Caspase 3荧光法检测试剂盒(AFC)厂家

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编号：KFS199
产地：国产|进口
英文名：Caspase-3 Fluorescence Metric Assay
规格：20T|50T|100T
品牌：百奥莱博
本试剂盒适用于培养细胞及新鲜组织caspase-3 检测。Caspase 家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中caspase-3 为关键的执行分子，与DNA 断裂、染色质凝聚和凋亡小体形成有关。Caspase-3 在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；但在细胞发生凋亡阶段，它被激活，活化的Caspase-3 由两个大亚基和两个小亚基组成，裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。Caspase-3 荧光检测试剂盒就是将caspase-3 序列特异性的多肽偶联至发色基团。当底物被Caspase-3 剪切后，发色基团即游离出来，可通过荧光酶标仪测定其荧光强度（激发波长=485nm,发射波长=535nm）。

注意事项
1. Caspase-3 Substrate 避光保存及使用。
2. 对某些凋亡诱导剂引起的细胞凋亡可能存在非依赖于Caspase-3 活化的机制，这种情况时利用本试剂盒检测Caspase-3 活性无明显改变，需要考虑凋亡机制中的其他信号通路。
3. 细胞数量需达到3~5×106 个或新鲜组织50~100mg，以便能达到测定需要的100~200μg 蛋白的要求，因为Caspase-3 的活性与细胞裂解液的蛋白含量有关，如测定的RFU 值偏低，可以通过适当延长反应的时间，如果值还是不高，可通过增加细胞数量或组织量的方法来提高蛋白量。

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Caspase 3荧光法检测试剂盒(AFC)厂家关键词：Caspase 3荧光法检测试剂盒,KFS199,AFC


·Dylight405标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号：KFS431
规格：100μL

·10×Tris-CAPS半干转电转移缓冲液
编号：KFS095
规格：100ml×2
本产品作为蛋白电泳完毕后，将凝胶上蛋白电转移到PVDF 膜或其它膜上的缓冲液，pH9.6，含Tris-base、CAPS、甲醇，不含有甘氨酸，本电泳缓冲液适合非连续蛋白电泳及半干转蛋白电泳。

使用时按分别将正负极的10×电转移缓冲液按照：
10×Tris-CAPS 半干转缓冲液：甲醇：蒸馏水=10：15：75 的比例配制成1×的工作液，就可以用于电转移实验（甲醇体积15%）。

储存：RT，有效期12个月。

·kFluor430标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号：KFS396
英文名称：keyFluor430 Goat anti-Mouse IgG(H+L)
规格：100μL

浓度：2.0mg/ml
储存：4℃避光，有效期6个月(或-20℃避光，有效期一年)

荧光标记的山羊抗小鼠免疫球蛋白抗体能被荧光显微镜,激光扫描共聚焦显微镜,流式细胞术,荧光吸光检测器检测出。我们所给出的荧光标记宽度使我们的试剂几乎能适用于任何荧光检测机器。

山羊抗小鼠免疫球蛋白抗体是为了能和所有小鼠免疫球蛋白重链和轻链起反应的同类纯化抗体准备的。为了把交叉反应的影响降到最低,相比于其他抗体,山羊抗小鼠免疫球蛋白抗体应优先选择从小鼠免疫球蛋白和血清中提取。标记每个聚合物的标准是每一个免疫球蛋白分子用2-8个荧光团或生物素分子标记。在准备阶段,必须检测样品中有没有非结合的染料,并且把样品在无荧光实验中做检测以确保较低的非特异性染色的可能。

使用说明
1. 在使用前,用微型离心机短暂地分离蛋白质溶液，留取上清液进行实验。这一步除除去了储存中可能形成的蛋白质聚合物,因此减少了非特异性背景染色的可能。
2. 因为在不同的应用条件,染色方法是不同的,所以应该根据经验需要稀释适量的抗体。
3. 对于荧光团和生物素标记抗体, 1-10μg/mL 的终浓度应该适用于大部分的免疫组织化学应用。
4. 对于流式细胞术，1×106个细胞才能等到令人满意的结果。


