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文献和实验实现活细胞成像自动化以及简化任务对于达到实验目标至关重要。这里介绍 4 个需要留意的技巧: 1. 让标本在温暖、稳定的环境中保持健康状态 活细胞成像过程中最大挑战之一就是如何在温暖舒适的培养箱之外确保样品健康并能够在显微镜下表现正常。 可以利用能够为细胞提供稳定温度、湿度和 CO 2 密度的显微镜专用载物台上式培养箱或封闭式培养箱确保您的标本环境尽可能适宜。 另外可以加热物镜,否则其作为寒冷的接触源可能会损害样品的健康。 注意,微孔板外围区域可能存在比中心区域更高的环境波动风险
简介 实体瘤以三维(3D)空间构象生长,导致氧和营养物质以及其他物理和化学应力的异质性暴露。为了模拟三维空间构象,在肿瘤研究中普遍使用三 维体外培养模型。肿瘤干细胞 (CSC) 是指肿瘤内具有自我更新能力的那一小部分细胞,常常在化疗治疗后驱动肿瘤恶变和复发。传统上,肿瘤干细胞会从癌细胞系和肿瘤活检组织中分离出来,并在三维肿瘤球状体悬浮培养物中生长。 本实验方案描述了一种以 96 孔球形微孔板制备和培养肿瘤球状体的基本方法。这种基础培养和测定实验方案适用于所有球形微孔板。表 2 提供了将 96
基因表达调控的重点。现在的基因数据库信息丰富,拿到基因及其启动子序列非常简单。那么问题又来了,拿到启动子序列以后,下一步怎么找相关的调控蛋白/转录因子呢?生物信息学方法预测?你会得到很多可能的目标调控蛋白/转录因子,还要做实验一个一个验证。凝胶迁移(EMSA),染色质免疫共沉淀(ChIP)?只能针对已知能与启动子结合的调控蛋白/转录因子,而且还需要相应探针/抗体,对于大量筛选无能为力。美国Signosis的转录因子(结合启动子)微孔板芯片检测试剂可以方便、高效地解决这一问题。该方法专门用于筛查与特定DNA序列
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