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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 库存:
698
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
96T×2
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京现货鸡传染性支气管炎病毒IgG抗体ELISA检测试剂盒促销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多鸡传染性支气管炎病毒IgG抗体ELISA检测试剂盒等动物疫病ELISA检测试剂盒产品请联系我司咨询订购。
北京现货鸡传染性支气管炎病毒IgG抗体ELISA检测试剂盒促销
编号:DL038
规格:96T×2
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
【产品简介】鸡传染性支气管炎(IB)是由传染性支气管炎病毒引起的一种高度接触性呼吸道传染病,给国内养禽业造成巨大的经济损失。在免疫预防工作中,接种了疫苗后,由于多种因素可能导致猪不产生或产生低水平鸡传染性支气管炎病毒抗体。
本试剂盒用鸡传染性支气管炎病毒经灭活、纯化、浓缩制成的抗原作为固相抗原包被微孔板,酶联免疫吸附试验检测鸡血清中抗IBV抗体IgG,用于免疫疫苗后抗体动态水平监测,指导免疫预防工作,评估鸡场传染性支气管炎病毒免疫状况,也可用于鸡传染性支气管炎病毒病的流行病学调查。
【产品内容】
试剂盒主要成分 数 量
包被板 96T×2
阳性对照 1ml×1
阴性对照 1ml×1
酶标结合物 20ml×1
样品稀释液 20ml×2
底物液 20ml×1
终止液 20ml×1
20×浓缩洗涤液 25ml×1
封口胶 2份
使用说明书 1份
【成分性状】
包被板 96孔塑制微孔板,无色透明,干燥,无杂质吸附
酶标结合物 略带黄色澄明液体
阴、阳性对照 略带黄色澄明液体
样品稀释液 略带黄色澄明液体
浓缩洗涤液 无色或略带黄色的澄明液体
底物液 无色或微蓝色澄明液体
终止液 无色澄明液体,低温条件下可能会出现絮状沉淀
【用法与判定】 按以下步骤进行:
1、需要自备的器材
1.1 微量移液器;
1.2 微量移液器配套使用的枪头;
1.3 用来稀释洗涤液的500ml量筒;
1.4 适用于检测96T微孔板的酶标仪;
1.5 用于稀释样品的1.5ml Ep管;
1.6 蒸馏水或去离子水。
2、样品的制备
用样品稀释液将待检血清样品进行40倍稀释(建议:5μl血清样品加入195μl样品稀释液中),样品加入包被板前要充分混匀,稀释不同待检样品注意更换枪头。注意:①制备血清用的血液样本应无溶血现象发生;②不能稀释阴性、阳性对照。
3、操作步骤 (﹡使用前应轻轻旋转或震荡予以混匀,所有试剂应恢复至室温)
3.1 在A1和A2孔中分别加入100μl阴性对照;
3.2 在A3和A4孔中分别加入100μl阳性对照;
3.3 取100μl经1:40稀释好的待检样品加入相应孔中,并做好记录;
3.4 37℃孵育1h;
3.5 将各孔的液体弃入废液桶,每孔加250μl的洗涤液(试剂盒内20×浓缩洗涤液需用蒸馏水或去离子水稀释后方可使用。如有结晶,需先溶解后,方可进行稀释)进行洗板,重复5次,每次30s;
﹡加液时防止各孔间洗涤液串流影响检测结果,尽量将孔内洗涤液抛甩干净;
3.6 每孔加100μl酶标结合物;
3.7 37℃孵育1h;重复步骤3.5;
3.8 每孔加100μl底物液;
3.9 37℃孵育10min(避光显色);
3.10 每孔加100μl的终止液;
3.11 立刻于450nm波长处测定各孔的吸光度值,即OD450值。
4、试验有效性判断
4.1阴性对照:正常情况下,阴性对照孔OD450值≤0.25;
4.2阳性对照:正常情况下,阳性对照孔OD450值≥0.4;
4.3临界值(C.O.)计算:临界值=0.15+阴性对照均值;阴性对照低于0.1时以0.1计算。
4.4结果判定: 检测样品OD450值≥临界值,判定该检测样品为阳性; 检测样品OD450值<临界值,判定该检测样品为阴性。
【注意事项】
(1)待检血清样品数量过多时,应先使用血清稀释板将所有待检血清稀释完毕后,再统一将血清样品加入酶标板中,使反应时间一致。
