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- 2025年10月30日
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赫澎（上海）生物
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赫澎生物坐落在金山区，。产品均为备货产品，下午2点之前的订单都可以发出。
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文献和实验实验室中时常听到这样的困惑，「明明通过免疫荧光（IF）能看到目的蛋白表达在细胞核膜上的表达，但为什么不论用总蛋白还是核蛋白进行 WB 检测，都无法检测到目的蛋白？」 类似这样的问题，你是否也深有感触？ 实际操作过程中，是否遇到过免疫荧光有结果而蛋白印迹却没条带的情况？什么原因导致了这种情况？又该如何处理？ 一、IF & WB 免疫荧光（IF）和免疫印迹（WB）都是利用抗原和抗体的特异性结合对目的蛋白质进行检测。IF 采用抗体和荧光检测固定细胞或组织中目的
物。一般SP三步法二抗选择Biotin标记的二抗，以与后面的SP结合反应；而免疫荧光染色就需要购买不同荧光素标记的二抗，如罗丹明、FITC、Cy3等常用荧光素。这主要与后面有无三抗和三抗种类有关。（3）选择IgM还是IgG。一般一抗是IgM，那么二抗就选择IgM；反之，一抗是IgG，则二抗选择IgG。（4）生产厂家。一般SP三步法我们实验室选择中杉金桥的二抗染色试剂盒，内含有工作液的二抗，故试验中只需摸索一抗的浓度即可，效果还可以；而免疫荧光的二抗我一般选择Jackson ImmnoResearch公司
液另一优点是它能免除某些方法为增加通透性所需冷冻细胞过夜的步骤。FACS 通透液使用前用无离子水 1 ： 10 稀释，勿用 PBS 或其它缓冲液。14 ．细胞内染色的标记荧光单抗试剂依据实验需要选择特殊胞内标志。例如，双色标记 IFN g -FITC/IL-4PE 与 CD3PerCP 组合是同时研究 TH1 与 TH2 型免疫反应常用选择。成功的胞内染色有赖于抗体与胞内靶位强效结合，胞内检测使用 BFA 等分泌抑制剂检测蛋白在高尔基体的转运，当然，此时蛋白
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