
iPS细胞建系技术服务
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- 2025年07月16日
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自人类hiPS细胞被诱导成功开始,生物学家们一直在优化iPS细胞的诱导方式,包括:重编程蛋白投递方式、人工合成的mRNA转染方式以及腺病毒,仙台病毒介导等。2012年美国科学家采用episomal质粒(非整合型质粒)电转诱导方式,从人脐带血中成功诱导获得了非整合型的hiPS细胞。这项研究提示了,个体外周血细胞可能也能够通过此种方式进行体细胞的诱导型重编程。捷易生物运用非整合型质粒电转方式,已成功并高效地从少量人外周血(3ml外周血),尿液脱落细胞(250ml尿液)和皮肤成纤维细胞中诱导出非整合型hiPS细胞,现在推出非整合型人iPS细胞建系、鉴定、保存、基因编辑和分化服务。
1.hiPS细胞建系平台优势
取材灵活
外周血、尿液、皮肤
无整合
非整合型质粒电转、不用沉默p53
无异源性物质
Xeno-free培养、全体系无血清
无整合,效率30%以上
高效安全基因修复或建模打靶
2.iPS细胞鉴定
不同于PBMC细胞,诱导得到的iPS细胞呈扁平状克隆集群样生长。
iPS细胞被碱性磷酸酯酶染色,表明具有分化潜能
使用游离质粒电转/仙台病毒感染,外源基因不整合至基因组
iPS细胞体外培养,仍然保持正常核型(46,XY)
iPS细胞仍然携带患者特异的突变位点
iPS细胞多能基因表达情况分析
iPS细胞多能性标记物免疫荧光染色结果
将iPS细胞移植到免疫缺陷小鼠中,能分化成具有内/中/外三胚层组织的畸胎瘤
3.科学方案设计
材料选取,hiPS细胞建系,到hiPS细胞的鉴定,每一步都需要科学、缜密的设计,以保障高质量研究成果。
4.出色完成每一个项目环节,助力科学研究
捷易致力于精准医学的科研服务。结合丰富的项目经验,专业的项目方案指导和分析流程,保证项目准确并且快速地进行。
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文献和实验2、 TetraOneTM 基因敲除——成熟、修饰准确、效果稳定,制作周期只需 6 个月 TetraOneTM 基因敲除是业界推出的的新技术,沿用 ES 细胞同源重组的技术体系,采用独特的建系和基因改造技术建立了具有遗传优势的 TetraOneTM ES 细胞系,通过胚胎发育前期的显微注射,使TetraOneTM ES 细胞100% 代替内源 ES 细胞,实现跨越“嵌合体”阶段从而快速获得去 Neo 杂合子小鼠的基因打靶专利技术。 TetraOneTM 技术是基于 ES 细胞打靶技术的金标
通路的一个主要的下游基因, 这两条信号通路对于多能性的维持都很重要. Klf4 具有癌基因和肿瘤抑制基因的双重特性。它的过表达可以维持Oct4 的表达, 并抑制ES 细胞的分化; 它可以协同Oct4 和Sox2, 从而调节某些基因的转录。 Lin28在许多物种当中是一种控制多种细胞发育的负调控基因。 在人类和小鼠ES 细胞中, 随着ES 细胞的分化, Lin28 的表达下降。优化建系方法早期建立iPS细胞的方法为:利用逆转录病毒介导表达4个Yamanaka因子, 然后将细胞在ES细胞培养液中培养, 再用
。 TetraOneTMKO的技术原理赛业生物科技采用独特的建系和基因改造技术建立了具有遗传优势的TetraOneTM ES细胞系,通过在胚胎发育前期进行显微注射,使TetraOneTM ES细胞100%代替内源ES细胞,实现跨越“嵌合体”阶段从而一步直接获得TetraOneTM小鼠的基因打靶专利技术。实验结果显示,TetraOneTM小鼠的特征均与传统ES打靶技术产生的F1代小鼠一致。赛业生物提供的TetraOneTMKO服务赛业生物提供利用TetraOneTM KO技术构建的完全性基因敲除小鼠、条件
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