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上海希言科学仪器有限公司
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文献和实验现代高效液相色谱中，分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但是色谱填料的选择范围很宽，要做合适的选择，必须对此有一定的认识和了解。 一、 硅胶基质填料 1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica），以及其他具有极性官能团，如胺基团（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或其他团的极性较强，因此，分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小，即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。 正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如：正
，将流速缓慢地提高。 用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线（缓冲盐或离子对试剂度如果较低，则需要较长的时间来平衡）。 色谱柱的再生 进行色谱柱再生时，应使用一个谦价的泵，我们建议最好不使用您的高效液相色谱仪上的泵。 表1 建议用来冲洗的溶剂体积 色谱柱尺寸 柱体积 所用溶剂的体积 125-4 1.6ml 30ml 250-4 3.2ml 60ml 250-10 -20ml 400ml 请根据下表选择您的再生方法： 极性固定相（如Si，NH2，DIOL基色谱填料）的再生： 正庚烷
的溶剂体积 色谱柱规格 柱体积 溶剂体积 150×4.6 2.50ml 50ml 250×4.6 5.0ml 100ml 250×10 20ml 400ml 请根据下表选择您的再生方法： 极性固定相(如Si，NH2，Diol色谱填料)的再生：正庚烷―氯仿―乙酸乙酯―丙酮―乙醇―水 非极性固定相（如反向填料C18，C8等）的再生：水―乙腈―氯仿（或异丙醇）―乙腈―水
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