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细菌膜蛋白提取试剂盒

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  • 2025年07月16日
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      一年

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      大量

    • 供应商

      贝博生物

    • 规格

      50T/100 T

    规格:50T产品价格:¥800.0
    规格:100 T产品价格:¥1500.0

    贝博® BBproExtra® 细菌膜蛋白提取试剂盒是一种高效的高产膜蛋白提取试剂盒。细菌膜蛋白提取试剂盒可以从各种菌体中提取膜蛋白,可用于纯化蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。提取过程简单方便。本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解细胞膜组份,试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高质量的蛋白提供了保证。 本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。 本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。 本试剂盒中不含有EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。

     

    1.使用方便,从细菌中提取蛋白不需经过超声破碎等前处理。
    2.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
    3.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
    4.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
    5.本品可用于革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
    6.本品不含EDTA,可以用于金属螯合层析等下游应用。

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    1. 提取液制备:
    每500μl冷的提取液A中加入5μl提取液B 和2μl蛋白酶抑制剂混合物,充分混匀后置冰上备用。
    2. 离心收菌体,用PBS洗菌体2次。

    3. 按每100-150mg湿重菌体样本加入500μl冷的提取液A(大约菌体和提取液体积比1:3-1:5,完全淹没菌体即可),吹打混匀,在2-8℃振荡1-2小时,至菌体裂解完全,液体澄清,菌体沉淀减少。
    4. 将菌液在2-8℃低温下12000×g离心5分钟,取上清。
    5. 在37℃水浴10分钟。
    6. 在37℃, 1000×g离心3分钟。
    7. 此时液体分为2层,小心移除上层溶液,留管底部下层,大约50μl液体。
    8. 用50-200μl冷的膜蛋白溶解液溶解该溶液,即得细菌膜蛋白样品。
    9. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

    1.蛋白浓度低?
    膜蛋白丰度较低,需要尽可能加大细胞上样量。处理部分组织样本时可能没有裂解完全,导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂A的处理时间即可。最好在持续振荡的条件下处理,没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。

    2.用什么方法定量蛋白?
    建议用BCA法。不适合用Bradford法,因为试剂A中含有干扰Bradford法的组份,导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系,则可以用Bradford法定量。

    3.提取的蛋白具有活性吗?
    本试剂盒不含有离子型去垢剂组份,不破坏蛋白的结构,没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏,蛋白均保持其天然构象和活性。

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