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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 库存:
220
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
96T×2
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博公司提供的猪瘟病毒IgG抗体PPA-ELISA检测试剂盒厂家直销稳定性好,灵敏度高,是高品质的单克隆抗体。欢迎新老客户踊跃咨询购买
产地:国产|进口
规格:96T×2
编号:DL058
品牌:百奥莱博
【产品简介】猪瘟(CSF)是一种高致病率、高死亡率和高度接触传染的病毒病,给国内养猪业造成巨大的损失。在猪瘟的免疫预防工作中,接种了猪瘟疫苗后,由于多种因素可能导致猪不产生或产生低水平猪瘟病毒抗体。
E2蛋白是CSFV结构蛋白,参与病毒对细胞的感染过程,是CSFV的主要保护性抗原,可诱导机体产生保护性抗体。本试剂盒采用酶联免疫吸附试验检测猪血清中抗CSFV E2蛋白抗体IgG,用于免疫猪瘟疫苗后的抗体动态水平监测,指导免疫预防工作,评估猪场猪瘟免疫状况,也可用于猪瘟的流行病学调查。
【产品内容】
试剂盒主要成分 数 量
包被板 96T×2
阳性对照 1ml×1
阴性对照 1ml×1
酶标结合物 20ml×1
样品稀释液 20ml×2
底物液 20ml×1
终止液 20ml×1
20×浓缩洗涤液 25ml×1
封口胶 2份
使用说明书 1份
【成分性状】
包被板 96孔塑制微孔板,无色透明,干燥,无杂质吸附
酶标结合物 略带黄色澄明液体
阴、阳性对照 略带黄色澄明液体
样品稀释液 无色或略带黄色澄明液体
浓缩洗涤液 无色或略带黄色澄明液体
底物液 无色或微蓝色澄明液体
终止液 无色澄明液体,低温条件下可能会出现絮状沉淀
【用法与判定】 按以下步骤进行:
1、需要自备的器材
1.1 微量移液器;
1.2 微量移液器配套使用的枪头;
1.3 用来稀释洗涤液的500 ml量筒;
1.4 适用于检测96T微孔板的酶标仪;
1.5 用于稀释样品的1.5 ml Ep管;
1.6 蒸馏水或去离子水。
2、样品的制备
用样品稀释液将待检血清样品进行100倍稀释(建议:2μl血清样品加入198μl样品稀释液中),样品加入包被板前要充分混匀,稀释不同待检样品注意更换枪头。注意:①制备血清用的血液样本应无溶血现象发生;②不能稀释阴性、阳性对照。
3、操作步骤 (﹡使用前应轻轻旋转或震荡予以混匀,所有试剂应恢复至室温)
3.1 在A1和A2孔中分别加入100μl阴性对照;
3.2 在A3和A4孔中分别加入100μl阳性对照;
3.3 取100μl经1:100稀释好的待检样品加入相应孔中,并做好记录;
3.4 37℃孵育30min;
3.5 将各孔的液体弃入废液桶,每孔加250μl的洗涤液(试剂盒内20×浓缩洗涤液需用蒸馏水或去离子水稀释后方可使用。如有结晶,需先溶解后,方可进行稀释)进行洗板,重复5次,每次30s;
﹡加液时防止各孔间洗涤液串流影响检测结果,尽量将孔内洗涤液抛甩干净;
3.6 每孔加100μl酶标结合物;
3.7 37℃孵育30min;重复步骤3.5;
3.8 每孔加100μl底物液;
3.9 37℃孵育10min(避光显色);
3.10 每孔加100μl的终止液;
3.11 立刻于450nm波长处测定各孔的吸光度值,即OD450值。
4、试验有效性判断
4.1阴性对照:正常情况下,阴性对照孔OD450值≤0.2;
4.2阳性对照:正常情况下,阳性对照孔OD450值≥0.4;
4.3临界值(C.O.)计算:临界值=0.19+阴性对照均值;阴性对照OD450值大于0.2时应舍弃,如所有阴性对照OD450值均大于0.2时须重复实验;阴性对照低于0.05时以0.05计算。
4.4结果判定: 检测样品OD450值≥临界值,判定该检测样品为阳性; 检测样品OD450值<临界值,判定该检测样品为阴性。依据农业部猪瘟免疫和监测方案,免疫21天后,猪瘟病毒抗体ELISA检测试验抗体阳性判定为免疫合格。
【注意事项】
(1)待检血清样品数量过多时,应先使用血清稀释板将所有待检血清稀释完毕后,再统一将血清样品加入酶标板中,使反应时间一致。
(2)试剂盒使用的过程中不要吸烟、喝水和吃东西。
(3)底物液和终止液对皮肤有刺激性,注意防护。
(4)底物液不要暴露于强光和任何氧化剂;使用洁净的玻璃和朔料容器处理底物液。
(5)所有试剂应在2~8℃存放;使用前恢复到室温,使用后放回2~8℃。
(6)注意防止试剂盒组分受到污染。
(7)不要使用超过有效期的试剂,不同批次试剂盒的组分不要混用。
(8)操作过程中的移液、时间和洗涤必须精确。
【规格与包装】96T×2
【贮藏与有效期】2~8℃避光保存,有效期为6个月
猪瘟病毒IgG抗体PPA-ELISA检测试剂盒厂家直销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·呕吐毒素ELISA检测试剂盒
编号:DL015
英文名称:Deoxynivalenol Elisa Kit
规格:96T
一、原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法定量检测样品中呕吐毒素的残留量。
二、适用范围
定量检测粮食、饲料等样本中呕吐毒素残留。
三、试剂盒特点及技术指标
