神经丝轻链蛋白（NF-light）检测试剂盒

【产品名称】
通用名称：神经丝轻链蛋白（NF-light）检测试剂盒
英文名称：NF-light®(Neurofilament light) ELISA
【规格】 96T

【预期用途】
神经丝轻链蛋白（NF-light）检测试剂盒能在脑脊液中定量检测人神经丝轻链（NF-L）蛋白。该抗体与大鼠、牛和猕猴的神经丝轻链交叉反应，故可用于上述种类的检测。使用酶免法定量检测人脑脊液中的神经丝轻链NF-light）。该实验使用两种高特异性的非竞争性单克隆抗体。 

神经丝是神经细胞主要的细胞骨架成分。对于保持轴突口径和形态的完整十分重要，影响着神经传输的速率和准确性。存在着三种不同的神经丝链，根据其大小而定义，分别为神经丝轻链、神经丝中链和神经丝重链。神经丝轻链组成了重链的骨架，重链聚集形成了神经丝纤维。由于直接的创伤或者缓慢的退化过程，受损的神经细胞内容物释放至周边的隔室，所以可以定量检测轴突蛋白。升高的神经丝轻链水平已发现在各类退行性疾病中，例如肌萎缩性[脊髓]侧索硬化、阿尔茨海默病、多发性硬化和在动物模型中的慢性实验性自身免疫性脑脊髓炎。

样品

脑脊液不应被血液污染。所有患者样本都应被视为具有潜在传染性。在Lumbal穿孔后，样品应在聚丙烯管中保持在-80℃。应避免反复冻融。
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【检测原理】
NF-light检测试剂盒利用ELISA夹心法原理。一种特异性单克隆抗体包被在固相表面并连接神经丝。通过使用另一种酶标记的单克隆抗体进行检测。通过酶促反应使无色的底物液转化为有色产物，颜色的强度与样本中神经丝含量成正比。

【储存及效期】
神经丝轻链蛋白（NF-light）检测试剂盒储存于2-8℃，远离高温或者直接的光照。 自生产之日起有效期为18个月。
试剂盒一旦开启，该酶标板应在开封后的4周使用，确保密封干燥保存。
 

化验说明

所有分析试剂应在使用前置于室温。
每次清洗循环后，应将盘子与吸水纸擦干。以800转/分的转速搅动制动盘非常重要。

1. 用等量（1+1）样品稀释剂（SAMDIL）稀释CSF样品，使其总最小体积达到210μl。根据标准稀释表重新配制和稀释的标准品可随时使用（即不应进一步稀释）。
2. 用洗涤缓冲液（3x300μl）清洗要使用的孔。在下一个洗涤周期之前，可以通过敲击吸收材料的板来吸出或去除添加的洗涤缓冲液。
3. 每种标准品加100μL，一式两份。在室温（20-25℃）下温育1小时。
4. 用洗涤缓冲液（3x300μl）清洗孔。
5. 向每个孔中添加100μl新鲜稀释的示踪抗体。在室温（20-25℃）下温育45分钟。
6. 用洗涤缓冲液（3x300μl）清洗孔。
7. 向每个孔中添加100μl新稀释的酶联物。在室温（20-25℃）下温育30分钟。
8. 用洗涤缓冲液（3x300μl）清洗孔。
9. 在每口孔中加入100μl TMB。在室温（20-25℃）下温育15分钟。
10. 向每个孔中添加50μl的终止液，并读取450nm（参考波长620-650nm）处的吸光度。

注意：终止液含有稀释硫酸，具有腐蚀性。
 

【警告和注意事项 】

1. 仅供研究使用。仅供专业人士使用。

2. 开始分析前，请仔细阅读使用说明。使用试剂盒随附的软件包插件的有效版本。确保一切都被理解。
3. 如果试剂盒包装严重损坏，请在收到试剂盒后一周内以书面形式与供应商联系。不要使用损坏的部件。请将损坏的部件存放起来，以解决与投诉相关的问题。
4. 不要混合不同批次的试剂。不要使用过期的试剂。
5. 制备酶联物液时，请使用提供的15ml sarstedt管（62.554.502）。
6. 建议使用样品、质控品和标准品，一式两份。如果样品之间出现较大偏差，请重新分析。
7. 遵循良好的实验室实践和安全指南。必要时，穿戴实验室外套、一次性手套和防护眼镜。
8. 避免接触终止液。可能引起皮肤刺激和烧伤。本产品的材料安全数据表可直接从人体诊断学处索取。
9. 化学品和制备或使用的试剂必须按照国家生物危害和安全指南或法规作为危险废物处理。
10. 以800转/分的速度使用定轨振荡器。