250bp DNA ladder(250-5000bp) 核

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250bp DNA ladder(250-5000bp) 核酸电泳和回收由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多250bp DNA ladder(250-5000bp)等核酸电泳和回收产品请联系我司咨询订购。

品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：100次
编号：RFT006
● 产品简介：
本产品是由9条带状双链DNA组成，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。本产品为即用型产品，已含有1×loading buffer，可根据实验需要，直接取2-5μl电泳，使用方便，电泳图像清晰。 本产品中9条带为250，500，750，1000，1500，2000，2500，3000，5000bp，其中1500bp条带为100ng/5μl，其余条带浓度为50ng/5μl。
● 储存条件：4℃ 贮存6个月，-20℃贮存 1年。
● 使用方法：1.取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中（每1mm×1mm加样孔加1μl，如果加样孔宽于5mm，可以适当增加上样量）就行电泳。
2.建议电泳条件：凝胶浓度为1.0％，凝胶长度8-10cm，电泳电压4-10v/cm，电泳时间30-35分钟。
3.通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注：如果使用Goldview等染料就行染色，由于灵敏度比EB低，请酌情增加Marker的上样量。
● 注意事项：1.琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2.请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳，以保证Marker良好的分离效果。
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·土壤基因组DNA提取试剂盒
编号：RFT036
规格：50次
● 储存条件和效期：本试剂盒在室温（25℃左右）干燥条件下，可保存1年。缓冲液R2和R3可能有沉淀产生，若溶液产生沉淀，应在使用前置于37℃下溶解沉淀至溶液澄清后再使用。
● 产品简介：
土壤样品存在大量的抑制因子如腐殖酸、金属离子等，而纯化的DNA 中只要有这些微量物质的存在，都会影响到PCR等酶促反应。本公司的土壤试剂盒采用独特的腐殖酸去除液（缓冲液R2）能够有效去除腐殖酸；吸附柱CG能能有效去除金属等抑制因子，提纯得到的基因组DNA可直接用于PCR 反应，酶切或定量实验。
● 准备工作：1. 准备55℃，70℃水浴；无水乙醇；异丙醇；制冰机；1.5ml离心管；2ml离心管
2. 按照标签所示在漂洗缓冲液WB2中加入无水乙醇，混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。
3. 每次使用前请检查缓冲液R2，缓冲液R3是否有沉淀生成，如果出现沉淀，37℃温浴至沉淀溶解后再使用。
● 标准操作步骤：如非指出，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1. 称0.3-0.5 g土壤置于2ml离心管中，加入0.4 g Glass Beads，再加入780 μl 缓冲液R1与100 μl 缓冲液R2。涡旋器高速震荡3-5min。
注意：对含水量丰富的样品，可以预先离心除去部分水分后再称取样品。缓冲液R2是腐殖酸去除剂，100μl对大部分样品来说足以有效除去腐殖酸等抑制因子。对一些腐殖酸含量特别丰富的土壤， 缓冲液R2的量可以适当增加，但不能超过250μl，否则会严重影响DNA的得率。
2. 加入200 μl 缓冲液R3（R3如有沉淀37℃水浴完全溶解后再用），涡旋混匀。 70℃水浴处理10min。期间振荡几次。
注意：如果要纯化革兰氏阳性菌的DNA，请在70℃处理完后，再90℃水浴处理2min。
3. 12000 rpm(~13,000g)离心1分钟，取600μl上清到1.5ml离心管中，加入180 μl 缓冲液R4混匀。
注：转移上清时确保不要吸取到沉淀，转移的上清量最好不超过80%。
4. 冰上放置5分钟。12000 rpm(~13,000g)离心1分钟。 转移上清到新的1.5ml离心管中。
注：转移上清时确保不要吸取到沉淀，转移的上清量最好不超过80%。
5. 加入0.7倍上清体积的异丙醇颠倒混匀。12000 rpm(~13,000g)离心2分钟。小心地倒掉上清。
注：如果样品中DNA含量很低，加入异丙醇混匀后-20℃放置1小时。
6. 加入350μl 缓冲液R5，待沉淀完全溶解后加入300μl无水乙醇，混匀。
注：为加速溶解沉淀，可置样品于55℃水浴中。
7. 将上步混合液转移到吸附柱CG中（吸附柱放入收集管中），12000rpm离心30秒，倒掉滤过液。
8. 向吸附柱CG中加入500μl 漂洗缓冲液WB1，12,000 rpm (~13,000×g ) 离心30 秒，倒掉废液。
9. 向吸附柱CG中加入600μl 漂洗缓冲液WB2(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12,000 rpm (~13,000g) 离心30秒，倒掉废液，吸附柱CG放入收集管中。
10. 向吸附柱CG中加入600μl漂洗缓冲液WB2，12,000 rpm (~13,000g) 离心30秒，倒掉废液，将吸附柱CG放入收集管中。
11. 12,000 rpm(~13,000g)离心2分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注：此步骤非常重要，其目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
12. 将吸附柱CG转入一个干净的1.5ml离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50–100 μl经70℃水浴预热的洗脱缓冲液EB，室温放置2分钟，12,000 rpm(~13,000g)离心2分钟。
注； = 1 \* GB3 ① 洗脱缓冲液体积最好不少于50 μl，体积过小影响回收效率。
= 2 \* GB3 ② 洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率。
13. DNA产物-20℃保存。
大量操作步骤（针对含微量核酸的样品）
1. 称1-5g土壤置于10ml离心管中，加入1g Glass Beads，再加入3ml 缓冲液R1与200μl 缓冲液R2。涡旋器高速震荡3-5分钟。
2. 加入600μl 缓冲液R3，涡旋混匀。70℃水浴处理10分钟。期间振荡几次。
3.3000g离心3分钟，转移上清到新的离心管中，加入550μl 缓冲液R4混匀。
4. 冰上放置5分钟。8000g离心10分钟。转移上清到新的离心管中。
5. 以下按标准操作步骤的第五步继续操作。
● DNA浓度及纯度检测：基因组DNA*(代"片")段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的DNA*(代"片")段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。可配制0.8-1.0％琼脂糖凝胶，使用λ/HindIII判断基因组的大小，完整的基因组大小应在23kb以上。使用分光光度计检测时， OD260/OD280比值应为1.7–1.9之间，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水洗脱，比值可能偏低，但并不表明DNA纯度不高。
● 常见问题分析：常见问题 可能原因 建议
没有洗脱出DNA 加入缓冲液R5后没有加入无水乙醇 样品过柱前，必须用无水乙醇调整核酸结合条件，否则核酸不能挂柱。
漂洗缓冲液WB2中没有加入乙醇 漂洗缓冲液WB2使用前请按照标签加入无水乙醇。无水乙醇加入量不正确会导致核酸提取量大大降低。
低浓度的DNA量 缓冲液R2使用过量 按照步骤1加入适量缓冲液R2
洗脱体积太小 洗脱体积不能低于50μl，如洗脱体积太小，回收率将大大降低。
洗涤不恰当 漂洗缓冲液WB2使用前请按照标签加入无水乙醇。无水乙醇加入量不正确会导致核酸提取量大大降低。
低A260/A280比率 蛋白污染 不要忽略步骤8中用漂洗缓冲液WB1冲洗吸附柱
洗脱液pH值不合适 确保使用的洗脱液pH在8.0以上，如低于8.0将导致DNA洗脱量过低。
下游应用不好 提取的DNA含盐量高 漂洗缓冲液WB2使用前请按照标签加入无水乙醇。
提取的DNA含有乙醇 步骤11空甩柱子2分钟非常关键，彻底去除漂洗液中的乙醇。
抑制PCR反应 增加缓冲液R2用量，彻底去除腐殖酸等PCR抑制因子；步骤4中确保不要吸取到沉淀。


