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- BB-3151
- 2025年07月16日
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- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
一年
- 库存：
大量
- 供应商：
贝博生物
- 规格：
50T/100 T
| 规格： | 50T | 产品价格： | ￥800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 100 T | 产品价格： | ￥1500.0 |
贝博® BBproExtra® 细菌膜蛋白提取试剂盒是一种高效的高产膜蛋白提取试剂盒。细菌膜蛋白提取试剂盒可以从各种菌体中提取膜蛋白，可用于纯化蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。提取过程简单方便。本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解细胞膜组份，试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。 本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。 本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。 本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。
1.使用方便，从细菌中提取蛋白不需经过超声破碎等前处理。
2.含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
3.紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
4.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
5.本品可用于革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
6.本品不含EDTA，可以用于金属螯合层析等下游应用。
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文献和实验1. 提取液制备：
每500μl冷的提取液A中加入5μl提取液B 和2μl蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后置冰上备用。
2. 离心收菌体，用PBS洗菌体2次。
3. 按每100-150mg湿重菌体样本加入500μl冷的提取液A（大约菌体和提取液体积比1:3-1:5，完全淹没菌体即可），吹打混匀，在2-8℃振荡1-2小时，至菌体裂解完全，液体澄清，菌体沉淀减少。
4. 将菌液在2-8℃低温下12000×g离心5分钟，取上清。
5. 在37℃水浴10分钟。
6. 在37℃， 1000×g离心3分钟。
7. 此时液体分为2层，小心移除上层溶液，留管底部下层，大约50μl液体。
8. 用50-200μl冷的膜蛋白溶解液溶解该溶液，即得细菌膜蛋白样品。
9. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
1.蛋白浓度低？
膜蛋白丰度较低，需要尽可能加大细胞上样量。处理部分组织样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂A的处理时间即可。最好在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
2.用什么方法定量蛋白？
建议用BCA法。不适合用Bradford法，因为试剂A中含有干扰Bradford法的组份，导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系，则可以用Bradford法定量。
3.提取的蛋白具有活性吗？
本试剂盒不含有离子型去垢剂组份，不破坏蛋白的结构，没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏，蛋白均保持其天然构象和活性。
