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文献和实验管内产生温和的负压,并使持卵管末端吸住受精卵。此操作必须确保受精卵基底部与凹玻片基底部轻轻接触。注意不宜吸得过紧,否则会使卵变形,甚至会将卵吸人持卵器内。 6) 对持卵管内真空进行缓慢调节,使持卵管内受精卵轻柔地旋转,使卵内原核位于持卵管口的远侧端。 7) 维持持卵管稳定,使注射针的针头紧靠受精卵的透明带,进行调节并使针与原核处于同一平面上。用注射针依次刺破透明带,细胞外膜,前核核膜,进入核膜内,受精卵的透明带易被针尖刺破,前核核膜相当有弹性,应用不同的方法进行尝试突破此结构。操作时避免与核
培养瓶(100ml);培养皿;离心管(10ml)移液管(10ml与1ml);漏斗;10层纱布;三角锥瓶(100ml);吸耳;酒精灯;酒精(75%);碘酒(3%);火柴;瓶塞;镊子;滤器及配套滤膜(25mm直径 孔径0.22um);50ml注射器;烧杯;蛋座;记号笔;离心管架;金属饭盒;照蛋器。 2.2 实验仪器 仪器名称 产地 超纯水仪 Water pro ps.labconco 电子天平 ShangpingFA2004. 上海天平仪器厂 高压灭菌仪 HIRAYAMA4 双蒸水仪
净化工作台及二氧化碳培养箱、离心机、倒置显微镜等。缓冲间可放置电冰箱、冷藏器及消毒好的无菌物品等。 (3)操作间:普通培养箱、离心机、水浴锅、定时钟、普通天平及日常分析处理物品。 (4)洗刷消毒间:烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等。 (5)分析间:显微镜、计算机及打印机等。 3、培养器皿 细胞培养以玻璃器皿为主,常准备最需使用量的三倍。器皿应选择透明度好、无毒、中性硬度玻璃制品。常用的玻璃器皿有下面几种。 (1)液体储存瓶:用于储存各种配制好的培养液、血清等液体,常以500ml
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