- ¥240 - 700
- Solarbio
- 北京
- H8761
- 2026年02月10日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20ºC
- 保质期：
2年
- 英文名：
Polybrene
- 库存：
准现货
- 供应商：
Solarbio
- CAS号：
H8761
- 规格：
500ul/500ul*5
| 规格： | 500ul | 产品价格： | ¥240.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 500ul*5 | 产品价格： | ¥700.0 |
品牌：Solarbio | 货号：H8761 | CAS：
别名 : DNA转染增强剂
储存条件 : -20ºC可保存2年
单位 : 支
产品介绍：
Polybrene（聚凝胺，hexadimethrine bromide）是一种多聚阳离子聚合物，常用于哺乳动物细胞的DNA转染实验以增强脂质体的转染效率。Polybrene目前广泛用于逆转录病毒介导的基因转染，慢病毒介导的基因转染，作用机理可能是通过中和细胞表面唾液酸与病毒颗粒之间的静电排斥从而促进吸附作用。Polybrene也是一种有名的抗肝素剂（肝素拮抗剂），常用来生产非特异性凝集的红细胞。另外Polybrene也多用于蛋白测序，因为小剂量的Polybrene在自动测序分析可明显改善多肽的降解现象。PVDF膜加入polybrene还能提高膜的亲和性。
本产品为即用型溶液，粉末用0.9%NaCl配置成10mg/ml的溶液，并用0.22μM滤膜过滤除菌。使用时一般按1:1000-1：2000稀释，依细胞种类不同稀释比例不同，具体查阅相关文献。
注：Polybrene对某些细胞（如末端分化的神经元，DC细胞）毒性较大，初次应用建议先做毒性测试。
运输与保存方法
冰袋（wet ice）运输。-20 ºC可保存2年，建议分装保存，避免反复冻融。
操作步骤(仅供参考，具体使用浓度请参考相关文献)
实验1：逆转录病毒感染（Retroviral Infection）
（1） 重组逆转录病毒原液的制备：取5ml生长培养基（5%血清）加入约含单层转染逆转录包装细胞的100mm培养盘内。孵育24h后，吸去培养液并用0.45μm滤器过滤。
（2）待感染细胞的培养：100mm培养盘内加入10ml完全培养基，细胞密度为5×105/盘。
（3）病毒感染：细胞培养24h后，吸去完全培养液。用含polybrene的2ml病毒上清 （或将病毒原液稀释到2ml）感染细胞，polybrene的终浓度为5μg-10μg/ml。37°C孵育3-6h。
（4）收集病毒颗粒：加入8ml完全培养基。感染3天后，按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。
实验2：转染
（1）完全生长培养基培养细胞，培养细胞密度约50%；
（2）孵育细胞18-24h后准备DNA-培养基- Polybrene混合液，按如下操作制备混合液：①添加完全培养基（60mm培养皿2ml，100mm培养皿3ml），37°C预热；②添加10ng~10µg质粒轻轻混匀；③加入Polybrene至终浓度为5μg-10μg/ml。轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。
（3）去除培养基，在细胞中加入DNA-培养基-Polybrene溶液，在37°C孵育细胞6-20h。细胞培养的前6h内约每1.5h轻柔混匀。
（4）去除DNA-培养基-Polybrene溶液。用DMSO shock solution（15%DMSO in 1X HBSS）轻轻盖住细胞（60mm培养皿3ml，100mm培养皿4ml）。每次加入溶液时用手轻晃培养盘10s，使得液体均匀分布。然后37°C孵育细胞4min。
（5）立即去除DMSO shock solution，用完全生长培养基轻轻清洗细胞2次。对于60mm培养皿每次用5ml培养液清洗，100mm培养皿每次用10ml培养液清洗。
（6）加入完全培养基到细胞中；
（7）稳定转化：去除生长培养基，按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。
瞬时表达：去除生长培养基，加入新鲜的生长培养基。24-72h后收获细胞。
参考文献：
《Identification and characterization of a murine model of BCR?ABL1+ acute B?lymphoblastic leukemia with central nervous system metastasis》 作者:Xiaozhuo Yu, Hua Zhang, Meng Yuan, Ping Zhang, Yang Wang, Mingzhe Zheng, Zhuangwei Lv,Canyu Li, Chengcheng Liu, Yunfeng Ma, Yanhong Ji 期刊:Oncology Reports 影响因子:3.041 PMID:31173268
《Establishment and characterization of an immortalized renal cell line of the Chinese tree shrew (Tupaia belangeri chinesis)》 作者:Tianle Gu,Dandan Yu ,Yu Li,Ling Xu,Yu-Lin Yao,Yong-Gang Yao 期刊:Applied Microbiology and Biotechnology 影响因子:3.67 PMID:30637496
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文献和实验with polybrene and the virus adsorption should be done in the presence of polybrene. Cells vary in the amount of polybrene that they will tolerate. From 1 to 10 µg per ml is usual. Some of these values can be found in the Cell Line HyperCard stack
to be infected should be pre-treated with polybrene and the virus adsorption should be done in the presence of polybrene. Cells vary in the amount of polybrene that they will tolerate. From 1 to 10 µg per ml is usual. Some of these values
Transduction Protocol for Adherent Cell Types
Culture Hood, aspirate off cellular media and replace with 1.25ml viral supernatant of desired concentration into each well. - Add cross linker (polybrene or protamine sulfate) if desired directly to media at a final concentration of 8μg/ml
