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EASYspin 通用植物RNA快速提取试剂盒

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  • ￥650
  • 艾德莱/aidlab
  • 国产
  • RN5201
  • 2025年12月29日
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    • 保存条件：

      常温

    • 英文名：

      EASYspin Universal Plant RNA Kit

    • 库存：

      充足

    • 供应商：

      杭州昊鑫生物

    • 规格：

      50次

    RN52-EASYspin 通用植物RNA快速提取试剂盒/DNase I

    目录：RN52

    试剂组成、储存、稳定性：

    试剂组成 保存 50 次 (RN5201)
    裂解液 RPA 室温 50 ml
    去蛋白液 RW1 室温 40 ml
    漂洗液 RW 室温 10 ml（第一次使用前按说明加定量乙醇）
    RNase-free H₂O 室温 10 ml
    DNase Buffer -20℃ 1.25 ml × 2
    RNase free DNase I -20℃ 0.25 ml
    RNase-free 吸附柱 RA 和收集管 室温 50 套
     
    本试剂盒按照各成份指示储存 12 个月不影响使用效果。
     
    储存事项：
    1. 常温成份不合适的储存于低温（4℃或者 - 20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃—25℃）进行。
    2. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH 值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。

    产品介绍：

    独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞 RNA 酶，然后用乙醇调节结合条件后，RNA 在高盐高浓度状态下选择性吸附于离心柱内硅质膜，DNase 直接在柱上消化残留 DNA，再通过一系列快速的漂洗 — 离心的步骤，去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白质等杂质去除，最后低盐的 RNase free H₂O 将纯净 RNA 从硅质膜上洗脱。

    产品特点：

    1. 完全不使用有毒的 β- 巯基乙醇 / phenol / 氯仿，也不需要乙醇沉淀等步骤。
    2. 简捷，单个样品操作一般可在 40 分钟内完成，世界上最快速的试剂盒。
    3. 配套 DNaseⅠ 柱上消化，得到的 RNA 不残留 DNase 消化，可直接用于反转录、荧光定量 PCR、二代测序、芯片、RACE 等实验。
    4. 世界领先，是同类产品中适应性最广泛的试剂盒，可以提取包括水稻、玉米、小麦、拟南芥、番茄、烟草、烟草和一般多糟多酚如棉花、冬青等植物。
    5. 多次柱漂洗确保高纯度，OD₂₆₀/OD₂₈₀典型的比值达 2.0—2.2，无 DNA 残留，可直接用于荧光定量 PCR、RT-PCR、芯片、二代测序、Northern-blot 等各种实验。

    注意事项

    1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到 13,000rpm 的传统台式离心机。
    2. 需要自备乙醇，研钵 (可选)。
    3. 裂解液 RPA 和去蛋白液 RW1 中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服，若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

    操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）

    提示：
    ⇨ 第一次使用前请先在漂洗液 RW 瓶加入指定量无水乙醇！
    1. 直接研磨法（推荐）：
       
      a. 新鲜植物组织称重后取 100-200mg 迅速剪成小块放入研钵（冰冻保存或者液氮保存样品可直接称重取 100-200mg 放入研钵），加入 1ml 裂解液 RPA 室温充分研磨成匀浆，注意应该迅速研磨让组织和裂解液 RPA 立刻充分接触以抑制 RNA 分解活性。
       
      b. 将裂解物转入离心管，剧烈摇晃振荡 15 秒，13,000rpm 离心 5-10 分钟，沉淀不能裂解的碎片。
       
      c. 取 450μl 裂解物上清（在不超过 RNA 吸附柱能力的情况下可以取更多或者全部上清，这样可以提高产量）转到一个新离心管。加入上清体积一半的无水乙醇 (0.5 体积)，此时可能出现沉淀，但是不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。
       
      d. 立刻按操作步骤的步骤 3。
    2. 液氮研磨法：
       
      a. 取 500μl 裂解液 RPA，转入 1.5ml 离心管中。
       
      b. 液氮中研磨适量植物组织成细粉后，取 50-100mg 细粉转入上述装有 RPA 的离心管，立即用手剧烈振荡 20 秒，充分裂解。
       
      c. 用喉头吹打匀浆帮助裂解或者剧烈摇晃震荡直到得到满意匀浆结果 (或者电匀浆 30 秒)，可以剪切 DNA，降低粘稠度和提高产量。
       
      d. 将裂解物 13,000rpm 离心 5-10 分钟，沉淀不能裂解的碎片。
       
      e. 取裂解物上清（在不超过 RNA 吸附柱能力的情况下可以取更多的上清，这样可以提高产量）转到一个新离心管。加入上清体积一半的无水乙醇 (0.5 体积)，此时可能出现沉淀，但是不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。
       