(2)试剂盒使用的过程中不要吸烟、喝水和吃东西。
(3)底物液和终止液对皮肤有刺激性,注意防护。
(4)底物液不要暴露于强光和任何氧化剂;使用洁净的玻璃和朔料容器处理底物液。
(5)所有试剂应在2~8℃存放;使用前恢复到室温,使用后放回2~8℃。
(6)注意防止试剂盒组分受到污染。
(7)不要使用超过有效期的试剂,不同批次试剂盒的组分不要混用。
(8)操作过程中的移液、时间和洗涤必须精确。
【规格与包装】96T×2
【贮藏与有效期】2~8℃避光保存,有效期为6个月
更多有关北京现货鸡传染性支气管炎病毒IgG抗体ELISA检测试剂盒促销的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销售以下产品:
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·牛病毒性腹泻病毒一步法RT-PCR诊断试剂盒
编号:DL117
规格:20次
【注意】接到货后请认真阅读注意事项。
【用途】用于牛病毒性腹泻病毒病的检测、诊断和流行病学调查。
【试剂】
编号 数量 保存
SR-I 4mL 4℃
SR-II 10mL 4℃
SR-Ⅲ 14 mL 4℃
TU-1 1.5mL 4℃
TU-2 0.8 mL 4℃
TU-3 250uL -20℃
TU-4 20uL -20℃
TU-5 20uL -20℃
TU-6 20uL -20℃
TU-7 60uL -20℃
TU-8 25uL -20℃
T 500uL -20℃
【操作步骤】
1.RNA提取
(1) 取病料组织(牛睾丸、)1~4于无菌研钵,研磨并用Hanks液或PBS稀释成1:3乳剂,分装1.5ml灭菌EP管,反复冻融2~3次,8000r/min离心5分钟。
(2)取200uL上清液(或标准品T),移入新的1.5mL灭菌EP管中,加入200uLSR-I,漩涡振荡混合均匀,静置5min。
(3)加75uL TU-1,漩涡振荡混合均匀,10000r/min离心5 min。
(4)将上清转移到新的2 ml离心管(试剂盒内提供)中,加入300 uL 异丙醇(1%冰乙酸),上下倒置6-8次,混合均匀。
(5)将步骤4中的混合液移入制备管中,并将制备管置于同一2 ml离心管,10000 r/min离心1min。
(6)弃滤液,将制备管置回到2 ml离心管中,加500 uL SR-II,室温静置1min,10000 r/min离心1 min。
(7)弃滤液,将制备管置回到2 ml离心管中,加700 uL SR-Ⅲ,10000 r/min离心1 min。
(8)将制备管置回到2 ml离心管中,10000 r/min离心1 min。
(9) 将制备管置于洁净的1.5 ml离心管中(试剂盒内提供),在制备管膜中央加40 uL TU-2, 室温静置1 min。10000 r/min离心1 min洗脱。洗脱液即为模板,即用或-70℃冻存备用。
2.One-Step RT- PCR加样体系
TU-3 12.5uL
TU-4 1uL
TU-5 1uL
TU-6 1uL
模 板 9.5uL
3.反应程序
第1步 50℃ 45min
第2步
第3步 94℃预变性
94℃变性 5min
45s
第4步 59℃退火 45s 30个循环(3~5步)
第5步 72℃延伸 45s
第6步 72℃延伸 6min
第7步 4℃终止 5min
4.电泳
配制1%琼脂糖凝胶,取PCR产物5uL混合1uL TU-8,加样于凝胶孔中,同时在相邻孔加3uLTU-7,在120v 电压下,1×TAE液中电泳15分钟,在紫外成像仪下观察结果。
【结果判定】
在约258bp位置出现扩增带,实验结果为阳性(如图)。
1.DL2000 Marker
2.标准阳性片段
【注意事项】
1.每次使用,开盖之前请先瞬时离心,使试剂沉于管底。
2.本试剂盒为20头份量诊断试剂,操作失误或移液器不准确造成最终剂量不够情况,不予负责。
3.尽量建立PCR试验操作区,避免交叉污染,RNA抽提严格防止RNA酶污染,要求戴一次性塑料手套,并经常更换。
4.枪头、离心管和PCR管在使用前,最好用DEPC水(0.1%)处理,然后高压灭菌后烘干,操作过程尽量不要用手接触,可用镊子夹取。
【有效期】
本制品有效期为1年,生产日期见包装侧面。
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