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北京百奥莱博科技有限公司
200U/1000U/3000U
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售快速PCR扩增试剂盒(国产,进口),我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
编号:YBP092
规格:200U/1000U/3000U
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
产品介绍:
Taq DNA Polymerase是从克隆有Thermuaquaticus DNA Polymerase基因的大肠杆菌经诱导表达后,再经三次过柱纯化分离出来的一个约94 KD的重组蛋白。无外源核酸酶和细菌DNA污染,稳定性好,特异性强,适用于各种PCR扩增。本试剂盒已经包括了PCR扩增使用的各种试剂,便于客户配套使用。使用本制品扩增得到的PCR产物的3"端附有一个A碱基,因此可直接克隆于T-Vector中。
产品特点:
快速简便;灵敏度高;特异性强;稳定性好。
产品储存:
储存在-20°C。为减少对产品稳定性的影响,可尽量避免多次冻融或存于温度变化较大的地方。
除快速PCR扩增试剂盒(国产,进口)外,我公司正在打折促销以下产品:
·新型广谱植物基因组DNA提取试剂盒
编号:YBP035
规格:50次/100次/200次
产品介绍:
该试剂盒采用新型独特的溶液系统, 适用于从含酚类、多糖类和酶抑制物的植物样品中快速简单地提取基因组DNA。 可在60分钟内完成一个或多个100 mg新鲜或20 mg干燥的植物样品DNA的纯化工作。提取过程不需要用到有毒的酚氯仿抽提, 使用安全方便, 可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物, 对样品的起始量没有限制, 实验者可根据自己的需求灵活调整, 纯化的基因组DNA片段大、 纯度高, 可直接用于PCR、 酶切和杂交等实验。
产品特点:
• 不使用有毒的苯酚等试剂。
• 快速简捷, 单个样品操作一般可在1小时内完成。
• 适用于各种植物组织。
• 获得的基因组DNA纯度高, 可直接用于PCR、酶切和Southern杂交等分子生物学实验。
适用范围:适用于快捷型提取植物基因组DNA。
产品储存:
• 裂解液AP1低温时可能出现析出和沉淀, 可以在65°C水浴几分钟帮助重新溶解, 恢复澄清透明后冷却至室温即可使用。
• 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、 氧化、 pH值变化, 各溶液使用后应及时旋紧盖子。
·口腔拭子基因组DNA快速提取试剂盒
编号:YBP037
规格:50次/100次/200次
产品介绍:
独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞并灭活细胞内核酸酶, 然后基因组DNA选择性吸附于玻璃纤维膜, 再通过一系列快速的漂洗-分离的步骤, 抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除, 最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从膜上洗脱。
产品特点:
• 不使用有毒的苯酚等试剂, 也不需要乙醇沉淀等步骤, 而且省去了离心步骤。
• 快速简捷, 单个口腔拭子样品操作一般可在90分钟内完成。
• 多次过柱漂洗可确保高纯度, 提取出的基因组DNA OD260/OD280典型的比值达1.7-1.9,长度可达20kb -50kb, 可直接用于PCR、outhern-blot和各种酶切反应。
• 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA, 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱, 但应该确保pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗脱所得的DNA应该保存在-20°C。DNA如果需要长期保存, 可以用TE缓冲液洗脱(10 mM Tris-HCl, 1mM EDTA, pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应, 使用时可以适当稀释。
适用范围:适用于从口腔拭子中快速提取基因组DNA。
产品储存:
• 结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀, 可在37°C水浴几分钟帮助重新溶解, 恢复澄清透明后冷却至室温即可使用。
• 为避免降低活性,方便运输,提供蛋白酶K为冻干粉状。收到后可短暂离心, 加入1 ml 灭菌ddH2O溶解。因为反复冻融可能会降低酶活性, 因此溶解后立即按照每次使用量(10/20 μl)分装, -20°C保存。
• 避免试剂长时间暴露于空气中发生挥发、 氧化、 pH值变化, 各溶液使用后应及时旋紧盖子。
快速PCR扩增试剂盒(国产,进口)关键词:快速PCR扩增试剂盒,YBP092,百奥莱博
BTN3110 氧钒核糖核苷复合物 Ribonucleoside Vanadyl Complex
酒石酸氢钠 Glyphosine 526-94-3
BTN120503 柱式藻类RNAOUT Column Algal RNAOUT
DP409 RNASafe
BL0832 HRP标记人白蛋白抗体
B1001 驴血清(辐照灭菌) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
ARB12736 小鼠I型前胶原羧基端肽(PICP)Elisa定量检测 Mouse carboxyterminal proPeptide of type i procollagen,picp ELISA KIT
三氟乙酸 Phenylhydrazine hydrochloride 76-05-1
BTN80912 大提柱式质粒 DNAOUT Maxi Column Plasmid DNAOUT
BTN100947 环状DNA全基因组扩增试剂盒 Circular DNA WGA Kit
西玛津 ACH 122-34-9
F020233 山羊抗人IgG Fab抗体 Goat Anti-Human IgG Fab
氯化钕 2,4,6-Trimethyl benzoyldiphenyl phosphine oxide 10024-93-8
快速PCR扩增试剂盒(国产,进口)关键词:快速PCR扩增试剂盒,YBP092,百奥莱博
·dGTP 100mM Solution
编号:YBP099
规格:0.25ml
产品介绍:
纯度98%以上。经检验确认,用于PCR反应时扩增良好,不含有RNase。可作为DNA聚合酶的底物使用。
产品储存:
-20°C(长期保存请置于-70°C)。
·胚乳组织及丝状真菌超纯RNA快速提取试剂盒
编号:YBP005
规格:20次/50次
适用范围:
适用于从胚乳组织和丝状真菌材料中提取无基因组DNA污染的高纯度的总RNA。
本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:
1.所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍:
独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,植物RNA助提剂PLANTaid帮助结合多糖多酚并通过离心去除,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从玻璃纤维膜上洗脱。
产品特点:
1.离心吸附柱内玻璃纤维膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
4.独有的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。
5.基因组DNA清除柱可以有效的消除基因组DNA的污染。
6.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
注意事项
1.所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到12,000 rpm的传统台式离心机。
2.需要自备乙醇, β-巯基乙醇,一次性注射器(可选),研钵。
3.裂解液RLCplus2 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4.RNA 纯度及浓度检测:
完整性: RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳 (电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA,电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb,分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯 度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9 之间,但这并不表示RNA 不纯。
浓 度:取一定量的 RNA 提取物,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40
操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)
提示:
第一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量无水乙醇!
