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SDS-PAGE凝胶快速制备及
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北京百奥莱博科技有限公司
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特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售,产品线涵盖SDS-PAGE凝胶快速制备及电泳试剂盒 蛋白质研究在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
SDS-PAGE凝胶快速制备及电泳试剂盒 蛋白质研究品牌:百奥莱博产地:国产|进口规格:50次编号:RFT076● 产品组成:名称 规格 保存条件40%PAA(29:1) 100 ml 4℃4×Tris/SDS分离胶缓冲液 pH8.8 100 ml 4℃4×Tris/SDS浓缩胶缓冲液 pH6.8 50 ml 4℃APS(干粉) 0.5 g RTTEMED 0.5ml 4℃,避光4×蛋白电泳上样缓冲液(含还原剂) 1 ml -20℃5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液(干粉) 1 L RT说明书 一份● 产品简介:本公司提供的SDS-PAGE蛋白电泳试剂盒包含凝胶制备以及蛋白电泳所需的全部试剂。本试剂盒可配制至少50块常规大小的PAGE胶。● 使用说明:一 配制分离胶(各试剂使用量请参考表二)根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度(表一),再按照下面的分离胶配方表(表二)配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。表一 不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围:SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围6% 50-150kD8% 30-90kD10% 20-80kD12% 12-60kD15% 10-40kD配制分离胶前,根据以下配方准备10% APS:10% APS配制-5 ml:将0.5 gAPS干粉溶于5 ml灭菌水中,彻底溶解后分装,1 ml/支,-20℃备存,每次取一管使用。10% APS应尽量减少室温存放时间,以防失效。10%APS在4℃有效期为一周,-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20度保存的10%APS。制备分离胶步骤:1.参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。2.按照表二将不同体积的成分在小烧杯或试管中混合;加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。3.在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5 cm的水层,使凝胶表面保持平整。4.静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,说明凝胶已聚合二 浓缩胶制备:1.去除覆盖在分离胶上的水层。2.按照表三将不同体积成分在一个小烧杯或试管中混合;加入10%过硫酸铵和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。3.将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。4.将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。5.静置30-60分钟,等待浓缩胶聚合。三 电泳:凝胶凝固好后,根据以下配方准备电泳缓冲液。5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液的配制-1 L:将一包5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液干粉全部倒入1L烧杯中,加入约900 ml水彻底溶解,用水定容至1 L,即配成5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液(此溶液不用调节pH值)。用前再稀释5倍即配成1×Tris-甘氨酸电泳缓冲液。在电泳槽的内槽内加入1×Tris-甘氨酸电泳缓冲液(让电泳缓冲液漫过加样孔),轻轻的拨出梳子,随后在电泳槽外槽加入适量的1×Tris-甘氨酸电泳缓冲液。上样,电泳,一般是浓缩胶80V,分离胶120V恒压,等指示前沿溴酚兰电泳到分离胶下缘后,结束电泳,染色或者进行下一步实验。欲了解更多SDS-PAGE凝胶快速制备及电泳试剂盒 蛋白质研究的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:·Top10化学感受态细胞编号:RFT115规格:20×100ul储存条件:-70℃冻存六个月产品简介:本公司生产的Top10感受态细胞采用经特殊工艺处理得到,可用于DNA的化学转化。使用pUC18质粒检测,转化效率可达108cfu/μg,-70℃保存几个月转化效率不发生改变。Top10菌株介绍:基因型:F- mcrA △(mrr-hsdRMS-mcrBC) j80 lacZ△M15△?lacⅩ74 recA1 deoR araD139△(ara-leu) 7697 galU galK rpsL (StrR) endA1 nupG特点:一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重组缺陷的抑制型菌株。其j80 lacZ△M15基因的产物可与pUC载体编码的 b-半乳糖苷酶氨基端实现a互补,可用于蓝白斑筛选。操作方法:(以下操作均按无菌条件的标准进行)1、取感受态细胞置于冰浴中,如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中,置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl,可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。以下实验以100 μl感受态细胞为例。2、向感受态细胞悬液中加入目的DNA(50 μl的感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30分钟。3、将离心管置于42℃水浴中放置45秒,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2-3分钟,该过程不要摇动离心管。4、向每个离心管中加入500 μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素), 混匀后置于37℃摇床振荡培养45分钟(150转/分钟),目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。