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- 2025年07月09日
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上海晶抗生物工程有限公司
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2210-25-5
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文献和实验，终止反应。（5）15000rpm离心30s，置于冰上待用。2．预杂交 按100cm2膜用20～40ml预杂交溶液，预杂交时使溶液处于流动状态。预杂交液组成：5㗓SC0.5%（W/V）封阻试剂（管11）0.1%（W/V）N-十二烷酰肌氨酸钠0.02%（W/V）SDS膜放入塑料袋，灌入预杂交液，排除气体后密封，在65℃预杂交过夜。3．杂交 按100cm2膜用2.5ml杂交液，杂交时偶尔摇动杂交袋，使里面的溶液重新分配。 杂交液组成： 50%甲酰胺（V/V） 5%（W/V）封阻试剂 5㗓SC
NaCl 10g CTAB 100ml ddH2 O 3、5% sarkosyl (N-月桂酰肌氨基钠盐) 500ml 用时，将上述三种溶液按1：1：0.4 比例混匀，加入亚硫酸氢钠（3.8g/l），65℃预热，既为抽提液。 （二）器材 恒温水浴、研钵、电泳设备 四、操作步骤 （一）、基因组 DNA 提取 1 取0.15g左右小麦叶片，在液氮中研磨后放入1.5ml离心
。与Ni2+亲和结合的标签被紧密地结合在树脂上，在流出液中则可以得到纯化的目的蛋白。所有这三种蛋白在纯化后都正确折叠且均一分散在溶液中。纯化的膜结合蛋白E8R牛痘病毒蛋白在Tris缓冲液中除去NusA后出现了沉淀，然而加入0.02%的月桂酰基麦芽糖苷和150mM的氯化钠后，蛋白又重新变得可溶。 ■ 环麦芽糖糊精酶（Turner 2005）——这个蛋白属于α-淀粉酶家族。这个家族的蛋白通常在大肠杆菌中很难以活性形式表达出来。将其与肠激酶混合孵育24小时以上会使其活性逐渐增强，直到达到未经肠激酶
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