操作前在裂解液RLCplus2中加入β-巯基乙醇至终浓度1%,如1 ml RLCplus2中加入10μl β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的RLCplus2 4℃可放置一个月。
1.直接研磨法(推荐):
a. 新鲜胚乳组织或丝状真菌称重后取100mg迅速剪成小块放入研钵(冰冻保存或者液氮保存样品可直接称重后取100mg放入研钵), 加入10体积(1ml)RLCplus2(请确定已加入β-巯基乙醇)和1体积(100μl) PLANTaid 室温下充分研磨成匀浆,注意应该迅速研磨让组织和裂解液RLCplus2立刻充分接触以抑制RNA酶活性。
b. 将裂解物转入离心管,剧烈摇晃振荡15秒,12,000rpm离心5-10分钟,沉淀不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的PLANTaid,将所有裂解物上清转移至一个基因组DNA清除柱中(清除柱放入收集管中),12,000rpm离心30~60秒,收集滤液。接下步骤3
2.液氮研磨法:
a.取500μl裂解液RLCplus2(已经加入β-巯基乙醇),转入1.5ml离心管中,加入50μl PLANTaid混匀备用。
b.液氮中研磨适量胚乳组织或丝状真菌成细粉后,取50mg细粉转入上述装有RLCplus2和PLANTaid的离心管, 立即用手剧烈振荡20秒,充分裂解。
c.用带钝针头的一次性 1 ml(配0.9mm针头) 注射器抽打裂解物 10 次或直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30秒),可以剪切DNA,降低粘稠度和提高产量。
d.将裂解物12,000rpm离心5-10分钟,沉淀不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的PLANTaid, 将所有裂解物上清转移至一个基因组DNA清除柱中(清除柱放入收集管中),12,000rpm离心30~60秒,收集滤液。接下步骤3
3.较精确估计所收集的滤液体积,加入0.5体积的无水乙醇,此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。将混合物(每次小于700μl,多可以分两次加入)加入一个吸附柱RA中,(吸附柱放入收集管中)12,000 rpm离心60秒,弃掉废液。
4.向吸附柱RA中加500μl 去蛋白液RW1,室温放置30秒,12,000rpm 离心30秒,弃掉废液。
5.向吸附柱RA中加入500μl漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000 rpm 离心30秒,弃掉废液。加入500μl漂洗液RW,重复一遍。
6.将吸附柱RA放回空收集管中,12,000 rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
7.取出吸附柱RA,放入一个RNase free离心管中,根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free water(事先在 70-90℃水浴中加热效果更好), 室温放置1分钟,12,000 rpm 离心1分钟。
8.如果预期RNA产量>30μg,加30-50μl RNase free water重复步骤7, 合并两次洗脱液,或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重复步骤一遍(如果需要RNA浓度高)。
洗脱两遍的RNA洗脱液浓度高,分两次洗脱合并洗脱液的RNA产量比前者高15–30%,但是浓度要低,用户根据需要选择。
附录:DNase I柱上消化
一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留,本公司的EASYspin系列RNA提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜,避免了大部分的DNA残留,此外,本试剂盒中配备的基因组DNA清除柱也可以有效的消除基因组DNA的污染。然而,由于材料的差异,某些材料也许基因组残留会非常明显,或者加入的裂解液和材料的起始量没有很好比例时,即使通过基因组DNA清除柱也会有没有完全消除掉基因组DNA的污染的情况,尽管在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA残留(一般电泳EB染色不可见)影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA表达量分析如荧光定量PCR,此时可用RNase free DNaseI直接在离心吸附柱子RA上面消化DNA,然后纯净RNA可以洗脱下来直接使用。
DNase I 工作液的配制:
取10x DNase I buffer 8μl ,加入 DNAse I 3μl(15U),RNAse 抑制剂10U(可加可不加,建议加),无核酸酶水补足至80μl,轻柔混匀。
DNase I柱上消化操作步骤:
1.前面按照正常步骤操作,在操作步骤4加入去蛋白液RW1步骤前按照以下步骤操作。
2.向吸附柱RA 中加入350 μl 去蛋白液RW1,12,000 rpm 离心30-60 秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。
3.向吸附柱RA 中央加入80μl 的DNase I 工作液,室温放置15 分钟。
4.向吸附柱RA 中加入350 μl 去蛋白液RW1, 12,000 rpm 离心30-60 秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。
5.接操作步骤5中加入漂洗液RW步骤等后续步骤。
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