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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000
- 供应商:
南京森贝伽生物科技有限公司
- 检测范围:
电询
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
仅供科研使用
- 标记物:
人
- 样本:
血清、血浆、细胞及相关液体
人抗胶原蛋白抗体(CLA)ELISA检测试剂盒实验原理:
人抗胶原蛋白抗体(CLA)ELISA检测试剂盒用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本的存在与否。
人抗胶原蛋白抗体(CLA)ELISA检测试剂盒产品介绍:
货号:SBJ-H0775
规格:96T、48T
库存状态:现货供应
保存:2-8℃,避光保存
适用范围:仅供科研使用,不得用于临床
运输方式:快递(南京客户免费送货上门)
人抗胶原蛋白抗体(CLA)ELISA检测试剂盒操作步骤:
1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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文献和实验60%活力以上。但也有个别情况例如Sal I等,也是本人用过的酶,在T+BSA活性低于20%,与Sac I基本上没法在普通Buffer里切,但是可以查到1.5T+ BSA这种特殊Buffer,效果不错。另外如果载体MCS不是太老或者太少的话可以尝试某些同Buffer酶,不必死抠师兄或者文献做法,例如后来第二次用我就重新选了Cla I和EcoR系列,可共用H Buffer,并且Cla I活性是120%。 2:质粒酶切在一开始遇到问题,即试剂盒提取后切一个小时就降解完全,后来经过研究认为是洗脱
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过滤法。①Farr法的原理为用同位素标记DNA,被标记的DNA和被检血清的抗DNA抗体结合,经50%硫酸铵饱和液沉淀,然后比较沉淀物和上清液中的放射活性,从而得出DNA结合活性,一般结合率大于20%为阳性。②过滤法是在分离结合物时用纤维素酯薄膜滤器(孔径为0.45μm)进行过滤,游离的DNA被滤去而与抗体结合的复合物被阻留在滤膜上。 3.ELISA临床上主要是应用间接ELISA检测抗dsDNA抗体,其重复性及敏感性均较对流免疫电泳及双扩散为高。目前已有试剂盒供应。
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