Caspase 3荧光法检测试剂盒(AFC)厂家关键词：Caspase 3荧光法检测试剂盒,KFS199,AFC


·彗星电泳法检测细胞损伤试剂盒
编号：KFS210
规格：20T|100T|50T
DNA 在自由基（如·OH）的攻击下容易发生损伤，即脱氧戊糖遭到破坏，磷酸二脂键的断裂，碱基的破坏或脱落，便可进一步产生单链断裂或双链断裂。将细胞固定于低熔点琼脂糖中，取少量细胞涂在载玻片上，用碱高盐溶液破坏细胞膜，再用碱溶液使DNA 分子解旋。将载玻片置于电泳液中，在电场的作用下，DNA 分子向阳极移动。如果DNA 损伤严重，碎片多，则电泳速度快。未受损伤的DNA 大分子则由于细胞膜的阻隔，滞留在原处。用PI 染色或银染，可观察到DNA 受损的细胞形同彗星现象，作定性分析。也可用相关的软件作定量分析。

·自噬检测试剂盒(荧光显微镜，MDC法)
编号：KFS305
规格：100T
单丹磺酰尸胺（monodansylcadaverin, MDC）是一种荧光色素，其检测激发滤光片波长355nm。阻断滤光片波长512nm。MDC 是一种嗜酸性染色剂，通常被用作检测自噬体形成的特异性标记染色剂。

细胞自噬(autophagy)是细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器, 最终将吞噬物在溶酶体内降解的过程，自噬体(autophagosome)为双层膜包被的圆形或椭圆形结构, 内含细胞质、长寿蛋白质和异常蛋白聚集物, 损伤或多余细胞器如线粒体、粗面内质网和微体、病毒和细菌等。

·钠离子荧光探针
编号：KFS175
英文名称：SBFI, AM
规格：1mg
Na+敏感型染料,SBFI 和K+敏感型染料,PBFI，是钠钾离子浓度测定时所用到的选择性荧光指示剂。这类苯并呋喃间苯二甲酸酯的衍生物以及其具有膜透性的乙酰氧基甲基酯形式（AM 酯）可以在生理条件（含多种其他一价阳离子）下，给予钠钾离子浓度以上时间及空间上准确的变化测量精度。

此外，这类染料的激光光谱可以选择用与Fura-2 类似的滤光器与检测仪。.这些钠钾探针指示剂由荧光团与氮冠醚成环状连接，赋予各自的配位体选择性。在pH7，且Na 或K 离子缺失的情况下，SBFI 和PBFI 的消光系数大约在42,000 cm-1M-1（346 nm）。一旦与离子结合，其激发峰显著收窄，最大激发峰向短波段偏移，光能量吸收比值变为340nm/380nm。SBFI 结合Na 离子之后荧光强度约增强2.5 倍，但发射光谱最大值基本不变。pH6.5~7.5，这类荧光素的光谱特性基本维持不变，相比较而言，离子浓度和粘度对其影响更大。

虽然这类离子指示剂有相当的选择性，但对于Na 离子亲和的SBFI 来说K 离子同样有一定的影响，PBFI 也是如此。在K 离子生理浓度下，SBFI 对于Na 的Kd 值为11.3mM，而没有K 离子存在时，则为3.8mM。SBFI 对Na 的选择性比K 要高出18 倍。

同样地，PBFI 对K 离子的解离常数也强烈地依赖于Na 的存在。Na 的是否存在，使得PBFI 对于K 离子的Kd 从100mM 到10mM不等。虽然PBFI 对于K 离子的选择性仅仅高出Na 的1.5 倍，但在细胞的生理条件下，通常K 离子的浓度要高于Na 的10 倍以上。所以，在胞内加载探针时，这些探针的Kd 值应与适当的载体做校准。

用无水DMSO 制备SBFI 酯类的储液，浓度为10mM。SBFI AM 的相对分子量分别为1127.由于这类AM 酯形式的探针水溶性比较差，建议溶解时，使用必要的Pluronic F-127.通常可以在进行加载探针到细胞之前，将探针的DMSO 溶液与等体积25%（w/V）的PluronicF-127 混合。探针加载浓度范围：5μM~10μM，孵育时间40 分钟~4 小时。具体的加载条件最好能参考相关文献或者实验摸索，因为该探针在不同的细胞内的Kd 值不同。校准细胞内SBFI 的Kd 可以用短杆菌肽抗生素。一般来说，这些指示探针可以用340nm 激发光激发，但在380nm 荧光对于目的离子的浓度尤其敏感。发射峰的检测可以设置在500nm，计算Na+浓度。

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