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现货
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上海笃玛生物科技有限公司
- 规格:
10ml/瓶
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文献和实验一、SP 法 1)脱蜡、水化;2)PBS 洗 2~3 次各 5 分钟;3)3% H2O2(80% 甲醇)滴加在 TMA 上,室温静置 10 分钟;4)PBS 洗 2~3 次各 5 分钟;5)抗原修复;6)PBS 洗 2~3 次各5分钟;7)滴加正常山羊血清封闭液,室温 20 分钟。甩去多余液体。8)滴加Ⅰ抗 50μl,室温静置 1 小时或者4℃过夜或者37℃1小时。9)4℃ 过夜后需在37℃复温45分钟。10)PBS 洗 3 次各 5 分钟;11)滴加 Ⅱ 抗 40~50 μl,室温
不完全:使用正常山羊血清或 1%~5% BSA 封闭 1h。 (5)离子相互作用造成的背景:降低抗体稀释液的离子强度。 (6)切片或细胞过于干燥或孵育温度过高:实验过程中请保持切片处于湿润状态,一抗孵育时尽量使用 4℃ 过夜孵育。 (7)内源性过氧化物酶残余:适度延长内源性过氧化物酶阻断剂阻断时间。 (8)样本于缓冲液或抗原修复液中浸泡太久:样本在溶液中浸泡时间不要超过 24h。 Q4:为什么会出现非特异性染色,如何避免? (1)抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加非特异性染色:由于本试剂盒使用
(C10 H14N2O8Na2?2 H2O) 溶解在 950 ml 蒸馏水中。调整 pH 到 9.0,然后用蒸馏水定容至到 1 L。d. 胃蛋白酶:1 mg/ml,溶解在 pH 为 2.0 的 Tris 盐酸缓冲液中。8. 3% 过氧化氢:配制时,将 10 ml 30% H2O2 加入到 90 ml 蒸馏水中。9. 封闭液:TBST/5% 正常山羊血清:5 ml 1X TBST 中添加 250 ?l 正常山羊血清。10. 检测系统:根据厂家说明书使用。已有的检测系统:SignalStain
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