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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
His-tag Protein Purification Kit
- 库存:
567
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
10ml
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应His标签蛋白纯化试剂盒 蛋白质研究,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
His标签蛋白纯化试剂盒 蛋白质研究
英文名:His-tag Protein Purification Kit
品牌:百奥莱博
编号:YT046
规格:10ml
产地:国产|进口
我公司生产的His标签蛋白纯化试剂盒,俗称镍柱试剂盒,是一种采用了新型的BeyoGoldTM His-tag Purification Resin的可以兼容还原剂和螯合剂,并能简单、快速、高效并且高特异性地纯化His标签蛋白的试剂盒。
试剂盒提供了His标签蛋白所需的相关试剂和亲和层析空柱管,为His标签蛋白的纯化带来了极大的便利。
通常带有6个组氨酸标签的重组蛋白(6xHis-tagged recombinant protein)或带有6个以上连续组氨酸标签的重组蛋白,被称为His标签蛋白。蛋白样品溶液通过BeyoGoldTM His-tag Purification Resin时,重组蛋白His标签上的组氨酸残基能特异性地结合到BeyoGoldTM His-tag Purification Resin中的镍离子上,其它蛋白则不能被结合。洗涤后,His标签重组蛋白可在非变性条件下被洗脱,从而被分离纯化。
BeyoGoldTM His-tag Purification Resin对His标签重组蛋白的亲和力强、选择性高、结合容量大,可以获得高纯度的His标签重组蛋白,可用于简单、快速、高效地纯化细菌、哺乳动物细胞、昆虫及杆状病毒等多种表达系统中表达的His标签重组蛋白。纯化的蛋白可以用于结构和功能研究、抗体制备、蛋白与蛋白相互作用、蛋白与核酸相互作用等方面的研究。
BeyoGoldTM His-tag Purification Resin采用了一种高度交联的6%琼脂糖凝胶(Sepharose CL-6B)为基质,并使用了进一步优化的接臂和镍离子螯合技术,和目前市售的大多数Ni-NTA agarose或类似产品相比,非特异性蛋白结合显著降低,耐受压力强,镍离子螯合非常稳定。和同类产品相比,本产品由于镍离子基本不会流失,重复使用本纯化介质时不需要重新装载镍离子。
Ni-NTA agarose以及绝大多数类似的镍柱产品不能耐受蛋白样品中常见浓度的还原剂如二硫苏糖醇(DTT)、β-巯基乙醇等以及常见浓度的螯合剂如EDTA等,但BeyoGoldTM His-tag Purification Resin可以很好地耐受DTT等还原剂以及EDTA等螯合剂。本产品可耐受20mM DTT等还原剂,以及20mM EDTA等螯合剂。这为需要添加还原剂或螯合剂的蛋白样品的纯化提供了可能性。本产品不兼容8M尿素和6M盐酸胍。对于包涵体蛋白的纯化,在采用8M尿素或6M盐酸胍溶解蛋白的情况下,需要通过透析去除尿素和盐酸胍后才能使用本产品进行His标签蛋白的纯化。
BeyoGoldTM His-tag Purification Resin已经螯合了镍离子,呈蓝色,凝胶的颗粒直径为45-165μm。可耐受的最大压力为0.025MPa,约合5.8psi。采用固定流速进行蛋白纯化时的推荐流速为0.5ml/min。
BeyoGoldTM His-tag Purification Resin可以高容量、高特异性地结合His标签蛋白。最大蛋白结合量为20-30mg蛋白/毫升凝胶。实际使用时的最大结合量取决于待纯化的His标签重组蛋白的分子量大小,分子量越大则最大结合容量越大,分子量越小则最大结合容量越小。对于分子量为50kD的蛋白,每毫升凝胶的实际最大纯化量约为6-10mg,对于分子量为100kD的蛋白,每毫升凝胶的实际最大纯化量约为12-20mg。但对于分子量相同的蛋白,也会因为蛋白本身特性的不同,结合的最大容量也会有所不同。
