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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 库存:
872
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
500ml|2L
多用于免疫组化和细胞染色
注意事项:
生物学和医学上经常用的一种磷酸缓冲液,主要由磷酸氢二钠和磷酸二氢钾组成的粉剂。溶于水后pH约为7.2-7.4。
储存条件:室温,12个月
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文献和实验20×SSC溶液 【配制方法】 在800ml水中溶解175.3g NaCl和88.2g柠檬酸钠,加入数滴10mol/l NaOH溶液调节 pH值至7.0,加水定容至1L,分装后高压灭菌。 (责任编辑:大汉昆仑王)
细胞可以省略该步骤。 2) 将细胞悬浮液收集到离心管中,在2-8℃下以1000×g离心5分钟,然后吸去培养基,用预冷PBS洗涤细胞3次。 3) 加入适量的预冷PBS(建议在使用前立即加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。在6孔培养板(约1×106个细胞)中,每个孔加入150-250μL的PBS来重悬细胞。 4) 使样本在-20℃或-80℃条件和室温条件下反复冻融,重复冻融过程数次,直至细胞完全裂解。也可以使用超声波细胞破碎器超声处理悬浮液来裂解细胞。 5) 2-8℃下以1500×g离心10分钟,去除细胞碎片,收集
的时候出问题了 细胞估计已经破裂 固定时候应该缓慢添加固定液 有的时候固定液就是用PBS和无水乙醇配置的。 Fasta921 我做的步骤:接种适当浓度细胞于培养皿中,培养过夜后,经0.25%胰蛋白酶消化,冷磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤后离心,用70%(体积分数)预冷乙醇悬浮细胞于-20度固定过夜后,离心收集细胞,用PBS洗3次去除乙醇,细胞团重悬于PBS中,用20 μg/ml含RNaseA的碘化丙啶PI染色液避光染色30 min,经100目尼龙
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