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- 文献和实验
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- 克隆性:
多克隆
货号: HP1258
规格: 100mL/500mL
保存: 4℃避光保存,复检期为3年。
产品简介: 目前酶免疫分析(EIA),已被广泛应用于抗原,半抗原或抗体的定量或定性检测分析。辣根过氧化物酶(HRP)及其偶联物是酶联免疫分析中常用的一种酶,由于3,3',5,5'-四甲基联ben胺(TMB)在HRP的显色反应体系中,比其它色原具有更高的灵敏度且无致癌性而被广泛应用。TMB 主要应用于酶联免疫吸附实验(ELISA),免疫斑点杂交或者免疫组化以及氯和过氧化氢的检测分析。 为了满足不同的试剂盒产品与以及科研需求,本公司专门研制了针对不同类型的基于HRP 的免疫分析用TMB显色液。
产品特点:
即用型:无需混合,方便快捷,减少误差
灵敏度高:不低于A、B液
稳定性好:2-8℃保存,有效期不低于36个月;显色终止后读数稳定
背景低:底物溶液在650nm检测时检测OD值小于0.04
质量可靠:产品批间差异小
外观:本试剂一般情况下为无色,有时略显浅蓝色或浅黄色
使用方法:
用适当的干净容器(用纯净水反复冲洗),倒出适量的单组分TMB显色液,待达到室温后即可使用。
加液:加完HRP结合物并孵育一定时间后,用适当洗涤液洗板3-5次,每孔加TMB显色液100ul。 根据个人实验需要,在室温(15-25℃)或37℃下避光温育10-30分钟或更长时间,直至显色至预期 深浅。
终止:加入等体积的1M 盐酸或硫酸溶液终止反应,孔中反应液由蓝色变为黄色。
读数:终止反应后30分钟内在450nm处测定吸光值。
注意:如果出现高的反应背景或沉淀,表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀,可在 终止后马上读数;或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物
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文献和实验【公告】丁香通试用中心:10月免费试用装精选(10月18日有更新)
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20mg 二甲基甲酰胺(DMF) 2.5ml 0.05mol/L醋酸缓冲液(pH5.5) 50ml 30%H2O2 25ml 配制方法:先将AEC溶于DMF中,再加入醋酸缓冲液充分混匀。临显色前,加入30%H2O2。切片显色时间为5~20min。 该显色液作用后,阳性部分呈深红色,加以苏木精或亮绿等作为背景染色,则效果更佳。由于终产物溶于酒精和水,故需用甘油封固。 4、TMB显色液 试剂:TMB HCl
相关专题ABC和TMB显色液已稀释好的ABC和TMB显色液在加入酶标板孔前都应预先在37℃中平衡至少30分钟。试剂或样品稀释时,切不可忘记混匀。每次检测都应该做标准曲线。用户须估计样品待测因子的含量,决定适当的稀释倍数。1. 确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目,并增加1孔作为TMB空白显色孔。总数=样品数+9;做双份检测时×2。其余重包装好放如冰箱中。2. 将1000pg/ml ,500pg/ml,250pg/ml,125pg/ml,62.5pg/ml,31.3pg/ml,15.6pg
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