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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 形态:
液体
- 保存条件:
短期4℃长期-20℃
- 克隆性:
多克隆
- 抗体英文名:
Goat anti-human prog-BSA,serum
- 规格:
1ml
羊抗-孕酮 血清,不含任何防腐剂,请避免微生物污染。用于免疫组化,免疫比浊法,ELISA等。对孕酮双向扩散>1∶64
本品须避免反复冻融,-20℃存放。
抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清,一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。
一种抗原能否引起抗体生成反应,一方面取决于抗原分子表面有无抗原决定簇(Antigenic determinant),另一方面取决于机体的免疫状态,当具备以上两个条件后,抗体生成将遵循抗体生成的一般规律——初次反应和再次反应。
抗原的种类繁多,包括天然的蛋白质抗原和细胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等,不同的抗原免疫动物具有不同的特殊性。一般完全抗原免疫动物需加用佐剂,尤其在使用可溶性抗原时,以期得到高效价的抗血清;合成性抗原和基因工程抗原等半抗原物质需先通过人工的方法与蛋白质载体连接后再与佐剂混合免疫动物,方可获得理想的免疫效果。
佐剂的条件作为一种良好的佐剂,必须具备下列条件:
(1) 增加抗原的表面积,并改变抗原的活性基团构型,从而增强抗原的免疫原性;
(2) 佐剂与抗原混合能延长抗原在局部组织的存留时间,减低抗原的分解速度,使抗原缓慢释放至淋巴系统中,持续刺激机体产生高滴度的抗体;
(3) 佐剂可以直接或间接激活免疫活性细胞并使之增生,从而增强了体液免疫、细胞免疫和非特异性免疫功能;
(4) 良好的佐剂应具有无毒性或副作用低的特点。
配制方法:按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内,用超声波使之混匀,高压灭菌,置4℃下保存备用。
在免疫动物前,先将弗氏佐剂与抗原按一定比例混合,佐剂和抗原体积比一般为1:1,制备成 “油包水”乳状液。因为含SDS很易促使其乳化成油包水抗原乳化复合物,注射入动物体内时一定要保持乳化状态。抗原用量视抗原分子量不同及免疫原性及免疫动物不同而有一定差异,无统一标准和固定模式。一般是每兔(约2kg重)或每羊(约20kg重)第1次注射抗原1mg,以后逐次增加抗原量,最多每次不超过3mg.佐剂与抗原乳化可按如下方法进行:
(1) 研磨法:先将佐剂加热并取适量放入无菌的玻璃研钵内,待冷却后再缓缓滴入等体积的抗原溶液,边滴边按同一方向研磨,滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后,继续研磨一段时间,使之成为乳白色粘稠的油包水乳剂。医学教育|网搜集整理本法适于制备大量的佐剂抗原,缺点是研钵壁上粘附大量乳剂,抗原损失较大。
(2) 注射器混合法:将等量的弗氏佐剂和抗原溶液分别吸入两个注射器内,两注射器之间以一细胶管相连,注意排净空气,然后交替推动针管,直至形成粘稠的乳剂为止。本法优点是容易做到无菌操作,抗原损失少,适用于制备少量的抗原乳剂。但同时难以乳化完全,个别抗原,用塑料注射器根本推不动,而用玻璃注射器又有渗漏。制备好的乳化剂经鉴定才能适用。鉴定方法是将乳化剂滴入冷水中,若保持完整不分散,成滴状浮于水面,即乳化完全,为合格的油包水剂。
(3) 超声:实验室条件好点的,比如说有超声破碎仪的,一定要控制超声频率和时间,超声容易激发一些自由基,对抗原有未知损害。乳化方法要根据抗原和需要而定。
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文献和实验度值(OD)或相应的结合率(OD/ODo%)为纵坐标,绘制标准曲线。根据被检样品的结合率在标准曲线上可查到相应的含量。目前人们还可以使一些小分子的类固醇激素(如孕酮)与大的蛋白质分子(如牛血清蛋白)结合,成为完全抗原,并按免疫学原理获得抗体。通过检测酶标记该完全抗原的竞争性结合率,来测定该激素的含量。二、实验动物奶牛三、实验试剂发情牛鲜奶试剂配制:1、孕酮抗血清 用11α-孕酮-牛血清白蛋白(11α-P4-BSA),免疫兔子所得,效价在1:104以上。2、标准孕酮 用脱激素奶将标准孕酮稀释为一系列不同
孕酮的放射免疫测定法很敏感,但由于孕酮是半抗原,须先同牛血清白蛋白结合,才能注射于家兔,使之产生抗体。牛血清白蛋白结合在孕酮上的不完全部位对抗血清的特异性有很大关系,若结合在C3抗血清无特异性,结合在C6则特异性高,结合在Cll特异性更好。孕酮试剂盒已广泛应用于临床,介绍如下。 一、基本原理 此法采用双抗体放射免疫法: Ag※+Ab+Abl一(Ag※Abl)+(AgAbI)+Ag※ 含孕酮的病人标本
31.2μg/L,并与血中E2的增加平行。 妊娠足月时可高达:150~200μg/L.血清孕酮的升高:见于葡萄胎、轻度妊娠高血压综合征、糖尿病孕妇、多胎、继发性高血压、先天性17-a羟化酶缺乏症、先天性肾上腺增生、卵巢颗粒层膜细胞瘤、卵巢脂肪样瘤医`学教育网搜集整理。 孕酮的降低:见于先兆流产、黄体功能不良、胎儿发育迟缓、死胎、严重妊娠高血压综合征。 在月经周期第18~26天,测三次血P,如均小于15.9nmol/L(5ng/ml)可诊为黄体功能不健。
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