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- 2025年07月15日
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贝博生物
- 规格：
100ml
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文献和实验【原创】Tricine SDS-PAGE凝胶配方（16.5％）
吧^_^）5.100％甘油6.样品缓冲液1ml甘油（100％），0.5ml巯基乙醇，1ml 0.5mol/L Tris-HCL（PH6.8，6.05gTris-HCL溶于100ml水中），溴芬兰痕量（0.005％～0.02％），加水至5ml水中，分装成1ml大小，－20摄氏度保存。二、Tricine SDS-PAGE凝胶配方（16.5％）30ml体系（小板胶10ml到15ml即可，spacer为0.5mm－0.75mm）：丙稀酰胺母液 （49.5％T，6％C) 10ml凝胶缓冲液液（3X） 10ml100％甘油
2～4 h，使抗体与 protein A 琼脂糖珠偶连； 免疫沉淀反应后，在 4 ℃ 以 3 000 rpm 速度离心 3 min，将琼脂糖珠离心至管底；将上清小心吸去，琼脂糖珠用 1 ml 裂解缓冲液洗 3～4 次；最后加入 15 μl 的 2 × SDS 上样缓冲液，沸水煮 5 分钟； SDS-PAGE，Western blotting 或质谱仪分析。 四、通过免疫共沉淀确定结合蛋白 用磷酸盐缓冲液洗 30 块 10 cm 培养板上的适宜
2O，2.8 ml浓度为30％的Acrylamide/Bis（29:1）(Bio-Rad)，1.75 ml的1.5M Tris-CL，pH 8.8(Sigma-Aldrich Ltd.)，70 μl浓度为10％的SDS(Bio-Rad)，70 μl 10 ％APS(Bio-Rad)，2.8μl TEMED(Bio-Rad) •5％SDS-PAGE浓缩胶（0.75 mm）; 1.7 ml ddH 2 O，0.415 ml 浓度为30％的Acrylamide/Bis（29:1）（Bio-Rad），0.315
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