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文献和实验有时面对细菌的入侵束手无策,无药可用。1992年美国疾病控制中心(CDC)的资料表明,有13300例住院患者,由于细菌感染得不到控制而死亡。其中多重耐药菌(Multi-drugresistantbacteria,MDR),即细菌对三种以上不同种类的抗菌药物产生耐药性的细菌,对全球的感染情况不容乐观,尤其对婴幼儿、免疫缺陷者和老年人的威胁更加严重。所以MDR感染已成为临床治疗上的难点和抗菌药物研究领域的热点。要解决耐药性这个难题,首先,是要找到耐药菌的耐药基因;其次,要根据这些耐药基因,设计新型抗生素
菌药物的耐药机制可有多种,最重要者为灭活酶的产生,如β-内酰胺酶、氨基糖苷钝化酶等;其次为靶位改变如青霉素结合蛋白(PBPs)的改变等;其他尚有胞膜通透性改变,影响药物的进入;细菌泵出系统增多、增强,以排出已进入细菌内的药物;以及胞膜主动转运减少、建立新代谢途径、增加拮抗药物等,两种以上的机制常可同时启动。耐药菌及MDR的发生和发展是抗菌药物广泛应用,特别是无指征滥用的后果。找到耐药菌的耐药基因,从而根据这些耐药基因设计新型抗生素,或将耐药菌分成不同的亚型,针对不同的亚型在临床上使用相应的抗生素,达到改善
mRNA 区域设计 siRNA。 2.选择 GC 含量低的 siRNA 研究人员发现 G/ C 含量 40–55% 的 siRNA 活性比 G/ C 含量高于 55% 的高。 3.纯化体外转录的 siRNA 确保所有用于转染的 siRNA 大小和纯度。为了实现最高级别的纯度,我们建议使用玻璃纤维过滤器结合和洗脱,或用凝胶纯化。所用的凝胶为 15- 20% 的丙烯酰胺凝胶,以除去反应体系中多余的核苷酸、短低聚物、蛋白质和盐。注意:化学合成的 RNA 通常需要通过凝胶电泳进行纯化。 4.谨防RNA
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