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-20℃
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长期
- 库存:
847
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
5KU|1KU
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应北京现货尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)折扣价,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
北京现货尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)折扣价
编号:M0280L
规格:5KU|1KU
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
特性:
去除 PCR 残存污染
去除 DNA 尿嘧啶碱基
概述:
E. coli 尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)催化从含尿嘧啶的 DNA 上释放尿嘧啶。UDG 能有效地水解单链或双链 DNA 上的尿嘧啶,但不能从 6 碱基或更少的寡核苷酸上水解尿嘧啶。
来源:
克隆有 E. coli UDG 基因的重组 E. coli 菌株。
应用:
在 37℃ 条件下,1 单位 UDG 与 0.1 μg 含尿嘧啶 DNA 温育 10 分钟后,此 DNA 不能再被 DNA 聚合酶复制。95℃ 加热 10 分钟可使该酶 95% 的活性丧失。由于 95℃ 热处理后该酶仍有部分活性,建议加入尿嘧啶糖基化酶抑制剂来阻止产物 DNA 的降解,也可以立即用酚/氯仿抽提反应产物。
反应条件:
1X UDG 反应缓冲液
[20 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,1 mM DTT(pH 8.0 @ 25℃)],37℃ 温育。
质保声明:
尿嘧啶-DNA 糖基化酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义:
1 单位指每分钟催化 60 pmol 尿嘧啶从含尿嘧啶的双链 DNA 上释放所需要的酶量。通过检测 37℃ 条件下,30 分钟从 50 μl 含 0.2 μg DNA(104~105 cpm/μg)的反应体系中释放 [3H]-尿嘧啶的量来确定活性。
浓度:
5,000 units/ml。
注意事项:
UDG 在较广的 pH 范围均内有活性,最适 pH 为 8.0,不需要二价阳离子。活性受高离子强度(> 200 mM)所抑制。
我公司的北京现货尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)折扣价,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销售下列产品:
·BsrI限制性内切酶
编号:R0527L
规格:5KU|1KU|500U
在不同反应缓冲液的活性
BalbBuffer 1.1: <10%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 10%
特性
省时酶。
反应条件
BalbBuffer 3.1,65℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度
10,000units/ml
37℃ 时活性
20%。
甲基化敏感性
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
·Phusion 超保真 PCR Master Mix( 提供 GC 缓冲液 )
编号:M0532L
规格:500次(50μl体系)|100次(50μl体系)
概述:
由于 DNA 序列需要在扩增后进行校正,所以拥有高保真度的 DNA聚合酶对于 PCR 应用至关重要。 Thermo Scientific® Phusion 超保真 DNA聚合酶兼备高保真度和稳定扩增的性能,适用于所有 PCR 应用。其独特的结构包括一个类似 Pyrococcus的酶和一个掺入率增强结构域,二者融合在一起。这种组合提升了聚合反应的保真性和速度。可供选择的试剂包括单酶、预混液和试剂盒。Phusion 热启动 Flex DNA聚合酶有单酶和预混液剂型可供选择。Phusion DNA聚合酶可用于长片段的扩增,是克隆实验的理想
选择。
其它剂型:
Phusion和Phusion 热启动 Flex DNA聚合酶均有预混液剂型可供选择,Phusion 预混液有含 HF 或 GC 缓冲液两种形式。
Phusion PCR试剂盒包含 Phusion聚合酶、Phusion HF和GC 缓冲液、dNTPs、MgCl2、DMSO和DNA
Marker。
浓度:
2,000units/ml。
·BsgI限制性内切酶
编号:R0559L
规格:250U|50U
在不同反应缓冲液的活性
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%
特性
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件
CutSmart 缓冲液 + SAM,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度
5,000units/ml。
甲基化敏感性
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项
该酶要获得最佳活性需加入 SAM(随 酶提供),没有 SAM 酶仅有 25% 活性。
北京现货尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)折扣价关键词:尿嘧啶-DNA 糖基化酶,M0280L,UDG
·SspI限制性内切酶
编号:R0132L
规格:5KU|5KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 50%
CutSmart Buffer: 50%
特性:
重组酶、省时酶。
反应条件:
Sspl 反应缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
5,000和25,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
·Klenow 片段(3"→5" exo-)
编号:M0212L
规格:1KU|1KU|200U|100U
特性:
用随机引物制备探针
随机引物法标记
cDNA 第二条链的合成
概述:
Klenow 片段(3´→5´ exo-)是 DNA 聚合酶 I 的 N 末端截短物,它保留了 DNA 聚合酶活性,但失去了 5´→3´ 核酸外切酶活性。该酶经突变(D355A,E357A)去除了其 3´→5´ 的核酸外切酶活性(1)。
来源:
重组 E. coli 菌株,其携带的质粒上含有 E.coli polA (D355A,E357A)基因的片段,片段起始位置在密码子 324 处。
浓度:
5,000 和 50,000 units/ml。
热失活:
75℃ 20 分钟。
使用注意事项:
Klenow 片段(3´→5´ exo-)因去除了 3´→5´ 核酸外切酶的活性,故不适用于生成平末端的反应。
·稀释液 B
编号:B8001S
规格:5ml|5ml
概述:
