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- DUMABIO
- 上海
- DM-FAM1035
- 2026年01月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
6个月
- 保存条件：
2-8°
- 库存：
999
- 供应商：
上海笃玛生物科技有限公司
- 规格：
50管/24样
磷脂酶A2（phospholipase A2，PLA2）试剂盒
分光光度法50管/24样
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
磷脂酶A2（EC3.1.1.4）是磷脂sn-2位脂酰基水解酶，广泛存在于动植物组织、细菌、细胞核分泌物中，参与脂肪消化，精子成熟、细胞信号传递、脂质过氧化修复、宿主反应等生理过程，在控制体内磷脂类物质平衡、调节机体新陈代谢、参与疾病的病理进程等方面发挥着及其重要的作用。
测定原理
磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸胆碱（HEPC）产生游离巯基，与DTNB反应生成黄色物质，在412nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、超速冷冻离心机、研钵、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿。
试剂盒的组成
基础试剂：通常为试剂 1（R1）、试剂 2（R2），部分试剂盒可能含试剂 3（R3）等，主要成分包括缓冲液、酶、底物、辅助因子等，需标注各组分的装量（mL / 瓶）或可测试数量。
配套校准 / 质控组分（如适用）：校准品：含被测物标准品，搭配特定基质（如人血清、BSA 等），提供明确靶值，且定值需溯源至国际 / 国家标准品；
质控品：含不同浓度（高 / 中 / 低）被测物，用于验证检测结果准确性，靶值范围为批特异；
配套耗材（如适用）：如塑料滴管、封板膜等，标注具体数量。
注：不同批号试剂盒的各组分不得混用；校准品、质控品的赋值仅适用于本批号试剂盒。
测定步骤
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步骤序号 |
操作步骤 |
操作要点 |
注意事项 |
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1 |
实验准备 |
1. 试剂盒组分（R1、R2、标准品、质控品）室温平衡 15-20 分钟； 2. 处理待测样本（血清 / 血浆 / 匀浆等），按需稀释； 3. 校准微量加样枪，设置酶标仪检测波长 |
1. 试剂避免反复冻融； 2. 样本无溶血、脂血； 3. 吸头一次性使用 |
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2 |
微量加样 |
反应板各孔加样（单孔用量）： - 空白孔：稀释液 20μL + R1 100μL； - 标准 / 质控孔：标品 / 质控品 20μL + R1 100μL； - 样本孔：样本 20μL + R1 100μL；轻1. 严格控制温育温度与时间； 2. 反应板加盖防液体蒸发轻混匀，室温孵育 5 分钟 |
1. 加样顺序不可颠倒； 2. 吸头勿接触孔壁，防止挂壁； 3. 避免试剂交叉污染 |
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3 |
温育反应 |
各孔加 R2 20μL，混匀后 37℃温育 10-15 分钟（按说明书调整） |
1. 严格控制温育温度与时间； 2. 反应板加盖防液体蒸发 |
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4 |
终止反应 |
加终止液 20μL，轻柔混匀 |
1. 终止液为强酸 / 强碱，需戴手套操作； 2. 快速加样，保证各孔反应同步终止 |
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5 |
吸光度测定 |
酶标仪以空白孔调零，测定各孔 OD 值 |
1. 测定前确认孔底无气泡、污渍； 2. 终止反应后 10 分钟内完成检测 |
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6 |
结果计算 |
1. 计算 ΔOD=OD 样本 / 标品 - OD 空白； 2. 以标品浓度为横坐标、ΔOD 为纵坐标绘制标准曲线； 3. 样本浓度 = 曲线查得浓度 × 稀释倍数 |
1. 标准曲线 R²≥0.99； 2. 质控结果需在合格范围内 |
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7 |
实验收尾 |
1. 按生物安全规范处理反应废液2. 剩余试剂密封后冷藏保存； 3. 清洗反应板 / 器材 |
1. 试剂开封后尽快用完； 2. 废弃物分类处置，避免污染 |
生化试剂盒的核心分类
按检测原理和目标物类型，可分为以下几大类，覆盖多数实验场景：
1. 代谢物检测试剂盒用于检测血糖、甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、尿酸、乳酸、bing酮酸等小分子代谢物，原理多为终点比色法 / 速率比色法。例如血糖试剂盒通过葡萄糖氧化酶（GOD）- 过氧化物酶（POD）偶联反应，生成有色物质，吸光度与葡萄糖浓度正相关。
2. 酶活性检测试剂盒适用于 SOD、CAT、POD、LDH、ALT、AST 等酶活性测定，以速率法为主。通过监测酶促反应过程中底物或产物的吸光度变化速率，计算酶活性单位（U）。比如 SOD 试剂盒利用氮蓝四唑（NBT）光还原法，SOD 抑制 NBT 还原的程度与酶活性相关。
3. 蛋白定量试剂盒包括 BCA、Bradford、Lowry 法试剂盒，其中微量 BCA 试剂盒适合样本量少的场景。BCA 法基于碱性条件下蛋白与 Cu²⁺结合，还原 BCA 试剂生成紫色复合物，在 562nm 处有特征吸收峰。
4. 离子检测试剂盒用于检测钙、磷、钾、钠等无机离子，如钙试剂盒通过钙与偶氮砷 Ⅲ 结合生成有色络合物，进行比色定量。
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文献和实验亦称为卵磷脂酶（ lecithinase或 lecithase）。在水解卵磷酯和其它磷脂的酶中，有水解如图所示 A1 、 A2 、 B、 C、 D位置的各种酶，对此分别称为磷脂酶 A1 ， A2 ， B， C， D：（ 1）磷脂酶 A2 ： EC3． 1． 1． 4．存在于眼镜蛇属（ Naja）、蝰蛇（ Vipera）、响尾蛇（ Crotalus）等蛇毒及蜂、蝎的毒液中，分解卵磷酯，生成溶血卵磷酯，而出现溶血作用。也存在胰脏、肝脏、小肠等动物组织中，酵母、植物中
抗磷脂酶A2受体抗体检测试剂——特发性膜性肾病特异性诊断指标
%的IMN患者具有肾病综合征，有时胳膊和眼皮出现严重水肿，体重减轻，排尿减少； ——约20%的患者具有蛋白尿，但是无其他任何症状。尿沉渣检查常见脂肪粒，滴或管； ——约50% IMN患者具有显微镜血尿，蛋白尿与糖尿； ——约70%患者在发病初期血压与肾功能正常。发病机制 2009年首次描述了IMN的自身免疫机制，其实是自身抗体与磷脂酶A2受体（PLA2R，跨膜糖蛋白）反应的结果。PLA2R是在人肾小球足细胞表面表达，他们参与调节细胞中磷脂酶的结合过程。目前PLA2R主要分为两型（M型与N
Determination of Phospholipase C-or Phospholipase D-Catalyzed Phosphatidylcholine Hydrolysis
Signal-activated phospholipase-catalyzed hydrolysis of phosphatidylcholin involves three distinct enzymes: phospholipase A2 , phospholipase C (PLC), and phospholipase D (PLD) (1 ). PLC-catalyzed hydrolysis generates sn -1,2-diacylglycerol
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