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- 文献和实验
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- 库存:
大量
- 供应商:
泽叶生物
- 肿瘤类型:
见说明书
- 细胞类型:
细胞系
- 品系:
见说明书
- 相关疾病:
见说明书
- 物种来源:
人
- 免疫类型:
见说明书
- 细胞形态:
贴壁;上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 器官来源:
人
- 运输方式:
干冰运输及发送复苏存活细胞
- 年限:
2年
- 生长状态:
贴壁
- 规格:
株
含量:>1x106 个/mL
污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格:T75瓶或者1mL冻存管包装
含量:>1x106 个/mL
污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格:T75瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存:肺大动脉内皮细胞可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
如何去除原代培养中的成纤维细胞
培养细胞的纯化:1、自然纯化:即利用某一种类细胞的增殖优势,而排挤其他细胞生长,靠自然的增值潜力最后留下生长优势细胞,去除其他细胞。有些恶性肿瘤细胞可以通过此方法,自然纯化建立细胞系。
2、人工纯化(1)酶消化法:在消化培养细胞时,常是成纤维细胞先脱壁,而上皮细胞要消化相当长的时间才脱壁,特别是在原代培养和培养早期这种差别尤为明显,因而可以利用这种差异采用多次差别消化方法将上皮细胞和成纤维细胞分开。
(2)机械划除法:肺大动脉内皮细胞原代培养成功后,上皮细胞和成纤维细胞所数都同时出现,混杂生长。这种混杂生长常常分区成片,每种细胞都以小片或区域性分布的方式生长在瓶壁上。因此可以采用机械的方法去除不需要的细胞。
(3)反复贴壁法:成纤维细胞与上皮细胞相比,其贴壁过程快,大部分细胞常能在短时间内大约10-30min完成附着过程,而上皮细胞大部分在短时间内不能附着或附着不稳定,稍加振荡即浮起,这样可以利用此差别来纯化细胞。
(4)克隆法:采用细胞克隆法将细胞分成单个细胞,使之分别生长成克隆,选择出所需要的克隆。
(5)肺大动脉内皮细胞培养及限定方法:某些细胞在生长过程中必须存在或必须去除某种物质,否则无法生长,可以利用这种技术来纯化细胞。
(6)流式分选。
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文献和实验肺组织,将肺组织切成1cm3 的小块,用PBS冲洗干净。剪去胸膜,剔除大血管。 2. 用匀浆机制备肺组织匀浆,然后放在20μm尼龙筛上冲洗,以去掉红细胞和组织碎片。 3. 消化肺组织:将留在筛子上的组织悬浮于3mg/ml中性蛋白酶的培养液中,在37℃恒温振荡器中孵育16h。将消化液装入离心管中离心(2000r/min,10min),沉淀物悬浮于含1mmol/L EDTA的0.25%胰蛋白酶液中,37℃孵育15min。 4. 加入完全培养液终止
一、流体剪切力细胞实验背景液体是每个生物物种的重要组成部分。在生理状态下,许多细胞类型被流体环境包围。典型例子包括:血管内皮细胞,形成血管内层,淋巴管内皮细胞,形成淋巴管内层,肾和肺的上皮细胞。这种液体流动引起剪切应力,这是一种机械力,以多种方式影响细胞形态和行为。在许多标准体外实验中,细胞在没有流动的情况下培养。在这些静态条件下,通常没有考虑剪切应力依赖性细胞变化。实际上,在流动下的体外细胞培养并模拟这种机械刺激并诱导更加接近生理状态的体内生物过程行为很有意义。特别对于研究在生物流体中存在
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