Green I (10,000×in DMSO)
规格：100μl
本品是溶于DMSO的SYBR Green I 10,000×染液。SYBR Green I，一种灵敏度非常高的dsDNA荧光染料，常用于核酸琼脂糖凝胶/聚丙烯酰胺凝胶电泳。SYBR Green I染料的最大激发波长为497nm，但是在～290nm和～380nm处有二级激发峰。与DNA结合的SYBR Green I染料的荧光发射集中在520nm。因此，该染料可适用于多种凝胶检测仪。

独立实验室进行的艾姆斯试验表明SYBR Green I 的致突变性明显比溴化乙锭要低得多，目前尚无关于SYBR Green I 染料对人体的致突变性或毒性的数据，但我们必须提醒用户注意，该染料能与DNA结合，因此，它应当被看做潜在诱变剂，在使用前小心谨慎。另外，在处理DMSO储存液时应特别小心，因为DMSO能促进有机分子进入组织。染料的处理应当符合当地的规定。

使用方法

【开始使用前】
使用前将本品取出并回温至室温，使DMSO彻底解冻、溶液均一。于离心机上短暂离心确保所有溶液至管底。第一次使用时可将本品分装成多个小份后冻存，小份染料将更快速熔解。

一、 染色
1 电泳后DNA染色
1）在琼脂糖或非变性聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳。
【注】：TBE和TAE缓冲液均适合于SYBR Green I染料。
2）用TE、TAE或TBE将SYBR Green I进行10000倍稀释。
【注】：
① SYBR Green I染色对pH敏感，为获得最佳的灵敏度，应确认在染色温度下染色液的pH值在7.5-8.0之间（pH8.0更佳）。
② 用水配制的染色液不如用缓冲液配制的稳定，为得到较好灵敏度，必须在24h内使用。
3）染液要充分覆盖凝胶，室温轻摇孵育10-40min。
【注】：
① 推荐用塑料而不是玻璃容器来储存染色液，应为染料会吸附到玻璃表面。
② 染色过程避光进行，建议在容器上加盖铝箔或置于暗处。
③ 凝胶厚度及琼脂糖或聚丙烯酰胺的比例不同，染色时间将有所不同。
④ 无需脱色。
⑤ 染液可置暗处（最好是冷藏）放置至少1周，重复使用最多4次。
2 电泳前DNA染色
1）一般选择配制成SYBR Green I预制凝胶来实验。
临灌胶前将SYBR Green I储存液按照1：10000倍稀释到凝胶溶液中，预制成含有SYBR Green I染料的琼脂糖或非变性聚丙烯酰胺凝胶。预制的SYBR Green I凝胶的DNA检测下限（大约为30-40pg/条带），略高于电泳后染色（＜20pg/条带）。此外，在SYBR Green I凝胶中的DNA*(代"片")段迁移率明显比无染料凝胶中的相同片段慢。
2）作为DNA模板预染标记。
一般而言，DNA在电泳前与染料工作液至少孵育15min。
二、 凝胶成像（紫外或蓝光透射仪或紫外顶置光源直射）
可在紫外或蓝光光源下轻松观察到用SYBR Green I染色的DNA。
三、从双链DNA中去除SYBR Green I
将SYBR Green I染色的DNA移至100mM NaCl中，加入2.5倍体积的无水或95%的乙醇。在冰上孵育约20min，在4℃离心至少10min。去除乙醇，并用70%乙醇洗涤沉淀。让乙醇挥发，用TE重悬双链DNA即可。

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