如果在使用过程中需要稀释内切酶,建议稀释后浓度不要低于 1,000units/ml。详细信息请参见 282 页,根据内切酶产品货号查阅限制性内切酶的稀释兼容性表选择稀释液的种类,表中列出了所有内切酶所需稀释液种类。
贮存条件:
-20℃。
稀释液成分:
稀释液A:
50mM KCl,10mM Tris-HCl,0.1mM EDTA,1mM dithiothreitol,200 μg/ml BSA,50% 甘油(pH 7.4 @
25℃)。
稀释液B:
300mM NaCl,10mM Tris-HCl,0.1mM EDTA,1mM dithiothreitol,500 μg/ml BSA,50% 甘油(pH 7.4 @25℃)。
稀释液C:
250mM NaCl,10mM Tris-HCl,0.1mM EDTA,1mM dithiothreitol,0.15% Triton X-100,200 μg/ml BSA,50% 甘油(pH 7.4 @ 25℃)。
注意:以上稀释液不能用于稀释嗜热聚合酶。
北京现货尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)折扣价关键词:尿嘧啶-DNA 糖基化酶,M0280L,UDG
·AluI限制性内切酶
编号:R0137L
规格:5KU|1KU|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 50%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 及哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
·T4 多聚核苷酸激酶
编号:M0201L
规格:2500U|500U|250U
特性:
DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化,以便进行连接反应。
DNA 或 RNA 的末端标记,用作探针和进行 DNA 测序
用 T4 多聚核苷酸激酶(M0201)除去 3´ 磷酸基团
T4 多聚核苷酸激酶(缺失 3´ 磷酸酶活性)(M0236)将 3´ 端已经磷酸化的单核苷酸 5´ 磷酸化,制备pNp 底物,用于添加到 DNA 或 RNA的 3´ 端
用 T4 多聚核苷酸激酶(缺失 3´ 磷酸酶活性)(M0236)对 3´ 端有磷酸基团的寡核苷酸的 5´ 端进行标记
概述:
T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链 DNA 或 RNA)的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶(M0201)还具有 3´ 磷酸酶活性,将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶(M0236)具有所有激酶的活性,但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。
来源:
重组 E. coli 菌株,克隆有 T4 多聚核苷酸激酶或修饰的 T4 多聚核苷酸激酶基因。
反应条件:
1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液
[70 mM Tris-HCl(pH 7.6 @ 25℃),10 mM MgCl2,5 mM DTT],37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。
注意事项:
达到最佳酶活力,需要新鲜缓冲液(在旧缓冲液中,由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力)。
放射性标记反应:
50 μl 反应体系中,用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。
CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。
DNA 或 RNA 磷酸化反应(放射性和非放射性)操作流程请联系我们咨询。
要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率,可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前,先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟,然后冰上冷却,并加入 5%(W/V)的 PEG-8,000。
T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性,但是为了适用于高活力的放射性标记反应:,在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。
一般来说,进行激酶反应之后是连接反应。在这种情况下,T4 多聚核苷酸激酶反应在连接酶反应缓冲液中 37℃ 温育 30 分钟即可。反应后的产物可直接进行连接,无需改变缓冲液和进行热失活。如果连接时需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化状态,则需要在连接反应前热失活 T4 多聚核苷酸激酶。
质保声明:
T4 多聚核苷酸激酶和 T4 多聚核苷酸激酶(3´ 磷酸酶活性缺失)经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义:
1 单位即 1 个 Richardson 单位,指 37℃条件下,30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量(1)。
浓度:
10,000 units/ml。
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文献和实验的DNA也会是污染源。 可以在PCR过程中使用良好的实验步骤减少残余污染。使用抗气雾剂移液管的阻止气雾剂进入eppendorf管内。为PCR样品配制和扩增后分析设计隔离的区域,在准备新反应前更换手套。总是使用不含有模板的阴性对照检测污染。使用预先混合的反应成分,而不是每个反应的每个试剂单独加入。 一种防止残余污染的方法是使用尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)。这种酶(也称为尿嘧啶-N-糖基化酶或UNG)移除
Cancer Cell:詹启敏院士团队合作研究揭示肠道微生物影响直肠癌新辅助治疗疗效的原因
生物合成,能降低肿瘤细胞的生存,而外源性核苷的补充能够抵消化疗药物对嘧啶或嘌呤从头生物合成的抑制,使得降低肿瘤细胞 DNA 双链损伤从而存活。进一步利用核苷转运蛋白的抑制剂阻断外源性核苷摄取能够减弱核苷混合物对 5-氟尿嘧啶或电离辐射的保护作用,抑制电离辐射后 DNA 双链损伤的修复,证实了外源性核苷补充能够帮助肿瘤细胞从肿瘤治疗的打击中存活下来。 图片来源:Cancer Cell 4. 体内实验揭示 B. vulgatus 介导的核苷酸生物合成有助原位结直肠肿瘤抵抗治疗 体内动物实验证明核苷的补充
”基因,削弱T细胞对肿瘤的反应,使T细胞衰竭。Anjana Rao教授作为美国科学院院士,在免疫研究领域功成名就,并且在表观遗传领域也取得了许多傲人的成绩。原文检索:TOX and TOX2 cooperate with NR4A transcription factors to impose CD8+T cell exhaustion⑥中山大学生科院Nature子刊发现非典型尿嘧啶DNA糖基化酶UdgX的催化过程在自然界中,绝大多数生物都是以DNA为遗传物质,其完整性对于生物体至关重要。DNA损伤
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