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-20℃
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6个月
- 英文名:
miaolingbio
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8888
- 供应商:
淼灵生物
- 规格:
20μl
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文献和实验细胞类型中,可高强度、组成型表达Rluc。在转基因小鼠中,CMV增强子/启动子具有泛主特点,在检测的28种小鼠组织中,24种有转录活力。pRL-Null载体pRL-null无真核启动子和增强子序列,在Rluc上游有一些单一酶切位点,可提供最大灵活性来克隆所需的启动子序列,启动海洋腔肠荧光素酶的表达。图9所显示的pRL-TK载体代表了pRL载体所共有的特点,在每个pRL载体的指定启动子的紧下游是一个嵌合的内含子,可提供海洋腔肠荧光素酶的增强表达。内含子由人β-珠蛋白质内含子1的5-供体剪切位点和免疫
类似物的瞬时表达方式。miRNA的过表达载体中有插入成熟miRNA、pre-miRNA及pri-miRNA序列三种形式。其中pri-miRNA(含侧翼序列)的方式由于保留了每个microRNA独自的原始天然双臂结构,效果更好,是应用最为广泛的方法。microRNA过表达系统中有CMV启动子(II型启动子)和H1启动子(III型启动子)两种方式供选择。III型启动子(H1、U6等)具有表达效率高、有效的确定终止位置等优点,成为首选。II型启动子适用于pri-miRNA序列中有连续的5个T-导致III
上应该有启动子的吧,比如CMV。 那你只需要克隆编码区即可。至于获得方法,你提RNA后,逆转,用PCR即可获得, 当然得测序鉴定。PCR引物两端,根据你的多克隆位点两端的酶切位点,设计相应的内切酶识别序列。 普通的RT酶普遍能逆转6K以上的片段的,你的序列才2Kb,完全没问题。 另外,现在人,小鼠等物种的基因早已经商业化了,去买一个克隆进载体的,也才3K左右,比自己做可能要省下很多金钱和精力。 baby_susan 从实际操作上讲
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