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文献和实验改性处理后,可以让细胞更好的进行贴壁培养,这样根据细胞贴壁面积又可以分为25~175cm2多种。 国产的 细胞培养 瓶一般盖子都是封闭的,不带内垫,常用于密闭培养,可保证其密闭性;进口的培养瓶的盖子样式比较多:密闭盖、聚酯盖、透气盖、隔垫盖等。密闭盖的性能和国产的是相同的,聚酯盖常用于开放培养,只需轻轻旋松瓶盖便可保证瓶内气体与环境中气体的交换。透气盖是在瓶盖中加了0.2μm疏水滤膜,提供无菌气体交换,减少污染的风险。常用于开放培养,推荐用于CO2
损伤。6. 离心去上清液: 1 100 rpm,5~10 分钟,去除培养基(含胰酶及 EDTA),沉淀物为细胞。7. 计数:在显微镜下进行细胞计数。按 5×106 细胞密度接种细胞,即吸出 1 ml 细胞母液加入新的培养基。8. 传代:用完全培养基调整适当的细胞浓度后再分瓶培养(可 1:3 至 1:5 传代,在 25 cm2 的培养瓶中长满细胞可达 5*106/ml,经 10 倍稀释每瓶达 105/ml 即可,25 cm2的培养瓶每瓶 5 ml 培养液)。再将培养物重新放回 5% CO2、37 度
's phosphate-buffered saline, Ca++/Mg++ free, D-PBS, GibcoBRL 21600-010) 2.2. trypsin-EDTA solution (0.05% trypsin-0.53 mM EDTA-4Na, GibcoBRL 25300-062): 以10 ml 分装于15 ml无菌离心管中,保存于-20℃,使用前放在37℃水槽回温。 2.3. 新鲜培养基 2.4. 无菌吸管/离心管/培养瓶
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