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- 英文名:
Total Exosome Isolation Reagent (from cell culture media)
- 库存:
4478359
- 供应商:
研卉生物
- CAS号:
细胞上清EXOSOMET提取试剂
- 规格:
50 mL
EXOSOME外泌体RNA/蛋白提取试剂盒total EXO RNA/PROT ISO KIT-4478545
EXOSOME外泌体提取试剂盒Total Exosome Isolation Reagent (from cell culture media)-4478359
总外泌体分离试剂(从细胞培养基)可以从细胞培养基样品中快速高效地富集完整的外泌体。
•为任何类型的下游应用最大限度地大大提高完整外泌体的回收率
• 使用简单可靠的实验方案轻松分离外泌体
• 避免耗时的超速离心
• 灵活性—可以根据样品量按比例增加或减少
外泌体的分离可能是一个费时乏味、非特异性且困难的过程。总外泌体分离试剂(来自细胞培养基)可以按随样品量而增减的实验方案从细胞培养基样品中简单可靠地浓缩完整外泌体。
该试剂可束缚水分子,从而使溶解度较低的成分(如囊泡)从溶液中析出,随后即可通过短时间的低速离心来收集这些难溶组分。将该试剂加入细胞培养样品中,并将溶液在 2°C 至 8°C 下孵育过夜。通过标准离心(转速:10,000 x g,时间:60 分钟)回收被沉淀的外泌体。接着在PBS 或类似缓冲液中对沉淀进行重悬,此时外泌体即可用于下游分析或通过亲和方法进一步纯化。
4478359 Total Exosome Isolation Reagent (from cell culture media) 50 mL
4478360 Total Exosome Isolation Reagent (from serum) 6 mL
4484450 Total Exosome Isolation Kit (from plasma) 6 mL
4484453 Total Exosome Isolation Reagent (from other body fluids) 6 mL
4484452 Total Exosome Isolation Reagent (from urine) 50 mL
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文献和实验细胞上清外泌体细胞上清外泌体提取图解过程 1.核对样本 2.离心,3000g,15min; 3.离心后样本(有略微沉淀) 4.将样本转移至新的 50ml 管并加 ECS 试剂; ECS 与试剂有明显分层; 震荡混匀; 5.在 4 度冰箱静置 2H 以上,离心 10000g,60min; 6.离心后的样本(沉淀明显,沉淀中富含外泌体) 将上清吸出留下沉淀,将离心管倒扣于纸上自然晾干残留的上清液; 7.加 PBS 重悬沉淀; 用 PBS 洗脱后的沉淀 8.离心进一步去除
基(DMEM、1640、F12 等) ✘ 此种培养条件细胞处于饥饿状态,会将培养基中的营养物质(包括外泌体)全部消耗掉的,上清液中的外泌体含量低。 4 外泌体专用无血清培养基 ✔ 不含异源外泌体 常见的肿瘤细胞培养通常都可以维持生长,而那些血清培养都困难的细胞就难以通用了,需要通过预实验摸索。 第二步细胞上清液预处理:获得高质量外泌体预处理也很重要。细胞上清液中有什么物质?除了我们感兴趣的外泌体外,还有少量细胞、细胞碎片、游离蛋白、脂类等。需要做的就是通过差速
一段时间的生长后收集细胞上清液。但是这两种方法都会存在一定的不足的,去外泌体血清难以做到 100% 的去除的,因此即使 1% 的血清外泌体残留也带来大量的异源外泌体,而外泌体专用无血清培养基,也不是适合所有的细胞,常见的肿瘤细胞培养通常都可以维持生长,而那些血清培养都困难的细胞就难以通用了,所以也需要一些预实验的摸索。 还有,那些 DMEM、1640、F12 的基础培养基是否可以替代血清或者外泌体专用无血清培养基呢?这样是不行的。因为细胞在这些基础培养基的环境下,是处于饥饿状态的,细胞会将培养









