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- 上海莼试
- CS-002-1059
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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
40
- 供应商：
上海莼试
- 肿瘤类型：
详见说明书
- 细胞类型：
A类
- ATCC Number：
详见说明书
- 品系：
详见说明书
- 组织来源：
详见说明书
- 相关疾病：
详见说明书
- 物种来源：
详见说明书
- 免疫类型：
详见说明书
- 细胞形态：
淋巴母细胞样
- 是否是肿瘤细胞：
详见说明书
- 器官来源：
小鼠肝癌细胞
- 运输方式：
干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
- 年限：
详见说明书
- 生长状态：
悬浮生长
细胞名称 小鼠肝癌细胞；H22-H8D8
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 小鼠肝癌细胞，是H22细胞系的克隆系，携带外源基因。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 不详
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
小鼠肝癌细胞；H22-H8D8操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
FMR1NB 人 FMR1NB 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FN3KRP 人 FN3KRP 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FNDC3B 人 FNDC3B 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FNDC4 人 FNDC4 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FNDC4 小鼠 FNDC4 基因全长ORF克隆 cDNA Mouse
FNDC5 人 FNDC5 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FNDC7 人 FNDC7 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FNTB 人 FNTB 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FOLH1 人 FOLH1 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FOLH1 人 FOLH1 转录变体2 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FOLH1 小鼠 PSMA / FOLH1 基因全长ORF克隆 cDNA Mouse
FOLR1 人 FOLR1 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FOLR1 小鼠 FOLR1 基因全长ORF克隆 cDNA Mouse
FOLR1 人 FOLR1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签 cDNA Human
FOLR1 人 FOLR1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签 cDNA Human
FOLR1 小鼠 FOLR1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签 cDNA Mouse
FOLR2 人 FOLR2 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FOLR2 小鼠 FOLR2 基因全长ORF克隆 cDNA Mouse
FOS 人 FOS 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FOSL2 人 FOSL2 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FOXA1 人 FOXA1 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FOXA2 人 FOXA2 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FOXA3 人 FOXA3 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FOXJ3 人 FOXJ3 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FOXM1 人 FOXM1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签 cDNA Human
FOXP1 人 FOXP1 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FOXP2 人 FOXP2 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FOXP2 人 FOXP2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签 cDNA Human
FOXP3 人 FOXP3 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FOXRED1小鼠肝癌细胞；H22-H8D8 人 FOXRED1 基因全长ORF克隆 cDNA Human
FOXRED2 人 FOXRED2 基因全长ORF克隆 cDNA Human
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文献和实验板液体每孔在 2ml 左右，不宜太多，或者太少。取两个 1.5mlEP 管，记为 A 管，B 管，每个 EP 管加入 250ul Opti-MEM I，然后 A 管加入 5-10ul lipofectamine 2000，B 管加入 100pM-200pM 的 siRNA（见买来的 siRNA 说明书），然后静置 5min，混合在一起，静置 20min，用 AB 混合液加入到 1.5ml 的无血清培养基 C 内，混匀； 将六孔板里的细胞的液体吸出，用 PBS 清洗两遍； 将 ABC 混合液 2ml
Actin 3秒钟）； 6）可考虑根据说明书取阳性对照样本上样，我们是用小鼠肝癌组织蛋白。 祝好运！ yukituki 谢谢各位！ 磷酸酶抑制剂只加了NaF，没加别的。 ECL用的是Pierce的，应该没有过期，因为染别的没问题 楼上说的上样应该是30-50ug吧~~~ 我再根据你们说的试试看，有结果回来汇报~~~ ylhuang0502
CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 293FT 细胞转染验证 and trouble shooting
%；2. 72 h 后收集细胞提取基因组 DNA（按照基因组 DNA 提取试剂盒的说明书操作）；3. 使用事先设计好的引物进行 PCR 扩增，这里使用的酶是 NEB 公司的 Q5 high-fidelity Polymerase，一切按照该酶的说明书严格操作；4. 将目的条带切割下来并使用胶回收试剂盒回收 DNA 条带，一切按照胶回收试剂盒说明书进行操作；5. 回收后的 DNA 样本，经 T7 Endonuclease I 酶解验证错配 DNA，部分结果如下：T7 EI验证成功，开始正式实验时间飞逝，上次说
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