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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
干燥密封保存
- 供应商:
赫澎(上海)生物
- 规格:
5次
产品内容
HEPENGBIO去毒液(Reagent A) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里,有效保证6月
用户自备
15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器
台式离心机:用于沉淀分层
涡旋震荡仪:用于混匀反应物
恒温水槽:用于孵育反应物
平式摇荡仪:用于混匀反应物
实验步骤
- 从-70℃冰箱里取出蛋白样品,置于冰槽里融化
- 移取10毫升蛋白样品(50至100毫克蛋白总量)到15毫升锥形离心管
- 加入xx毫升HEPENGBIO去毒液(Reagent A)(注意:使用前,充分混匀HEPENGBIO去毒液(Reagent A))
- 涡旋震荡15秒
- 在4℃条件下,横放离心管,置于平式摇荡仪上孵育30分钟,速度为50RPM
- 放进37℃恒温水槽孵育10分钟,期间涡旋震荡2次
- 放进台式离心机离心10分钟,速度为10000g
- 小心取出离心管,避免震动
- 小心移取上层液相(留下1.5毫升下层液相)到新的1.5毫升离心管
- (选择步骤)根据需要,重复实验步骤7至9一次
- 保存在-70℃冰箱里备用或即刻进行后续实验
注意事项
- 本产品为5次操作
- 本产品采用特殊亲脂溶液
- 使用HEPENGBIO去毒液(Reagent A)前,充分混匀,然后使用1毫升枪头移液
- 不同样品容量的操作,建议相应调整试剂用量:样品容量与试剂用量之比为10:1
- 如果样品中内毒素含量过高,建议重复操作3次
- 血清样品采用相同操作步骤,但须无菌操作
- 100毫升菌液的平均内毒素含量可高达15000 EU(30微克),介于5000至50000 EU
- 去内毒素程度取决于样品中内毒素含量和样品性质(细菌来源、融合蛋白特性),可以通过多次处理,达到彻底清除的效果;如果效果不甚理想,建议使用HEPENGBIO蛋白样品树脂法去内毒素试剂盒
- 经过本产品处理后的产物含有90%的蛋白成分以及100%的免疫源性
- 本公司提供系列内毒素处理试剂产品
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文献和实验微升人血浆中去除大于 98% 的白蛋白 去垢剂如 SDS、Tween、Tritonde 等是蛋白样品处理过程中常用的组分。去污剂在蛋白提取和样本制备过程中是很重要的物质,特别是研究疏水蛋白时。蛋白样本中高浓度去污剂的存在能够影响 ELISA,IEF 和蛋白的蛋白酶消化,以及用质谱进行分析时抑制肽的离子化。 所谓请神容易送神难。要除掉这些去垢剂?G-Biosciences 推出的 DetergentOUT™ GB-S10 去污剂去除柱子和树脂专门设计用来除于蛋白或其他生物样本中所
与试剂盒的工作状态,为进一步优化打基础。 预实验时需要认真阅读各类操作说明书,使用普通样品或少量样品进行条件摸索,记录结果和问题。优化方案时,每次只改变一个变量,对比优化结果和优化前的差别,修改实验设计至达到最佳实验效果。 到此 WB 方案设计完成,实验的整体思路已经非常明确了。做好 WB 整体设计是 WB 成功的开始!当然 WB 的成功还离不开严谨的实验操作和高质量的蛋白样品,只有选择适当的蛋白样品制备方式,才能锁定最终的成功。 Invent 离心管柱法系列蛋白快速提取和亚细胞结构分离工具,可提高
。 图 1. 富集质膜组分后检测跨膜蛋白更易检出:目的蛋白 SGL1 是跨膜蛋白,使用总膜蛋白检测困难,使用柱式法质膜及细胞组分分离试剂盒富集质膜后再检测质膜组分,可以显著提高 SGL1 的检出效率。 (图片来源:Kashiwagi Y,2015,PLoS ONE 10(6):e0130605. doi:10.1371/journal.pone.0130605.) (3)有条件诱导目的蛋白表达 如果通过增溶目的蛋白或分离亚细胞结构富集目的蛋白,仍无法得到 WB 条带,可通过查阅相关
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