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- 技术资料
- 保存条件:
4℃
- 保质期:
有效期6个月
- 英文名:
Lentivirus Concentration Solution
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
50mL
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
| Lentivirus Concentration Solution 慢病毒浓缩试剂盒 | 41101ES50 | 50 mL | 1155.00 |
产品描述
翌圣慢病毒浓缩试剂盒中含有5×浓缩液,能对所有类型的慢病毒颗粒进行简单快速的浓缩。该试剂盒操作简单,仅需将5×浓缩液与慢病毒上清按比例混合并短时间孵育,然后使用普通的离心机离心,即可得到浓缩的慢病毒颗粒,回收率高达90%以上,可提高100倍病毒滴度。

运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。产品放到4 ºC保存,有效期6个月。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤
1. 收集慢病毒上清液,0.45 μm滤膜过滤,以除去细胞和碎片。
【注】:如果使用滤膜过滤,只能使用低蛋白结合力的纤维素醋酸酯或聚醚砜(PES)膜。不能用硝酸纤维素膜(NC)。
2. 将慢病毒上清与试剂盒中的浓缩液按照4:1的比例混合(上清液4份,浓缩液1份),4 ℃孵育2 hrs或过夜。刚开始时每隔30 min混匀一下,混匀进行3次。
【注】:延长孵育时间可以提高回收率。慢病毒颗粒在4℃可以稳定保存数天。
3. 于4 ℃,4000 g离心25 mins。
4. 小心去除上清,不要晃动管子,一般可见白色沉淀(有时沉淀不可见)。
5. 用初始体积(原上清液体积)1/10 - 1/100的DMEM或PBS重悬病毒颗粒,小心吹打均匀,重悬沉淀物。
6. 测定浓缩慢病毒样品的滴度,50 µl/管分装,于-80 ℃冰箱保存。
【注】:慢病毒冻存液避免反复冻融,否则会降低病毒滴度。
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文献和实验Concentration of DNA by ethanol precipitation
(adapted from Bruce A. Roe, Department of Chemistry and Biochemistry, The University of Oklahoma, Norman, Oklahoma 73019 broe@ou.edu) Typically, 2.5 - 3 volumes of an ethanol/acetate solution is added to the DNA sample in a microcentrifuge tube
b-galactosidase Solution Assay
of 0.25 M Tris HCl pH 8.0. • Freeze thaw the cells 3 times by alternating between dry ice and 37°. • Spin for 15 minutes at 4° and transfer the supernatant to a new tube and hold on ice. • Mix the following reaction solution per sample: 264
and cell debris. 然后用PEG-it Virus Precipitation Solution在4度沉淀至 少12小时,1500 × g for 30 minutes at 4?C离心后用PBS重悬病毒颗粒,分装保存与-70度。 每次用浓缩后的病毒感染肝癌细胞后,都能在medium里面看到很多黑色的小点点(师姐包装的 病毒也有,但没这么明显),又不是污染,不同的细胞株里这个小黑点的多寡不一,有的很多很 多。很纳闷这个黑点到底来源于什么?磷酸钙沉淀?239FT细胞碎片?KD效率低是不是











