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外周血单个核细胞（PBMC）分离方法及注意事项

核细胞分离开来。 Ficoll密度梯度离心法是分离、纯化PBMC最常用的方法。Ficoll是蔗糖的多聚体，中性，平均分子量400000，当密度为1.2g/mL，未超出正常生理性渗透压，也不穿过生物膜，故常用作PBMC分离的分离液。红细胞、粒细胞比重大，离心后沉于管底；淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分离液比重，离心后漂浮于分离液的液面上，也可有少部分细胞悬浮在分离液中。吸取分层液液面上的白膜层细胞，并进行适当的清洗，就可从外周血中分离到较高纯度的单个核细胞，即PBMC。 2    方法 1）  取新鲜抗凝

用于基因芯片分析的血液样品的准备

由于血液中的红细胞没有细胞核，用于基因表达分析时，往往是分析血液中白细胞的基因表达情况。因此首先需要把血液中的白细胞进行分离。下面方法是我们实验室摸索的适合基因芯片技术白细胞分离的过程。一、实验材料：淋巴细胞分离液（天津TBD生物技术发展中心）；灭菌生理盐水（普通0.9%生理盐水灭菌即可）；Trizol试剂（Invitrogen公司）各种取样器具高温灭菌即可；仪器设备：带水平转头的离心机，具体过程：以2 ml全血为例1、将2 mL抗凝血（肝素或者EDTA盐抗凝都可），以3,500 转/分，离心

快速分离单个核细胞方法总结

                3在1200g条件下离心10分钟； 注意：可延长离心的时间，去除更多的粒细胞，从而获得纯度更高的PBMC； 4离心后，管内样品从上往下分层如下：血浆-白膜层-分离液-隔层-分离液-红细胞沉淀； 5直接将隔板上层液体快速倾倒入另一无菌离心管中(有少许红细胞贴于隔层上方为正常现象，因其离心后贴壁不会随上层液体倾倒出来)； 注意：倾倒隔板上层液体时需迅速，且一次性完成，勿反复倾倒。通常白膜层距离下方隔板尚有一段距离，因此倾倒时也不必将全部上层液体全部倒尽。 6加入PBS