特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京现货pUM19-T Vector TA克隆载体怎么卖在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京现货pUM19-T Vector TA克隆载体怎么卖,产品信息:
类别:克隆与表达
产品名 |
产品编号 |
包装规格 |
pUM19-T Vector TA克隆载体 |
SY0022 |
5μg |
pUM19-T载体是一种高效克隆PCR产物(TA Cloning)的专用载体。它是在线性化pUC19载体的基础上,在两侧的3’端添加碱基T而制成。特殊的纯化方式使得超过99%的pUM19载体两端都具有3’-T突出端,因此极大的降低了载体自连率。由于大部分耐热聚合酶反应时都会在PCR 产物的3’端添加一个A,可与pUM19载体3’端的T互补连接,因此可大大提高PCR 产物的连接和克隆效率。pUM19载体多克隆位点位于β-lactamase基因内,可以通过蓝白斑快速筛选含有插入片断的重组子。连接使用的PCR 片段3’端应带有A 末端;Pfu DNA Polymerase等高保真聚合酶的扩增产物不带A,应先在其末端加A后再进行TA克隆。本品随载体提供对照片段(500bp)用于阳性对照反应。
1.将载体置于冰上融化。建议第一次使用时将载体分装成小份保存,每次取一支使用。
2.按下表配置连接反应体系
ddH2O——To 10 μl
10×Ligase Buffer——1 μl
pUM19-T Vector (50 ng/μl)——1μl (约0.025 pmol)
插入片段*——0.075 pmol~0.25 pmol
T4 DNA Ligase (400 U/μl)——1 μl
注:插入片段与载体的摩尔比应在3:1~10:1之间。请根据琼脂糖凝胶电泳或紫外分光光度计检测确定插入片段的浓度,并根据其大小计算摩尔量。1 pmol 1 kb双链DNA的质量约为660 ng。
3.对照反应体系(可选):
ddH2O——6 μl
10×Ligase Buffer——1 μl
pUM19-T Vector (50 ng/μl)——1 μl (约0.025 pmol)
500 bp control insert(50 ng/μl)——1 μl (约0.15 pmol)
T4 DNA Ligase (400 U/μl)——1 μl
4.轻轻吹打混匀反应体系,室温22-26℃孵育1-2小时,或16℃过夜。
5.转化:
1) 将连接产物加入到100 μl感受态细胞中(连接产物的体积不要超过感受态细胞体积的1/6),轻轻弹匀,冰上孵育30分钟。
2) 将离心管置于42℃水浴,不要晃动,准确热激90秒后,立刻置于冰水浴中,不要晃动,静置2-3分钟。
3) 向离心管中加入900 μl LB或SOC培养基,150 rpm, 37℃振荡培养45分钟,使菌体复苏,抗性基因表达。
4) 2500 g离心5分钟,去掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬混匀,用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀,室温正置10分钟。待菌液被平板吸收后,37℃倒置培养过夜。
注:如果使用超级感受态细胞(转化效率>108 cfu/μg),可以直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存,一周之内都可重新涂板。
储存条件:-20℃。
注意事项
1) 尽量避免反复冻融,可将载体和对照片段分装成小份后保存。
2) 为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
北京现货pUM19-T Vector TA克隆载体怎么卖专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:百奥莱博,SY0022,pUM19-T Vector TA克隆载体
我公司是一家生物高新技术企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。并代理销售Omega、Sigma、R&D、GBD、ATCC、HYCLONE等二十多家国外知名品牌,致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务,满足生物化学、分子生物学 、pUM19-T Vector TA克隆载体、细胞生物学、免疫学 ELISA试剂盒等生物科技实验需求。
更多有关北京现货pUM19-T Vector TA克隆载体怎么卖的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销售以下产品:
编号 |
类别 |
名称 |
SY0515 |
其他培养基 |
小鼠纤连蛋白 |
SY0260 |
核酸电泳和回收 |
双链DNA定量检测试剂盒 |
SY0402 |
蛋白质研究 |
MBP标签蛋白纯化预装柱,1ML |
SY0663 |
一抗 |
小鼠抗RFP-tag单克隆抗体 |
SY0506 |
细胞凋亡与增殖 |
MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 |
SY0495 |
细胞凋亡与增殖 |
DAPI双链DNA染料 |
SY0230 |
报告基因检测 |
RXR-GFP报告基因质粒 |
SY0470 |
细胞凋亡与增殖 |
细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒 |
SY0507 |
细胞凋亡与增殖 |
台盼蓝染色液(0.4%) |
SY0011 |
克隆与表达 |
TOP10化学感受态细胞 |
SY0163 |
报告基因检测 |
PPARγ-GFP报告基因质粒 |
SY0674 |
二抗 |
Alexa Fluor 647标记山羊抗兔IgG(H+L) |
SY0046 |
核酸扩增(PCR) |
dNTP混合溶液(2.5 mM each) |
SY0279 |
克隆与表达 |
一步法(快速/无缝)克隆试剂盒 |
SY0263 |
核酸电泳和回收 |
50×TAE缓冲液 |
SY0489 |
细胞凋亡与增殖 |
JC-1线粒体膜电位检测试剂盒 |
SY0157 |
报告基因检测 |
SREBP-GFP报告基因质粒 |
SY0701 |
二抗 |
Cy3标记山羊抗大鼠IgG(H+L) |
SY0453 |
蛋白质研究 |
牛血清白蛋白(无DNase、蛋白酶、IgG) |
SY0146 |
报告基因检测 |
STAT3-Luc 报告基因慢病毒颗粒 |
SY0709 |
二抗 |
Alexa Fluor 488标记兔抗山羊IgG(H+L) |
SY0026 |
核酸扩增(PCR) |
2×PCR Master Mix(不含染料) |
SY0251 |
核酸电泳和回收 |
DNA上样缓冲液 |
我公司生产供应销售的克隆与表达产品正全系列现货促销,满分期待您的垂询选购北京现货pUM19-T Vector TA克隆载体怎么卖。