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过氧蛋白同源物(PXDN)重组蛋白

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  • ¥980 - 2950
  • ZYBio/进口品牌
  • 中国/美国
  • ZYP070Hu02
  • 2026年01月15日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保质期

      6-12months

    • 英文名

      Recombinant Peroxidasin Homolog (PXDN)

    • 库存

      大量

    • 供应商

      泽叶生物

    • 规格

      50ug/100ug/1mg

    上海泽叶生物科技有限公司是一家集研发、生产和销售于一体的生命科学实验室产品创新性高科技企业。主要从事免疫学,重组蛋白,细胞因子,抗原/多肽/蛋白等产品主要包括免疫调节蛋白、白细胞介素、CSFs、生长因子、干扰素、Chemokines 、Adipokines 、TGFß / BMP Proteins、神经因子、FGFs和TNF配体/受体防御因子等。并代理销售Amresco,qiagen Millipore,eBioscience,Sigma,SANTA,Sciencell,R&D、GBD、ATCC、HYCLONE, CELLutions Biosystems INC , Neuromics , Chemicon, Equitech-bio, Biovision, Promega, Kamiya, Prospec, Cytoskeleton, Novagen, SurModics, Cytelligen LONZA等二十多家国外知名品牌,致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务。

    经甲醛固定的部分组织细胞,因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇,使免疫组化标记敏感性明显降低,因此在染色前,有些抗原需进行修复或暴露。

    抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法,常用胰蛋白酶及胃蛋白酶,配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和高压加热。在选用这三种方法时,浸泡切片的缓冲液的离子强度和pH、加热的温度和时间均影响着抗原修复效果。
    1
    、pH的应用范围及选择

    抗原修复液的pH非常重要,有效的抗原修复pH要比修复液的化学成分更重要,同样的修复液随着pH的升高染色的强度逐渐增强,但最佳pH范围为6.0-10.0。目前大家公认的最好的抗原修复液是pH6.0的柠檬酸盐缓冲液和pH8.0的EDTA缓冲液。作为通用修复液碱性pH的修复液要比酸性的有效,而对固定很长时间旧的存档组织,酸性pH的修复液则优于碱性的修复液。

    2、抗原修复时应选择最佳温度

    70-90℃的温度对未经固定的蛋白质可发生变性,但经福尔马林固定的蛋白质,温度必须达到92℃以上方能使其变性。研究结果显示,温度为92-98℃是合适的,95℃效果最好。

    3、抗原修复液必须遵循自然降温规律,否则效果不好或达不到抗原修复的目的

    抗原修复持续时间过后,取出放于室温中让其慢慢地降温,绝对不能为了争取时间,强行用冰块或冷水使其降温。这是因为当高温中的抗原蛋白分子链脱离了其他的束缚或联结,要有一个自然环境让其自然放松下来,随着温度的降低,它们会慢慢地恢复原来的形态和构型。

    4、尽量使用足量的抗原修复液

    应用于抗原修复的液体,一定要充足,防止切片干涸。应用大量的抗原修复液时,由于它的量较大,可延缓液体的沸腾时间,增加切片受微波辐射的量,对抗原修复将达到彻底。

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    图标文献和实验
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    • 捕获ELISA法

      指南,用户需要确定自己的最佳实验条件以获取最好的成果。 2.1经由加入具有抗原特异性的抗体到适当的孔(1微克/孔)以加入捕获抗体,浓度应为10微克/毫升于涂层缓冲液中,量应为100μL/孔。※捕获抗体应该是纯化的抗体。2.2在4℃下孵育孔盘过夜。2.3加入250μl封闭液到每个孔中。2.4孵育孔盘于室温下1小时。2.5清空孔盘,用PBST(0.05%Tween-20)洗涤孔盘一次。2.6如果待测为:A,重组蛋白-以稀释剂稀释待测至100毫微克,30毫微克,10毫微克,3纳克,1纳克

    • 抗体选择

      特异性的选择主要需要考虑四个方面:蛋白特异性、种属特异性、实验方法特异性、标记物的特异性。 (1)蛋白特异性 针对需要检测的蛋白查找抗体,几个细节要区分,重组表达的蛋白和内源性蛋白的检测,对抗体的要求是不一样的,注意查看抗体说明书的检测说明。如果重组蛋白不是全长表达,则需要注意抗体的免疫原区域是否在重组蛋白区域内。内源性蛋白最好能清楚其剪切与修饰的方式,特殊表型的蛋白需要进行序列比对,并结合抗体免疫原序列,查看交叉反应的情况。磷酸化蛋白检测需要确定具体位点,不同位点的磷酸化意味

    • 免疫印迹(Western Blotting)实验

      的缓冲液中),但不同的抗原-抗体反应,封闭条件均不相同,没有适合所有系统的封闭液,具体封闭条件(包括封闭液浓度、缓冲液种类、封闭时间、温度等)需自行优化。 注意事项 a. 影响非特异性结合的因素很多,针对不同的免疫原,其封闭条件均可进行优化,没有通用的封闭液,因为每个抗原-抗体反应都具有独特的性质; b. 在选择封闭时,最重要的标准是信噪比,封闭条件不足,会导致过多的背景噪音,封闭条件过度,会造成信号变弱; c. 可根据不同的检测系统(碱性磷酸酶或辣根过氧

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