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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
421
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 英文名:
Auto-induction Medium
- 规格:
200mL
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京自诱导培养基(lac启动子)多少钱,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京自诱导培养基(lac启动子)多少钱,产品信息:
类别:克隆与表达
英文名:Auto-induction Medium
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| 自诱导培养基(lac启动子) | BTN100825 | 200mL |
产品及特点:
本产品是本产品是在pET专用生长培养基的基础上开发而成的,它利用E.coli自身对培养基中不同碳源的调控利用机制,实现外源蛋白在细菌达到饱和生长期后的自动诱发。
本产品具有下列特点:
1.本产品自动诱导表达,不需要添加任何IPTG或相关诱导物,节约成本。
2.免去了密切监控菌液密度的过程,尤其适合大规模筛选。
3.极大将细菌的生长密度OD600从2左右提高20以上。
4.极大提高外源蛋白的表达量,最高可占细菌总蛋白的45%。
5.与各种细胞培养容器(如培养瓶、培养罐、深孔管、发酵罐等)兼容。
6.本产品即开即用,非常方便。
7.适用于T7 RNA聚合酶基因由lac启动子控制的任何表达系统,如pET系列。
8.不适用于lacZ或lacY突变的宿主菌。
运输及保存:常温运输及保存,有效期两年。
自备试剂:蒸馏水
使用方法:
一:培养基的配制
1.配制自诱导培养基:将1.25 mL溶液B全部加入到200 mL的溶液A中即得自诱导培养基。注意:必须严格无菌操作,否则自诱导培养基非常容易长细菌。
2.贴好标签待用。如果长期时间不用,可以冻存在-20℃。
二:培养基的使用
1.将构建好的质粒转化入细菌,如BL21(DE3),涂于自备的、含有1%葡萄糖的LB培养基中(需要加入适当浓度的抗菌素),37℃培养过了夜。
2.挑取单个细菌接种到自备的、含适当浓度抗菌素的液体LB培养基中,37℃培养直到菌液浑浊但不饱和(一般需要6-8小时)。
3.将所得菌液按千分之一的体积比例加入自诱导培养基中(如果自诱导培养基体积是100 mL,则加入100 uL菌液),同时加入适当的抗菌素。注意:在自诱导培养基中,如果使用卡拉霉素,其终浓度比一般的培养基高,需要100 ug/mL。由于本方法所得菌液密度大,故需要大量氧气,因此培养基的体积不能超过三角瓶的五分之一。三角瓶底最好是皱褶式的,这样摇晃中氧气供应更充分。
4.37℃培养过了夜,或37℃培养到菌液饱和时降低摇床的温度到所需温度(对温度诱导型启动子)。
5.收集菌液开始蛋白纯化步骤。
北京自诱导培养基(lac启动子)多少钱专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:自诱导培养基,BTN100825,lac启动子
在提取RNA时经常使用异硫氰酸胍,有什么作用?
RNA是一种极易降解的核酸分子。高浓度强变性剂异硫氰酸胍使细胞结构迅速被破坏,使RNA从细胞中释放出来。同时高浓度异硫氰酸胍还使细胞内的RNA酶失活,使释放出的RNA不被降解。
我公司的北京自诱导培养基(lac启动子)多少钱,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销售下列产品:
| 编号 | 类别 | 名称 |
| RN2701 | RNA纯化 | 病毒RNA快速提取试剂盒 |
| BTN60205 | DNA纯化 | 柱式质粒 DNAOUT |
| BTN91108 | 核酸扩增(PCR) | T3体外转录试剂盒 |
| BTN80101 | DNA纯化 | 一管式病毒DNA-RNAOUT |
| BTN100939 | 蛋白质研究 | 福林酚试剂 |
| BTN130832 | 核酸扩增(PCR) | 通用型MLPA试剂盒 |
| CV0401 | 克隆与表达 | pBLUE-T 载体连接试剂盒 |
| PP0101 | 蛋白质研究 | BCA蛋白定量试剂盒 |
| BTN100931 | 核酸扩增(PCR) | ROX参考染料,低浓度型 |
| DN0401 | DNA纯化 | 大量全血基因组DNA提取试剂盒(溶液型) |
| BTN131115 | 蛋白质研究 | OPD干粉 |
| BTN131231 | RNA纯化 | Oligo(dT)纤维素 |
| BTN130657 | 工具酶 | 无机焦磷酸酶,热稳定 |
| BTN120514 | 克隆与表达 | 即用型蓝白T载体D型(无启动子,有MCS) |
| BTN90506 | 核酸电泳和回收 | 胶回收及PCR片段纯化两用试剂盒 |
| BTN70302 | DNA纯化 | 一步离心式石蜡清除剂 |
| PC4301 | 核酸扩增(PCR) | THERMOscript H Minus M-MuLV RTase(耐热反转录酶) |
| BTN71101 | DNA纯化 | 一步法大提质粒DNAOUT |
| RN1401 | RNA纯化 | RNAclean RNA 清洁纯化试剂盒 |
| BTN90708 | 核酸扩增(PCR) | 即用型高保真PCR试剂盒 |
| BTN130870 | 工具酶 | 硫氧还蛋白 |
| BTN131053 | 蛋白质研究 | 蛋白级DTT |
| RN1001 | RNA纯化 | EASYspin 酵母RNA快速提取试剂盒 |
| BTN81202 | 蛋白质研究 | 真菌总蛋白质微量提取试剂盒 |
| BTN130988 | 克隆与表达 | EcoR I-Not I-BamH I接头 |
| DN0201 | DNA纯化 | 小量全血基因组DNA提取试剂盒(溶液型) |
| BTN80923 | DNA纯化 | 大提柱式动物DNAOUT |
| BTN131125 | 工具酶 | 辣根过氧化物酶,偶联级 |
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文献和实验的表达系统会造成质粒的不稳定,细胞生长速度的下降和重组蛋白产量的降低[32,33]。Lanzer和Bujard曾对常用的lac启动子-操纵子系统进行了广泛的研究,证明操纵子放在启动子序列的不同位置会造成70倍差异的抑制。将17bp的操纵子置于-10和-35六聚体区之间所形成的抑制比将其放在-35区的上游或-10区的下游要高50-70倍[34]。 启动子的第三个特性是其简便和廉价的可诱导性。大量生产蛋白质最常用的启动子是热诱导(λPL)和化学诱导(trp)启动子。异丙基硫代-β-D-半乳糖
1,可以制造足够的lac抑制子有效的阻断转录,是储藏并繁衍pQE质粒的理想菌株。这些菌株也可以作为表达无毒害蛋白的宿主菌,但是它们的表达效率可能比M15要低,同时控制程度也没有M15那么严谨。 Qiagen的表达菌株也具有抗性,这样就保证了在加入IPTG诱导前不会有任何外源蛋白的本底表达,因为如果菌株在传代过程中失去了pREP4,也就丧失了卡那抗性,因此会被抗生素消灭掉,剩下的都是含有抗性和lac抑制子的细菌。虽然这个设计会给我们带来一定的麻烦并提高培养基的成本,但是在菌株培养过程中难免会有突变
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