5将离心管内容物混匀,吸取100 μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上,用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至液体被吸收,倒置平板,37℃培养12-16小时。注:涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA总量较多,可取更少量转化产物涂布平板;反之,如转化的DNA总量较少,可取200-300 μl转化产物涂布平板。如果预计的克隆较少,可通过离心(4,000 rpm, 2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。(涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的培养板)注意事项:1. 感受态细胞应保存在-70℃,不可多次冻融和放置时间过长,以避免感受态细胞的转化效率。2. 进行转化操作时,应根据相应温度及无菌条件的要求进行。3. 为防止转化实验不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,将损失降到最低。:p>1. 感受态细胞应保存在-70℃,不可多次冻融和放置时间过长,以避免感受态细胞的转化效率。2. 进行转化操作时,应根据相应温度及无菌条件的要求进行。3. 为防止转化实验不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,将损失降到最低。SDS-PAGE凝胶快速制备及电泳试剂盒 蛋白质研究关键词:SDS-PAGE凝胶快速制备及电泳试剂盒,RFT076,百奥莱博·彩虹预染超低分子量蛋白Marker(1.2-45KD)编号:RFT043规格:10次● 储存条件:-20℃保存,开封后有效期12个月● 产品简介:彩虹预染超低分子量蛋白质Marker可以直接观察蛋白电泳及清晰判断Western Blotting的转膜效果。本产品包含3种多肽和3种低分子量蛋白质组成,分子量范围为1.2kD-45kD,分子量大小为 1.2kD,4.6kD,10kD,16kD,27kD,45kD (注:蛋白大小已在18%Tricine-SDS-PAGE中用非预染蛋白Marker标定过。·BL21(DE3)化学感受态细胞编号:RFT111规格:20×100ul储存条件:-70℃冻存六个月产品简介:本公司生产的BL21(DE3)感受态细胞采用经特殊工艺处理得到,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,转化效率可达108cfu/μg,-70℃保存几个月转化效率不发生改变。BL21(DE3)菌株介绍:特点:(1)T7 RNA 聚合酶基因的表达受控于λ 噬菌体DE3 区的lacUV5 启动子,该区整合于BL21 的染色体上。(2)适用于T7、T7 lac 启动子的表达系统,如pET,pEASY。(3) 适用于非毒性蛋白的表达。(4) 使用pUC19 质粒DNA 检测,转化效率可达107 cfu/μg DNA。操作方法:(以下操作均按无菌条件的标准进行)1取感受态细胞置于冰浴中,如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中,置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl,可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。以下实验以100 μl感受态细胞为例。2 向感受态细胞悬液中加入目的DNA(50 μl的感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30分钟。3 将离心管置于42℃水浴中放置90秒,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2-3分钟,该过程不要摇动离心管。4 向每个离心管中加入500 μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素), 混匀后置于37℃摇床振荡培养45分钟(150转/分钟),目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。5将离心管内容物混匀,吸取100 μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上,用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至液体被吸收,倒置平板,37℃培养12-16小时。注:涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA总量较多,可取更少量转化产物涂布平板;反之,如转化的DNA总量较少,可取200-300 μl转化产物涂布平板。如果预计的克隆较少,可通过离心(4,000 rpm, 2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。(涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的培养板)注意事项:1. 感受态细胞应保存在-70℃,不可多次冻融和放置时间过长,以避免感受态细胞的转化效率。2. 进行转化操作时,应根据相应温度及无菌条件的要求进行。3. 为防止转化实验不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,将损失降到最低。SDS-PAGE凝胶快速制备及电泳试剂盒 蛋白质研究关键词:SDS-PAGE凝胶快速制备及电泳试剂盒,RFT076,百奥莱博BL0916 FITC标记人白蛋白抗体ARB13640 兔子高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)elisa检测操作说明书 Rabbit high mobility group protein b1,hmgb-1 ELISA KIT乳酸甲氧苄啶 Corn steep liquor 23256-42-0ARB11943 大鼠6酮前列腺素F1A(6-keto-PGF1A)定量分析 Rat 6-keto-prostaglandin f1a,6-k-pgf1a ELISA KITCYB162024 兔抗豚鼠IgG(抗血清) 0.5mlARB14167 牛口蹄疫亚I型抗体(AsIa 1 FMD-Ab)含量测试 BL0940 生物素化人IgG抗体BTN130643 烷基腺嘌呤DNA糖基化酶 AAG(Alkyladenine DNA Glycosylase)BTN80927 大提柱式细菌DNAOUT Maxi Column Bacterial DNAOUTPY02-022 乳糖发酵培养基 250克 ARB11107 人乳头状瘤病毒抗体IgM(HPV-IgM)Elisa分析 Human papillomavirus igm,hpv-igM ELISA KIT77-06-5 赤霉素GA3 Gibberellic Acid(GA3)BTN60603 即用型蓝白T载体A型(T7-SP6,有MCS) Instant Blue-White Vector T,Type A植物血球凝集素 Sodium hexacyanoferrate (II) 9008-97-3CYB162042 羊抗BSA(抗血清) 0.5ml
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