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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
24
- 供应商:
上海莼试
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 细胞类型:
未定
- ATCC Number:
详见说明书
- 品系:
详见说明书
- 组织来源:
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- 相关疾病:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
详见说明书
- 器官来源:
小鼠杂交瘤细胞株
- 运输方式:
干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
- 年限:
详见说明书
- 生长状态:
悬浮生长
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞株;3A6
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
小鼠杂交瘤细胞株;3A6操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
Anti-CD36/FITC 荧光素标记CD36抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CR1/CD35/FITC 荧光素标记Ⅰ型补体受体抗体(C3b/C4b受体抗体)IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD34/PE 荧光素PE标记CD34抗体(细胞表面的唾液粘蛋白)IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Anti-CD44v10 /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠CD44V10抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD34(C-term) /FITC 荧光素标记CD34抗体(细胞表面的唾液粘蛋白)C端蛋白多肽IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD34/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠、兔、牛、猪、犬CD34抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD33L/OBBP1/FITC 荧光素标记兔CD33L抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD33/FITC 荧光素标记抗CD33抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD33/Siglec-3/FITC 荧光素标记抗CD33抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD31/FITC 荧光素标记血小板内皮细胞黏附分子-1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD31(PECAM-1)/HRP 辣根过氧化物酶标记血小板内皮细胞黏附分子-1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD31(PECAM-1)/PE 荧光素PE标记血小板内皮细胞黏附分子-1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD31/FITC 荧光素标记血小板内皮细胞黏附分子-1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD30/TNFRSF8/FITC 荧光素标记CD30抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Integrin Beta1/CD29(integrin beta 1)/FITC 荧光素标记整合素β1蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD28/FITC 荧光素标记CD28蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD27/TNFRSF7/FITC 荧光素标记CD27抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD26/ADCP2/DPP IV /FITC 荧光素标记CD26抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD25/IL-2RA/FITC 荧光素标记CD25/白介素2-受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD24/FITC 荧光素标记CD24蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD23/Fc EpsilonR II /FITC 荧光素标记CD23抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD22/FITC 荧光素标记抗白细胞分化抗原CD22抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD25/IL-2RA /PE-Cy5 荧光素PE-Cy5标记兔抗人、大、小鼠白介素2受体a链抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD20/MS4A1/PE 荧光素PE标记CD20抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD20/Biotin 生物素化CD20抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD20/FITC 荧光素标记CD20抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD19/PE 荧光素PE标记CD19抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Phospho-CD19 (Tyr531) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化CD19抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
小鼠杂交瘤细胞株;3A6nti-CD19/FITC 荧光素标记CD19抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD18/LFA-1/FITC 荧光素标记白细胞粘附蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CD17/FITC 荧光素标记CD17抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
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文献和实验由于过度生长而死亡。因此制备鼠杂交瘤工作繁重且无法标准化及大规模生产。 在上世纪八十年代,制备一株鼠单抗并鉴定就可以成为一个博士论文的内容。1998 年,我们团队用新开发的兔杂交瘤融合细胞株在转基因小鼠上开展乳腺癌靶标研究,制备了上百个兔杂交瘤融合细胞的培养板。由于培养箱拥挤,一名实验员将其中的二十板杂交瘤细胞放在了其他实验室的培养箱,直到 6 周后(兔杂交瘤筛选应在 3~4 周),我在统计分析实验结果时才发现少了这二十板杂交瘤。按常理,这个时候这些杂交瘤细胞肯定全死了!但当实验员准备扔掉这二十板细胞
在液氮中保存的细胞株及体外传代培养的细胞株,都需要定期检查染色体数和抗体产生能力,因有些杂交瘤细胞会逐渐丢失染色体,使产生抗体的能力丧失或减弱。此时需及时进行克隆化,保留稳定分泌抗体的细胞株。 一、杂交瘤细胞染色体检查 材料和试剂 1. 秋水仙素。 2. 甲醇,冰醋酸。 3. Giemsa染液,玻片。 操作步骤 1. 取传代培养24h的细胞,加0.1ml秋水仙素,放37℃水浴4h。 2. 收集细胞2000r/min×10min离心弃上清,沉淀
位点) VH5’IgG-GGGGCGGCCGC GTTTTGGCTG[A/C][A/G]GAGAC[A/G/T]GTGA VH3’IgM-GGGGCGGCCGC TGACTCTCTG[A/C][A/G]GAGAC[A/G/T]GTGA 4)小鼠VL3’端引物(引入NotⅠ酶切位点) VL5’-GCGGCGGCCGC AGCCCGTTT[G/T]ATTTCCA[A/G]CTT (2)从杂交瘤细胞提取RNA,反转录成cDNA,均按试剂盒说明书操作。
技术资料暂无技术资料 索取技术资料





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