北京BCA蛋白浓度测定试剂盒现货

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北京BCA蛋白浓度测定试剂盒现货
品牌：百奥莱博
编号：XH062
规格：500微孔
产地：国产|进口
本试剂盒自订购之日起一年内有效。本试剂盒用于酶标板或者200ul比色皿时可做500孔。当使用2ml比色皿时可做50孔，如果是1ml比色皿时可做100孔。
产品简介
碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂（DTT，巯基乙醇）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
使用说明
一，微孔酶标仪法
1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量，按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂（50:1）配制成BCA工作液，充分混匀(混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。
2. 稀释标准品：取10微升BSA标准品用PBS稀释至100微升（样品一般可用PBS稀释），使终浓度为0.5mg/ml。将标准品按0, 2, 4，6，8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白标准品孔中，加PBS补足到20微升。
3. 将样品作适当稀释（最好多做几个梯度，如作2倍、4倍、8倍稀释），加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
4. 各孔加入200微升BCA工作液，37℃放置15-30分钟。用酶标仪测定A562nm，根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时，应注意防止因水分蒸发影响检测结果。

二，分光光度计法、
如没有酶标仪，可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。
步骤如下：
1．配制工作液: 根据标准品和样品数量，按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂（50:1）配制成BCA工作液，充分混匀(混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。
2， 稀释标准品：取100微升BSA标准品用PBS稀释至1ml（样品一般可用PBS稀释），使终浓度为0.5mg/ml。
3， 取八支（或者更多）5ml离心管，标让号，按下表加入试剂。
4， 37℃放置15-30分钟。用分光光度计测562nm处吸光值，根据标准曲线计算出蛋白浓度。

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·DNA病毒基因组提取试剂盒
编号：XH009
规格：50T/200T
原理简介
本试剂盒适合于从血清、细胞上清、淋巴液中提取DNA病毒基因组，不适合于RNA病毒基因组的提取。本试剂盒利用蛋白酶K破开病毒外壳，放出DNA，用玻璃奶吸附达到纯化目的。
使用本试剂盒提取的DNA可用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
注意事项
1．如果病毒含量过低，最后提取的基因组DAN电泳可能无法检测到，但PCR等其他实验还会有结果。
2．同一样本，如果想大量提取，可以增加样本量，并且每一步试剂加量，但使用次数会成倍减少。
操作步骤
1、 取病毒上清液0.5ml，12000rpm离心5min，尽量取上清使用，弃去沉淀。
2、 向病毒上清中加入20ul 10mg/ml的蛋白酶K，充分混匀，65℃消化10-20min，期间可颠倒离心管混匀数次。
3、 向管中加入500ul结合液，充分混匀。
4．玻璃奶摇匀。加入20ul摇匀的玻璃奶，混匀，室温放置2分钟，10000转/分钟离心1分钟，去上清；沉淀加入1ml 70%乙醇，振荡混匀，10000转/分钟离心1分钟，去上清，70%乙醇重复洗一次，再用无水乙醇洗一次。去上清，再次离心2分钟，用小吸头吸去上清。
5．室温放置10分钟（如果玻璃奶加量，请适当延长放置时间，此步为去除残余酒精，以免影响下游实验），加入30－50ul TE缓冲液混匀溶解，65℃水浴5分钟。离心，取上清为所得DNA。
8．电泳或者其他方法检测，进入下游实验。


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·pET-32a(+)
编号：XH044
规格：25ug(0.5OD)
载体类型：大肠杆菌表达载体
载体大小： 5900 bp
载体宿主：大肠杆菌（E.coli）
细菌抗性：氨苄青霉素（Amp）
5" 测序引物：S Tag primer
3" 测序引物：T7 terminator primer
载体简介：
The pET-32 series is designed for cloning and high-level expression of peptide sequences fusedwith the 109aa Trx Tag thioredoxin protein . Cloning sites are available for producing fusionproteins also containing cleavable His Tag and S Tag sequences for detection and puri cation.Unique sites are shown on the circle map. Note that the sequence is numbered by the pBR322 convention, so the T7 expression region is reversed on the circle map. The cloning/expression regionof the coding strand transcribed by T7 RNA polymerase is shown below. The f1 origin is oriented
so that infection with helper phage will produce virions containing single-stranded DNA that corre-sponds to the coding strand. Therefore, single-stranded sequencing should be performed using theT7 terminator primer.

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