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文献和实验记等测定法。 (一)环状沉淀反应 当抗原与相应抗体形成一个接触面时,如二者比例适当,接触面上可形成一个乳白色的环状物即为阳性沉淀反应。 材料: 1.免疫血清:免疫兔抗人血清 2.抗原:人血清 3.小沉淀管、毛细吸管、橡皮头、生理盐水。 方法: 1.取小沉淀管2只,以毛细吸管吸取抗人血清约0.2毫升,加入第一管,加时注意不能有气泡
荧光定量 PCR 的常见异常结果除了扩增曲线异常、融解曲线异常两类常见情况外,qPCR 实验中通常还会遇到以下三大类情况: 1. 复孔间重复性差怎么办? 复孔间重复性差一般会有以下两种情况: (1)CT 值很大,如 CT≥ 30,重复性差属于正常现象。该现象符合泊松分布,即在有效模板量很少的情况下,模板与引物的碰撞存在随机性,直接导致复孔间的 CT 值差异较大。 解决方法:如果融解曲线没有杂峰,无模板阴性对照同目的基因的 △CT 值为 3 or 5 以上,那 CT 值为准确的,可多设置
及1:10稀释的待检血清,每孔10 μl,此时加入的抗原液面应与琼脂板一平,不得外溢。 (4)已经加样的免疫琼脂板置湿盒中37℃温箱扩散24小时。 (5)测定各孔形成的沉淀环直径(mm),用参考血清各稀释度测定值绘出标准曲线,再由标准曲线查出被检血清中免疫球蛋白的含量。 二、双向琼脂扩散实验 1. 材料 (1)诊断血清:兔抗人血清 (2)待测血清:人血清 (3)阴性对照血清 (4)其它:生理盐水、琼脂粉、载玻片、打孔器、微量进样器等。 2. 方法 (1)取一清
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