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文献和实验相关专题 成功走出第一步:DNA提取 碱裂解法 大量提取质粒(500mL菌液) 1、取培养至对数生长后期(一般培养12~16小时)的含待提质粒的细菌 培养液于离心杯中,配平,4℃下4000rpm离心15min,弃上清,然后将离心管倒置于干净的约纸上使上清液全部流尽。 2、向盛有细菌 沉淀物的离心管中加入20mL冰冷的溶液Ⅰ,重悬沉淀(先加5mL溶液Ⅰ,用干净的玻璃棒搅拌均匀后,再加剩下的部分)。
/ml.结果都没长出细胞,空载体对照也没长出。载体是pPIC9K。我用电转,涂于MD固体培养基,发现转化效率较低,每块板长出十几个点,是否是转化效率低导致的?谢谢指教! 参考见解:不知道你的转化条件是否得到优化?我认为您是否可以从以下几点入手: (1)挑取酵母单菌落,接种至含有5ml YPD培养基的50ml三角瓶中,30℃、250~300r/min培养过夜;取100~500μl的培养物接种至含有500ml新鲜培养基的2L三角摇瓶中,28~30℃、250~300r/min
Purpose Materials10ml 6% dextran + 7ml citrate/citric acidDextran: T500 --> 6g+100ml PBSCitrate solution: 25g Na Citrate + 8g citric acid + 500 ml PBS 43 ml blood 12 ml RT Histopaque 107718 ml cold H2 O2 ml 10x PBSM199 for HUVECs: 1L powder pocket
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