250bp DNA ladder(250-5000bp) 核酸电泳和回收关键词：250bp DNA ladder,RFT006,250-5000bp
ARB10701 人多巴色素异构酶(DT)代做ELISA实验 Human dopachrome tautomerase,dt ELISA KIT
ARB12076 大鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)含量检测 Rat endothelial nitric oxide synthase,enos ELISA KIT
BFD064 猪伪狂犬抗体检测卡
C1001 猪血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
ARB13122 小鼠促甲状腺素(TSH)含量分析 Mouse thyroid stimulating hormone,tsh ELISA KIT
BL1305 5×G250(蛋白定量专用)
PY04-026 40%尿素水 5ml/瓶×10 加入95ml尿素酶琼脂基础，用于尿素酶生化试验
ARB11687 人葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)免费代测 Human glucose dependent insulin releasing polyPeptide,gip ELISA KIT
ARB12279 大鼠纤溶酶原激活物抑制物(PAI)酶联免疫定量检测 Rat plasminogen activator inhibitor ELISA KIT
ARB12215 大鼠血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)代做ELISA实验 Rat thrombospondin 1,tsp-1 ELISA KIT
KG201 快速DNA提取扩增套装
ARB10990 人冷球蛋白(CG)免费代测 Human cryoglobulin,cg ELISA KIT
250bp DNA ladder(250-5000bp) 核酸电泳和回收关键词：250bp DNA ladder,RFT006,250-5000bp

·Western封闭液II（奶粉）
编号：RFT087
规格：100ml
● 产品简介：
Western Blot 实验中，为防止印迹膜与检测系统中的蛋白成分（如抗体 IgG 等）发生非特异性吸附，导致实验结果不清晰，通常在进行一抗孵育前需预先对印迹膜上的非特异结合位点进行封闭。
本产品以奶粉为基础，采用独特配方，可快速高效地封闭膜上多余的结合部位，减少非特异结合情况的产生，降低背景，适用于各种转印膜的封闭，操作方便快捷。
另外，本产品特别添加了蛋白稳定剂，可保证每次实验封闭效果稳定可靠。
● 贮存： 2-8℃贮存，有效期半年。
● 注意事项：1 由于奶粉中含有微量牛IgG，其结构与羊(goat and sheep)IgG极其类似。因此来源于羊的一抗或二抗能与牛IgG交叉反应，产生高背景。因此该封闭液不推荐用于羊来源的一抗或抗羊的二抗。
2 奶粉中含有生物素，该封闭液不能用于Streptavidin/Biotin系统。
3 该封闭剂是最适合ECL/HRP系统的封闭剂。
● 使用说明：特别提醒：该产品效期较短，开盖后如有异味或有絮状沉淀，表明已经失效，不能使用。
1. 本产品无需稀释，开盖即用。
2. 目的蛋白转移完毕后，将印迹膜放入容器中，加入适量Western封闭液II(以完全覆盖印迹膜为宜) 。
3. 室温孵育30分钟至2小时，必要时可4℃孵育过夜。
4. 封闭结束后弃去封闭液，进行Western Blot后续操作。

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