SurA 重组细菌SurA

通过自杀质粒同源重组构建细菌突变株

自杀性质粒载体：一般用于基因突变。将突变的目的基因克隆到自杀性质粒载体上，通过接合等使其进入宿主，由于在宿主菌中不存在复制基因启始所需的复制蛋白（如Pi蛋白等），其无法复制，在外界选择性压力的作用下,自杀性质粒载体所携带的突变基因就与宿主染色体上的野生型发生基因发生二次同源重组，产生了带有突变的突变株；而质粒载体自身由于自杀性特性连同染色体上原有的野生型基因一起随着细菌的传代从菌体内消失。至于一次重组的突变株，可借助质粒上的某些选择基因（如sacB，sucrose敏感）筛除。整合载体：将目的

细菌的遗传与变异：基因的转移与重组

佚名         遗传型变异还可通过两个不同性质细菌之间发生遗传物质的转移和重组而实现.在基因转移中,提供DNA的细菌为供体,而接受DNA的细菌是受体。基因转移后获得重组的子代，即具有供体与受体菌二者的主要特性。实现基因转移需要两个基本条件：一是全部或部分供体菌的基因相应进入受体菌；二是在受体菌中形成重组(杂交)的 基因组

经验优化与高级技巧篇

，成本相对较高； 两者各有各的优势，可根据实验数据要求及实验室条件选择合适的方法，也可结合两种方法兼顾效率与准确性。   2. 质粒中内毒素残留对下游实验的影响 内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁中的一种成分，又叫脂多糖（LPS）。脂多糖对于宿主是有毒性的，当细菌破碎时，会释放到环境中。在细胞转染中，高内毒素会与 DNA 竞争转染试剂，从而减少质粒 DNA 的摄入量，导致转染效率下降。内毒素具有两亲性和负电荷性，性质类似于 DNA，因此在质粒纯化过程中容易伴随质粒一同被纯化出来。在细胞培养中，内毒