* 检 测 时 间 : 30 min
试剂盒灵敏度:5 ppb (µg/kg)
* 试剂盒检测纯阴性样本的背景值<20ppb;
* 样品处理方法更加简洁,符合率大于90%;
试剂盒检测样本的灵敏度和准确度:
样本 检测下限 回收率
小麦、玉米、大麦 100ppb 70%-120%
饲料 100ppb 70%-120%
试剂盒特异性:
药物名称 交叉反应率(%)
呕吐毒素 100%
玉米赤霉烯醇 < 1%
四、所需材料
仪器:微孔板酶标仪450 nm/630 nm、均质器、振荡器、离心机、天平(感量0.01 g)、离心管(5 mL, 50 mL)
微量移液器:单道 1µL~10 µL、10 µL~100µL
多道50µL~300µL
试剂:去离子水
五、 试剂盒组成
序号 组成部分 96T装量
1 呕吐毒素酶标板 12×8孔
2 呕吐毒素标准品*6 6×1 mL
3 呕吐毒素高浓度标准品10ppm 1mL
4 呕吐毒素酶标物 13 mL
5 呕吐毒素抗体 7mL
6 底物液A液 7 mL
7 底物液B液 7 mL
8 终 止 液 7 mL
9 10×浓缩洗涤液 40 mL
10 2×呕吐毒素样品稀释液 45 mL
*注:6个标准品浓度为:0 ppb, 5 ppb, 15 ppb,45ppb, 135ppb, 405 ppb,直接使用。
六、 酶标免疫测定程序
① 将所需试剂从冷藏环境中取出,待其完全回 升至室温(20~25℃)后方可使用。注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
② 按标准品和样品双孔平行的数量使用微孔。
③ 加标准品/样品、抗体:加标准品/样品50µL
到对应的微孔中,加入呕吐毒素酶标物50µL /孔, 再加入呕吐毒素抗体50µL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应20min。
④ 洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,
加入洗涤工作液250µL/孔,每次静置20s,甩去孔内液体,重复洗涤3次,最后一次用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
⑤ 显色:加入底物液A液50µL/孔,再加底物
液B液50µL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应10~15min。
⑥ 测定:加入终止液50µL/孔,用酶标仪立即 测定450nm处的吸光度值(建议用双波长450/630nm)检测。
七、 结果判定
以标准品百分吸光率为纵坐标,以呕吐毒素标准品浓度(ppb)的半对数为横坐标,绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中,从标准曲线上读出样本所对应的浓度,乘以其对应的稀释倍数即为样本中呕吐毒素实际浓度。(详见试剂盒专业分析软件,以便进行大量样本的分析计算。)
八、 注意事项
① 洗板拍干后应立即进行下一步操作。
② 反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤。
③ 不使用过了有效期的试剂盒,不交换使用不同批号的试剂。
④ 0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。
⑤ 在加入底物液A液和底物液B液后,一般显色时间为10~15min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到20min,反之则减短反应时间。
九、贮藏条件及保存期
贮藏条件: 2~8℃
保 质 期: 12个月
猪瘟病毒IgG抗体PPA-ELISA检测试剂盒厂家直销关键词:猪瘟病毒IgG抗体PPA-ELISA检测试剂盒,DL058,百奥莱博
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北京百莱博科技有限公司是动物疫病ELISA检测试剂盒产品的专业生产供应销售商,恭候您的咨询选购。
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流式细胞术 主要产品及服务: · 流式细胞分析试剂: · 流式检测抗体 · 流式检测试剂盒 · 流式检测辅助试剂 细胞因子试剂盒: · 人细胞因子ELISA检测试剂盒 · 小鼠细胞因子ELISA检测试剂盒 · 大鼠细胞因子ELISA检测试剂盒 · 猪细胞因子ELISA检测试剂盒 客户定制服务: · 蛋白免疫原的制备 · 多肽合成与交联 · 多、单克隆抗体的制备 · 抗体生产、纯化
在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分: (1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂); (2)酶标记的抗原或抗体(结合物); (3)酶的底物; (4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中); (5)酶联物(结合物)及标本的稀释液; (6)洗涤液; (7)酶反应终止液。 1 免疫吸附剂 已包被抗原或抗体
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