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无
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1000
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cloud-clone corp(优尔)
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50ug
Purity≥ 99%;Fragment:Met1~His290; Predicted Molecular Mass(KD):37.3kDa
优尔生的一级代理:杭州昊鑫生物
优尔生位于武汉出口加工区,已整体通过ISO 9001:2008、ISO 13485:2003质量管理体系认证,以提供生命科学科研用检测试剂为主,75%以上的服务对象位于欧美国家。凭借着深厚的技术积累和庞大的引物、cDNA、质粒、杂交瘤细胞“种子库”和检测试剂半成品库库存,能够做到约11,000种蛋白、19,000种抗体以及7,040种检测试剂盒立等可取。蛋白项目部拥有四大技术平台,包括多肽合成平台、小分子抗原性改造平台、天然蛋白提取平台和采用原核(E.Coli)表达系统与真 。
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文献和实验牢记N端法则:当N端第二个残基是Leu、Arg、Lys、Phe、Tyr和Trp时,重组蛋白半衰期只有2分钟,而小侧链的氨基酸残基,如Ala,则可以提高蛋白稳定性。因此在设计载体时,要特别注意第二个密码子,避免上述残基的出现。处理高毒性蛋白:毒性极高的重组蛋白,其本底表达就会杀死原核宿主,质粒容易丢失,使其在大肠杆菌中很难得到高表达。采用可表达T7溶菌酶的宿主。T7溶菌酶是T7RNA聚合酶的抑制剂,采用含有T7溶菌酶质粒的宿主,如pLysS,可以降低重组蛋白在大肠杆菌快速生长期的本底
冻融6、ddH2OpH值适当,避免污染如何选择最合适的DNA聚合酶 1、Taq酶——扩增效率最高发现 1969年,美国黄石国家公园温泉 活性 5‘-3’ DNA聚合酶活性 强 5‘-3’ DNA外切酶活性 弱 荧光探针(定量PCR方法) 3‘-5’ DNA外切酶活性 无 错配率每个循环约1/6000 3‘末端加“A” 能 产物可直接进行“TA”克隆 生产质检 诱导大肠杆菌表达、三次柱纯化,分离获得94kD重组蛋白。 无核
的表达系统会造成质粒的不稳定,细胞生长速度的下降和重组蛋白产量的降低[32,33]。Lanzer和Bujard曾对常用的lac启动子-操纵子系统进行了广泛的研究,证明操纵子放在启动子序列的不同位置会造成70倍差异的抑制。将17bp的操纵子置于-10和-35六聚体区之间所形成的抑制比将其放在-35区的上游或-10区的下游要高50-70倍[34]。 启动子的第三个特性是其简便和廉价的可诱导性。大量生产蛋白质最常用的启动子是热诱导(λPL)和化学诱导(trp)启动子。异丙基硫代-β-D-半乳糖
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