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2-8℃
- 英文名:
NHS-activatedSepharose4FastFlow
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35
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莼试
英文名:NHS-activatedSepharose4FastFlow
别名:NHS活化羧基琼脂糖凝胶4FF
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文献和实验分子在纯化时若无商品化的亲和填料可供选择,也可以利用预活化填料,按照说明书介绍的流程,自行偶联生物分子到填料上,形成独有的亲和填料,来分离纯化其对应的生物分子,如酶/底物、抗原/抗体等。如需要纯化某种单抗,可以将相应的抗原偶联到预活化填料NHS activated Sepharose 4FF或CNBr activated Sepharose 4FF上,然后通过亲和层析实验,就可以实现抗体的高纯度纯化。偶联配基时,需要考虑活化基团是否与填料匹配,以及填料本身是否带有间隔臂。如果偶联的配基是蛋白
磁珠偶联链霉亲和素(SA)和抗体的实验方法及偶联实验过程中的一些注意事项。 一、羧基磁珠偶联链霉亲和素(SA)和抗体的原理 EDC通过与磁珠上的羧基进行反应,形成一种促发剂——不稳定的脲衍生物,NHS通过形成更稳定的酯而增强碳二亚胺交联产物的稳定性。交联过程中EDC、NHS不进入最终产物中,而是转变成水溶性的脲衍生物。 二、羧基磁珠偶联链霉亲和素(SA) 1. 偶联条件 1.1. 活化剂:EDC和NHS 1.2. 反应温度:37℃环境 1.3. 反应时间:
标记抗体包含清洗-活化-清洗-偶联-封闭-清洗-复溶保存7个步骤,其中活化、偶联和封闭是免疫标记的重要环节。以下我们会介绍微球在免疫标记中活化、偶联和封闭实验过程中的一些注意事项。 微球免疫标记抗体步骤 01. 活化 微球免疫标记常用的活化剂有EDC和NHS。EDC是极易溶于水的碳二亚胺,在酰胺合成中,用作羧基的活化试剂,使用时的PH范围一般为4.0-6.0,常和NHS连用,以提高偶联效率。在活化微球上的羧基时,微球跟活化剂的质量比,EDC跟NHS的质量比都有一个合适的比例,过少会导致活化不充分,偶联
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