Transwell-膜嵌套，透明，12mm直径，0.4um孔

转基因小鼠模型的建立(SOP)

管内产生温和的负压，并使持卵管末端吸住受精卵。此操作必须确保受精卵基底部与凹玻片基底部轻轻接触。注意不宜吸得过紧，否则会使卵变形，甚至会将卵吸人持卵器内。 6）  对持卵管内真空进行缓慢调节，使持卵管内受精卵轻柔地旋转，使卵内原核位于持卵管口的远侧端。 7）  维持持卵管稳定，使注射针的针头紧靠受精卵的透明带，进行调节并使针与原核处于同一平面上。用注射针依次刺破透明带，细胞外膜，前核核膜，进入核膜内，受精卵的透明带易被针尖刺破，前核核膜相当有弹性，应用不同的方法进行尝试突破此结构。操作时避免与核

各类细胞培养小结

素工作液；DAB工作液（武汉博士德公司）显色，自来水终止反应；脱水，透明，D·P·X封片保存。 2 结果 2.1 形态学观察结果 组织块24ｈ开始贴壁，48～72ｈ可见神经组织边缘游出少量细胞，主要为圆形或梭形（图1）。8～9d左右，细胞基本铺满培养孔。此时改用无血清条件培养基培养进行纯化。培养过程中，部分细胞死亡。12d左右获得的细胞胞体基本为呈圆形或多角型，直径约6～10μm。细胞核较大，胞质少（图2）。 2.2 免疫组织化学染色结果 培养的视神经少突胶质细胞的免疫组织化学染色GC蛋白

细胞培养技术扫盲——入门必知篇

净化工作台及二氧化碳培养箱、离心机、倒置显微镜等。缓冲间可放置电冰箱、冷藏器及消毒好的无菌物品等。 （3）操作间：普通培养箱、离心机、水浴锅、定时钟、普通天平及日常分析处理物品。 （4）洗刷消毒间：烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等。 （5）分析间：显微镜、计算机及打印机等。 3、培养器皿 细胞培养以玻璃器皿为主，常准备最需使用量的三倍。器皿应选择透明度好、无毒、中性硬度玻璃制品。常用的玻璃器皿有下面几种。 （1）液体储存瓶：用于储存各种配制好的培养液、血清等液体，常以500ml