      f. 立刻按操作步骤的步骤 3。
       
      注意：以上液氮研磨的方法可以根据需要加倍处理，可以提高产量。也就是使用 1ml 的裂解液 RPA 和 100-200mg 的样品。
    3. 将混合物 (每次小于 720μl，多可以分两次加入) 加入一个吸附柱 RA 中，（吸附柱放入收集管中）13,000rpm 离心 2 分钟，弃掉废液。
       
      确保离心后液体全部滤过去，膜上没有残留，如有必要，可以加大离心力和离心时间。
    4. 加 350μl 去蛋白液 RW1，室温放置 1 分钟，13,000rpm 离心 30 秒，弃掉废液。
    5. DNaseⅠ 工作液配制：取 45μl DNase buffer 和 5μl RNase free DNaseⅠ 在离心管轻轻吹打混匀成工作液（处理多个离心柱子要按照比例放大制备工作液）。
    6. 向吸附柱 RA 中央加入 50μl 的 DNaseⅠ 工作液，室温（20-30℃）放置 15 分钟。
       
      注意直接将工作液滴在膜中央，不要让工作液滴在 O 型圈或是离心柱管壁上。
    7. 向吸附柱 RA 中加入 350μl 去蛋白液 RW1，12,000rpm 离心 30 秒，弃废液，将吸附柱放回收集管中。
    8. 加入 500μl 漂洗液 RW（请先检查是否已加入无水乙醇），13,000rpm 离心 30 秒，弃掉废液。加入 500μl 漂洗液 RW，重复一遍。
    9. 将吸附柱 RA 放回收集管中，13,000rpm 离心 2 分钟，尽量除去漂洗液，以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
    10. 取出吸附柱 RA，放入一个 RNase free 离心管中，根据预期 RNA 产量在吸附膜的中间部位加 30-50μl RNase free water（事先在 70-90℃水浴中加热可提高产量），室温放置 1 分钟，12,000rpm 离心 1 分钟。
    11. 如果预期 RNA 产量 > 30μg，加 30-50μl RNase free water 重复步骤 10，合并两次洗液，或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重复步骤一遍 (如果需要 RNA 浓度高)。
       
      洗脱两遍的 RNA 洗脱液 RNA 浓度高，分两次洗脱合并洗脱液的 RNA 产量比前者高 15-30%，但是浓度更低，用户根据需要选择。
    注意：如果不需要做荧光定量 PCR，仅仅做普通的反转录，克隆基因片段，可以省略 DNA 酶柱上消化的步骤，具体就是第 4 步骤的 “加 350μl 去蛋白液 RW1” 改成 “加 700μl 去蛋白液 RW1”，同时省略步骤 5，6，7。

     

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    图标文献和实验
    该产品被引用文献

    Genetic and Transcriptome Analyses of Callus Browning in Chaling Common Wild Rice (Oryza rufipogon Griff.)(茶陵普通野生稻愈伤组织褐变的遗传与转录组解析)

    引用文献图片1

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    2.     樱桃花、叶、颚等各部位：Over-expression of the PaAP1 gene from sweet cherry (Prunus avium    L.)    causes early floweri.Journal of Plant Physiology, 2012,Available online 1 December    2012

    3.     洋葱根、茎、蕾、叶、雌雄蕊等各部位：Cloning and Expression Analysis of A Putative B Class MADS-box    Gene of AcPI in Onion. Scientia Agricultura Sinica, 2012, 45(23):4759-4769

    4.     芜菁：Isolation and Functional Characterisation of the Genes Encoding Δ8-Sphingolipid       Desaturase from Brassica rapa. Journal of Genetics and Genomics Volume 39, Issue 1, January    2012,    Pages 47–59

    5.     芜  菁 1 ：EXPRESSION, DIVERGENCE AND EVOLUTION OF THE CALEOSIN GENE FAMILY IN BRASSICA RAPA. Arch. Biol. Sci., Belgrade, 65 (3), 863-876, 2013 DOI:10.2298/ABS1303863H