BeyoGoldTM His-tag Purification Resin储存在30%乙醇中,10ml总体积中5ml为凝胶,5ml为液体,需要充分重悬后再吸取。
一个包装的本产品最多可纯化10种带有His标签重组蛋白,每种蛋白的最大纯化量为10-15mg。对于分子量为50kD的带有His标签重组蛋白,一个包装的本产品实际最多可纯化10种约3-10mg的蛋白。在不使用亲和层析空柱管的情况下,参考本说明书本试剂盒足够进行500次的小量His标签蛋白纯化。
保存条件:
4℃保存,至少一年有效。除BeyoGoldTM His-tag Purification Resin外,其余均可以-20℃保存。
注意事项:
请勿在-20℃或更低温度冷冻保存BeyoGoldTM His-tag Purification Resin。
BeyoGoldTM His-tag Purification Resin。使用过程中,缓冲试剂如Tris、HEPES、MOPS等的浓度不宜超过100mM,EDTA浓度不宜超过20mM,SDS和sarkosyl的浓度不宜超过0.3%,Triton、Tween、NP-40的浓度不宜超过2%,脱氧胆酸钠、CHAPS的浓度不宜超过1%,组氨酸浓度不宜超过20mM,钙离子浓度不宜超过5mM,钠离子和镁离子浓度可以高达2M,甘油浓度可以高达50%。其它未提及试剂的兼容性可以参考上述试剂,但还有待实验验证。
BeyoGoldTM His-tag Purification Resin保存和纯化过程中应始终保持凝胶湿润。
若离心不能完全除去蛋白样品中的不溶物,可以将样品溶液用0.45μm的滤膜过滤。
蛋白样品收集后宜尽快完成纯化工作,并应始终放置在4℃或冰浴,以减缓蛋白降解。为有效抑制蛋白降解,可以在裂解液中添加适量的蛋白酶抑制剂混合物,蛋白酶抑制剂混合物(His-Tag蛋白纯化用)。
若使用本说明书提供的条件无法达到理想的纯化效果,可尝试改变洗涤液和洗脱液中咪唑的浓度和(或)pH,以达到最优效果。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
我公司的His标签蛋白纯化试剂盒 蛋白质研究,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销售下列产品:
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His标签蛋白纯化试剂盒 蛋白质研究关键词:His标签蛋白纯化试剂盒,YT046,His-tag Protein Purification Kit
·柠檬酸钠-EDTA抗原修复液(40X)
编号:YT082
英文名称:Citrate-EDTA Antigen Retrieval Solution
规格:125ml
柠檬酸钠-EDTA抗原修复液是一种常用的抗原修复液,结合了柠檬酸钠和EDTA进行抗原修复的优点,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。
本抗原修复液采用了常用的柠檬酸钠缓冲液和EDTA,结合了两者修复抗原的优点,并经过适当优化,可以更加有效地去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
本产品适用于石蜡切片,也可以用于冰冻切片等其它样品。
保存条件:
4℃或-20℃保存,一年有效。
注意事项:
抗原修复过程可以使用我公司的染色缸和染色架或邮寄夹进行操作。塑料染色缸、染色架和邮寄夹可以很好地耐受沸水浴,而玻璃染色缸需避免骤冷骤热导致的玻璃破碎。
本抗原修复液使用前必须用重蒸水或MilliQ水稀释40倍,配制成抗原修复液(1X)。
冻存的本产品需适当加热后才能完全溶解。同时由于本产品含有少量的特殊去垢剂,加热后会产生非常细密的气泡而呈现非常均匀的类似浑浊状,属于正常现象,并非不溶解或产生了沉淀。室温放置较长时间后,例如1-2天,溶液会完全澄清。对于溶解后呈现非常均匀的类似浑浊状的本产品,此时即可取适量稀释后使用。抗原修复过程中加热时也会产生非常细密的气泡而呈现均匀的浑浊状,也属于正常现象,请放心使用。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
His标签蛋白纯化试剂盒 蛋白质研究关键词:His标签蛋白纯化试剂盒,YT046,His-tag Protein Purification Kit
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