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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
产品内容
HEPENGBIO缓冲液(Reagent A) 毫升
HEPENGBIO裂解液(Reagent B) 毫升
HEPENGBIO分离液(Reagent C) 毫升
HEPENGBIO酶解液(Reagent D) 毫升
HEPENGBIO萃取液(Reagent E) 毫升
HEPENGBIO浓缩液(Reagent F) 毫升
HEPENGBIO沉淀液(Reagent G) 毫升
HEPENGBIO清理液(Reagent H) 毫升
HEPENGBIO保存液(Reagent I) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存HEPENGBIO裂解液(Reagent B)、HEPENGBIO酶解液(Reagent D)和HEPENGBIO萃取液(Reagent E)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里,有效保证6月
用户自备
2毫升离心管:用于样品操作的容器
1.5毫升离心管:用于样品操作的容器
微型台式离心机(例如EPPENDORF5415):用于样品操作
涡旋震荡仪:用于混匀反应物
恒温水槽:用于孵育反应物
实验步骤
实验开始前,将HEPENGBIO裂解液(Reagent B)、HEPENGBIO酶解液(Reagent D)和HEPENGBIO萃取液(Reagent E)从-20℃冰箱里取出,放入冰槽里融化。然后进行下列操作:
- 移取2毫升微藻菌液到2毫升离心管
- 放进微型台式离心机离心3分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf 5415)
- 小心抽掉上清液
- 加入xx毫升HEPENGBIO缓冲液(Reagent A),混匀细胞颗粒群
- 放进微型台式离心机离心3分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf 5415)
- 小心抽掉上清液
- 加入xx微升HEPENGBIO裂解液(Reagent B),混匀细胞颗粒群
- 涡旋震荡15秒
- 放进37℃恒温水槽孵育30分钟
- 加入xx微升HEPENGBIO分离液(Reagent C)(注意:使用前,先摇匀HEPENGBIO分离液(Reagent C))
- 加入xx微升HEPENGBIO酶解液(Reagent D)(注意:使用前,先混匀HEPENGBIO酶解液(Reagent D))
- 涡旋震荡15秒
- 放进60℃恒温水槽孵育30分钟(注意:可以增加孵育时间至2小时,增加DNA产量)
- 加入xx微升HEPENGBIO萃取液(Reagent E)(注意:使用前,先摇匀HEPENGBIO萃取液(Reagent E))
- 涡旋震荡30秒
- 放进微型台式离心机离心10分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf 5415)
- 移出450微升上层液相溶液到新的1.5毫升离心管(注意:不要触碰相位交界面)
- 加入xx微升HEPENGBIO浓缩液(Reagent F)
- 加入xx微升HEPENGBIO沉淀液(Reagent G)
- 上下翻转10至15次,混匀
- 放进微型台式离心机离心15分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf 5415)
- 小心抽掉上清液
- 加入xx毫升HEPENGBIO清理液(Reagent H)
- 放进微型台式离心机离心5分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf 5415)
- 小心抽掉上清液
- 空气中晾干
- 加入xx微升HEPENGBIO保存液(Reagent I)
- 溶解后,移出适量DNA溶液进行后续PCR反应或保存在-20℃冰箱里
注意事项
- 本产品为20次(2毫升菌液样品/次)操作
- 操作时,须戴手套
- 建议使用新鲜样品
- 本产品适合各种微藻菌株
- 通常1克湿重样品可以提取10微克左右DNA量;但不同菌株样品,存在很大差异(5至100
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文献和实验将其中的加人PVP的步骤省去,消除了PVP对以后操作的影响.2.3 氯化千法李思 光 等 (22〕在对称猴桃的基因组DNA 提取过程中选用了氯化节法,与其他方法相比该法的得率较高,其原因可能是氯化节不仅可与植物细胞壁上的多糖经基反应生成醚,而且与细胞液中多糖物质的All基反应,起到破坏糖链的作用,利于DNA的释放和提纯。2.4 高盐低pH法该 法 中 所用的提纯试剂仅为无机盐和异丙醇。通常采用的无机盐为醋酸钾,低pH的醋酸钾是有效的蛋白质沉淀剂。与一般氯仿一异丙醇反复抽提去除蛋白质的操作相比该法操作更
。 28181 QIAquick 96 PCR Purification Kit——采用真空抽滤的方法,利用硅胶膜技术25分钟内从PCR反应体系中回收高纯度的DNA,回收率高达90%(100bp~10kb),可除掉 99.5 %的引物,无需另外去除石蜡油,无需乙醇沉淀,无需酚、氯仿等有机试剂。纯化产物可直接用于芯片点样或测序。 Telechem 公司:世界著名的芯片供应商,提供各种芯片方面的耗材和试剂。其PCR产物纯化试剂盒利用高级滤膜技术,具有价格低、通量高、速度快等优点。无需乙醇沉淀,无需酚、氯
15 分钟,小心弃去上清液,用70%乙醇洗涤沉淀,4℃下12000g 离心5分钟。 6、小心弃去上清液,沉淀真空干燥5 分钟或空气干燥10 分钟,并溶于无RNA 酶的双菌水或TE缓冲液中。 7、取10ml 进行电泳分析,另10ml 用于cDNA 合成。 [注意] 1、整个操作应尽可能在低温下进行。 2、由于病毒RNA 镶嵌于外壳蛋白里面,因此要充分剥去病毒外壳蛋白,一般需要多次进行酚/氯仿的抽提。 第四节cDNA 合成技术 一、Riboclone M
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