- ¥1580 - 8890
- 美国ATCC
- 美国
- ZY-s004
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 供应商：
泽叶生物
- 肿瘤类型：
见说明书
- 细胞类型：
细胞系
- 品系：
见说明书
- 相关疾病：
见说明书
- 物种来源：
鼠
- 免疫类型：
见说明书
- 细胞形态：
贴壁；上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 器官来源：
鼠
- 运输方式：
干冰运输及发送复苏存活细胞
- 年限：
2年
- 生长状态：
贴壁
- 规格：
株
含量：>1x106 个/mL
污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格：T75瓶或者1mL冻存管包装
含量：>1x106 个/mL
污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格：T75瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存：前脂肪细胞可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：（1）干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏；（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供科研使用。
如何去除原代培养中的成纤维细胞
培养细胞的纯化：1、自然纯化：即利用某一种类细胞的增殖优势，而排挤其他细胞生长，靠自然的增值潜力最后留下生长优势细胞，去除其他细胞。有些恶性肿瘤细胞可以通过此方法，自然纯化建立细胞系。
2、人工纯化（1）酶消化法：在消化培养细胞时，常是成纤维细胞先脱壁，而上皮细胞要消化相当长的时间才脱壁，特别是在原代培养和培养早期这种差别尤为明显，因而可以利用这种差异采用多次差别消化方法将上皮细胞和成纤维细胞分开。
（2）机械划除法：前脂肪细胞原代培养成功后，上皮细胞和成纤维细胞所数都同时出现，混杂生长。这种混杂生长常常分区成片，每种细胞都以小片或区域性分布的方式生长在瓶壁上。因此可以采用机械的方法去除不需要的细胞。
（3）反复贴壁法：成纤维细胞与上皮细胞相比，其贴壁过程快，大部分细胞常能在短时间内大约10－30min完成附着过程，而上皮细胞大部分在短时间内不能附着或附着不稳定，稍加振荡即浮起，这样可以利用此差别来纯化细胞。
（4）克隆法：采用细胞克隆法将细胞分成单个细胞，使之分别生长成克隆，选择出所需要的克隆。
（5）前脂肪细胞培养及限定方法：某些细胞在生长过程中必须存在或必须去除某种物质，否则无法生长，可以利用这种技术来纯化细胞。
（6）流式分选。
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文献和实验吸管反复吹打使组织块分散，然后通过孔径25μM（200目）的筛网过滤，收集滤液和未过滤的组织块。5、将滤液以600g离心5分钟弃上清，加入原代培养的基础培养基制成细胞悬液。6、将未滤过的组织按照上述过程再处理一次，将俩次获得的细胞悬液混匀计数，按照104个/cm2的密度接种于培养瓶里，于37度，5％CO2培养箱中培养。接种12－16小时基本贴壁。在增殖状态下的前脂肪细胞可以使用胰蛋白酶消化的方法传代，并且可以冻存和复苏。
组织，洗净血污。称取脂肪垫的重量； 2. 分离细胞； ① 将脂肪垫剪成1mm3 左右的小块，转入50ml锥形离心管中； ② 每0.1g组织块加入3—4ml消化液。在37℃水浴摇床上以60r/min的转速轻微振荡，消化1h。其间每隔10min取出离心管，摇动，使组织块与消化液充分混匀； ③ 消化完后，用吸管反复吹打消化液，分散组织块，制成细胞悬液； ④ 用孔径为250µm的尼龙网筛过滤细胞悬液，除去未分散的组织块，收集滤液。将滤过液再用孔径为80µm的尼龙网筛过滤，除去大部分成熟脂肪细胞
WB 实验是最简单最基础最直观检测目标蛋白的手段，所以做生物研究的几乎都要接触，做好WB，就成了大家必修的一课。凡事预则立，不预则废。WB实验前，先在头脑里预演一下将要进行的WB实验，实操时就会免去过度的手忙脚乱。
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