    6.     番茄叶：Effect of Low Temperature Stress on the Expression of ProDH Gene and the Activities of the Proline Dehydrogenase in Leaves of Tomato Seedling. Chinese Agricultural Science  Bulletin 2012,28(10):132-135

    7.     栀子叶：Isolation of High Quality Total RNA from Gardenia jasminoides Eills.Chinese Agricultural    Science Bulletin.2012, 28(27):194-198

    8.     油桐果实：Cui Qinqin, Han Xiaojiao, Chen Yicun, Zhan Zhiyong, Lin Liyuan, Wang Yangdong.     Isolation and Expression Characteristics of Biotin Carboxyl Carrier Protein Coding Gene（VfBCCP)  from Vernicia fordii.SCIENTIA SILVAE SINICAE. 2012, 48(8): Available online August

    9.     油桐果实1：Selection of Reliable Reference Genes for Gene Expression Studies Using Real-Time    PCR in Tung Tree during Seed Development. PLoS ONE, 2012, 7(8): e43084

    10. 紫菜：Molecular cloning and expression analysis of ribosomal protein S7 gene from Porphyra    haitanensis. JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA, 2011, 35（12）：1814-1821

    11. 石斛：Molecular characterization of a mitogen-activated protein kinase gene DoMPK1 in Dendrobium officinale. Acta Pharmaceutica Sinica, 2012, 47 (12): 1703-1709

    12. 石斛1：ESTs Analysis Reveals Putative Genes Involved in Symbiotic Seed Germination in Dendrobium officinale. Symbiotic Germination Genes in D. officinale. August 2013 | Volume 8 | Issue 8 | e72705

    13. 大豆：RNA-seq Analysis Reveals Ethylene-Mediated Reproductive Organ Development and Abscission in Soybean(Glycine max L. Merr.). Plant Mol Biol Rep, 2012, published online: 4 Dec, 2012

    14. 大豆1：Construction of ethylene regulatory network based on the phytohormones related gene transcriptome profiling and prediction of transcription factor activities in soybean. Acta Physiol Plant, 2012, published online: 12 Dec, 2012

    15. 红花玉兰：Expression Analysis of MAwuAG in Different Organs and Developmental Stages of Magnolia wufengensis. Chinese Bulletin of Botany, 2013, 48 (2): 1–5

    16. 毛桃：Cloning and Phylogeny Analysis of PpAP2 Floral Homologous Genes in Peach. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2013, 29(7): 99-104

    17. 五倍子：Cloning and characterisation of a phenylalanine ammonia-lyase gene from Rhus chinensis. Plant Cell Rep, 2013, published online：15 March, 2013

    18. :五倍子1：Cloning, characterization and expression of chalcone synthase from medicinal plant Rhus chinensis.J. Plant Biochem. Biotechnol. DOI 10.1007/s13562-013-0231-9

    19. 青杄 ：cDNA Cloning and Bioinformatic Analysis of the sPPa1 Gene form Picea wilsonii. Plant Science Journal, 2012, 30(40): 394-401

    20. 青杄 1：cDNA Cloning and Bioinformatic Analysis of PsbO Gene from Picea wilsonii.Life Science Research, 2012, 16(3): 201-206

    21. 青杄 2：Cloning and Tissue Expression Analysis of PwPSAF in Picea wilsonii. SCIENTIA SILVAE SINICAE. Vol. 49，No. 10, Oct. 2013.

    22. 洋葱：Molecular Cloning and Transcriptional Analysis of the Putative AGAMOUS Homolog AcAG in Onion (Allium cepa. Plant Mol Biol Rep, DOI 10.1007/s11105-013-0607-y

    23. 木瓜：XsFAD2 gene encodes the enzyme responsible for the high linoleic acid content in oil accumulated in Xanthoceras sorbifolia seeds. JOURNAL ARTICLE. 2013-6-17.

    24. 木瓜1：Two novel diacylglycerol acyltransferase genes from Xanthoceras 2 sorbifolia are responsible for its seed oil content. GENE-38688; No. of pages: 9; 4C:

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    26. 柑橘1：Expression Analysis of Three Phloem-specific Promoters in Transgenic Poncirus trifoliata. Acta Horticulturae Sinica. 2014, 41(1): 1–8.

