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- BB-3112
- 2025年07月08日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
一年
- 库存：
大量
- 供应商：
贝博生物
- 规格：
50T/100 T
| 规格： | 50T | 产品价格： | ￥600.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 100 T | 产品价格： | ￥1000.0 |
贝博® BBproExtra® 核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中提取核蛋白和胞浆蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的核蛋白和胞浆蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。 本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解细胞核膜组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。 本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。 本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。 本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。
2.提取过程简单方便。
3.含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4.紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5.蛋白提取液含多种有效成分，可以充分释放胞浆蛋白和膜蛋白，又可结合释出的蛋白防止沉淀。
6.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
2.蛋白定量试剂盒
2.吸头
3.一次性手套
细胞蛋白提取
1. 提取液准备：
每200 μl蛋白提取液A中加入1 μl蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
每200 μl蛋白提取液B中加入1 μl蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2. 取5-10×106个细胞，在4℃，1000×g条件下离心5分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
3. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 每20 μl体积细胞沉淀（约20 mg，2×106个细胞）中加入200-300 μl冷的提取液 A，高速涡旋振荡15秒或吹打混匀，置2-8℃条件振荡15-30分钟。
5. 然后在4℃，1000×g条件下离心10分钟。
6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白，请置于冰上或-80℃冰箱保存备用。
7. 沉淀用PBS洗涤一次，在4℃，1000×g条件下离心5分钟，弃上清。
8. 在沉淀中加入200 μl冷的提取液B，高速涡旋振荡5秒。
9. 置2-8℃条件振荡30分钟，至沉淀明显减少甚至无明显沉淀。
10. 在4℃，14000×g条件下离心10分钟。
11. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。
12. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
组织蛋白提取
1. 提取液制备：
每200 μl蛋白提取液A中加入1 μl蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
每200 μl蛋白提取液B中加入1 μl蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2. 取适量组织样本，用手术剪刀尽可能剪碎，加冷PBS，用组织匀浆机/匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体，冰上静置5分钟，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。
3. 在4℃，500×g条件下离心5分钟，弃上清。
4. 每20 mg组织（20-30 μl细胞沉淀体积）中加入200 μl冷的提取液 A，高速涡旋振荡15秒或吹打混匀，置2-8℃条件振荡20-30分钟。
5. 然后在4℃，1000×g条件下离心10分钟。
6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白，请置于冰上或-80℃冰箱保存备用。
7. 沉淀用PBS洗涤一次，在4℃，1000×g条件下离心5分钟，弃上清。
8. 在沉淀中加入100-200 μl冷的提取液B，高速涡旋振荡5秒。
9. 置2-8℃条件振荡30-40分钟，至沉淀明显减少甚至无明显沉淀。
10. 在4℃，12000×g条件下离心10分钟。
11. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。
12. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
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文献和实验Preparation and in vitro immunomodulatory effect of curdlan sulfate
Carbohydrate Polymers 2014 （IF=6.044）
2.Guang Yu, Tonghai Yan et al.
Ser9 phosphorylation causes cytoplasmic detention of I2PP2A/SET in Alzheimer disease
Neurobiology of Aging 2013 （IF=6.189）
3.Wan Li, et al.
Anti-inflammatory effects of Morchella esculenta polysaccharide and its derivatives in fine particulate matter-treated NR8383 cells
International Journal of Biological Macromolecules 2019 （IF=4.784）
4.Mengjuan Wu, et al.
Phosphorylation of SET mediates apoptosis via P53 hyperactivation and NM23-H1 nuclear import
Neurobiology of Aging 2018 （IF=5.117）
5.Xiaoling Ma, et al.
Staphylococcal Panton-Valentine Leukocidin Induces Pro-Inflammatory Cytokine Production and Nuclear Factor-Kappa B Activation in Neutrophils
PloS one 2012 （IF=4.411）
6.Jinchun Qian, et al.
Ophiopogonin D prevents H2O2-induced injury in primary human umbilical vein endothelial cells
Journal of Ethnopharmacology 2010 （IF=3.014）
以下操作按照天根产品 DP433 血液总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 新鲜血液样品（ 200 μl ）2. 无水乙醇，β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器（DNase I配置），移液器及配套RNase-Free无菌枪头（200 μl ，1ml） 1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天根生化科技
以下操作按照天根产品 DP432 植物总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 植物样品（10-20 mg），研钵，液氮2. 无水乙醇，β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器（DNase I配置），移液器及配套RNase-Free无菌枪头（200 μl ，1ml） 1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天
RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒操作指南（DP419） ——植物
以下操作按照天根产品 DP419 RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 植物叶片 研钵 液氮2. 无水乙醇 氯仿3. 移液器及配套 RNase-free 无菌枪头（200 μl ，1ml），1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 涡旋振荡器，台式低温离心机实验准备-试剂盒准备：第一次使用前应在去蛋白液 RD、漂洗液 RW 中