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    29. 栀子：Isolation of High Quality Total RNA fromGardenia jasminoides Eills. Chinese Agricultural Science Bulletin. 2012, 28(27):194-198

    30. 丹参：Genome-wide analysis and molecular dissection of the SPL gene family in Salvia miltiorrhiza. 2014 Jan;56(1):38-50. doi: 10.1111/jipb.12111. Epub 2013 Nov 20.

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    36. 桃子：Biochemical changes and defence responses during the development of peach gummosis caused by Lasiodiplodia theobromae. Eur J Plant Pathol (2014) 138:195–207, DOI 10.1007/s10658-013-0322-4.

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    38. 海棠：The Malus crabapple transcription factor McMYB10 regulatesanthocyanin biosynthesis during petal coloration. Scientia Horticulturae 166 (2014) 42–49.

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    40. 油茶：Establish a cDNA-AFLP Technology System in Camellia oleifera. Molecular Plant Breeding, 2013, Vol.11, No.5, 611-616.

    41. 亚洲百合：Transcriptomic analysis of Asiatic lily in the process of vernalization via RNA-seq. Mol Biol Rep. DOI 10.1007/s11033-014-3250-2.

    42. 毛泡桐：Dynamic expression of novel and conserved microRNAs and their targets in diploid and tetraploid of Paulownia tomentosa. Biochimie xxx (2014) 1e10.

    43. 人参：Cloning and Sequence Analysis Squalene Epoxidase Gene in Panax gin-seng. Journal of Jilin Agricultural University 2014, 36(2): 149-152,17

    44. 雪莲：Cloning and Sequence Analysis of rbcs Gene from Sasussured involucrdta Kar. et Kir. Chinese Agricultural Science Bulletin 2014, 30(15): 261-267

    45. 柑橘3：Secreted Expression of Cecropin B Gene Enhances Resistance to Xanthomonas axonopodis pv. citri in Transgenic Citrus sinensis‘Tarocco’ Acta Horticulturae Sinica 2014, 41(3): 417–428

    46. 菊花：Stem apex detoxification culture markedly improved severalphysiological characters of chrysanthemum ‘YUTAI’. Plant Cell Tiss Organ Cult 2014, DOI 10.1007/s11240-014-0541-1

    47. 荞麦和拟南芥：Ectopic expression of FaesAP3, a Fagopyrum esculentum (Polygonaceae) AP3 orthologous gene rescues stamen development in an Arabidopsis ap3 mutant. Gene 2014, 550(2): 200–206

    48. 油松：Differential expression of SLOW WALKER2 homologue in ovules of female sterile mutant and fertile clone of Pinus tabulaeformis. Russian Journal of Developmental Biology 2014, 45(2): 78-84

    49. 玫瑰花：Precise spatio-temporal modulation of ACC synthase by MPK6 cascade mediates the response of rose flowers to rehydration. The Plant Journal 2014, 79(6): 941–950

    50. 棉花和拟南芥：Functional characterization of GhAKT1, a novel Shaker-like K+ channel gene involved in K+ uptake from cotton (Gossypium hirsutum). Gene 2014, 545(1): 61–71

    51. 棉花和拟南芥1：Upland Cotton Gene GhFPF1 Confers Promotion of Flowering Time and Shade-Avoidance Responses in Arabidopsis thaliana. PLoS ONE 2014, 9(3): e91869. doi:10.1371/journal.pone.0091869

    52. 白杨：Poplar GATA transcription factor PdGNC is capable of regulating chloroplast ultrastructure, photosynthesis, and vegetative growth in Arabidopsis under varying nitrogen levels. Plant Cell Tiss Organ Cult 2014, DOI 10.1007/s11240-014-0536-y

    53. 毛果杨：Molecular characterization of the SPL gene family in Populus trichocarpa. BMC Plant Biology 2014, 14: 131

    54. 葛根：Molecular cloning and characterization of an isoflavone 7-O-glucosyltransferase from Pueraria lobata. Plant Cell Reports 2014, 33(7), 1173–1185

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    57. 黄鹌菜：Transcriptome Sequencing and De Novo Analysis of Youngia japonica Using the Illumina Platform. PLoS ONE 2014, 9(3): e90636. doi:10.1371/journal.pone.0090636

    58. 棉花1：Gibberellin Overproduction Promotes Sucrose Synthase Expression and Secondary Cell Wall Deposition in Cotton Fibers. PLoS ONE 2014, 9(5): e96537. doi:10.1371/journal.pone.0096537

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