ELISA方法检测人横纹肌辅肌动蛋白α(sm ActInIn

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ELISA方法检测人横纹肌辅肌动蛋白α(sm ActInIn-α)试剂盒
英文名：Human skeletal muscle actinin-α,sm actinin-α ELISA KIT
品牌：百奥莱博
种属：人
保存温度：2～8℃
有效期：180天
规格：96T/盒
产地：国产(默认)|进口(需核实有无)
编号：ARB11827

酶联免疫方法检测横纹肌辅肌动蛋白α(sm ActInIn-α)，常见标本的处理方式:
1、胃液、唾液、尿液的采集方式一般现采现用,胃液、唾液最好的采集时间是空腹采集,一般隔夜尿不采集；
2、采集血清时,一般要加入总体积1%的抗凝剂,采集后先室温或4℃静置半小时后,800-1000rmpx5min分离,取上清,-20℃或4℃保存备用；
3、组织提取液、肺泡灌洗液等,采集后离心分离,800-1000rmpx5min,取上清,-20℃或4℃保存备用；
4、采集血浆时一般不加抗凝剂,采集后立即离心800-1000rmpx5min分离,取上清,-20℃或4℃保存备用；
5、不贴壁细胞(分泌性蛋白),将培养基和细胞转移至10ml离心管,500-800rmpx10min,吸取上清至另一10ml离心管中,10000rmpx10min,-20℃或4℃保存,作为标本进行检测,如有需要可进行透析或纯化处理；
6、粪便以及天然孔排泄物:采集后一般现用PBS/生理盐水溶解,充分混匀,800-1000rmpx5min分离,取上清,-20℃或4℃保存备用；


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ELISA方法检测人横纹肌辅肌动蛋白α(sm ActInIn-α)试剂盒关键词：横纹肌辅肌动蛋白α,sm ActInIn-α,试剂盒

定量分析实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中横纹肌辅肌动蛋白α(sm ActInIn-α)水平。用纯化的横纹肌辅肌动蛋白α(sm ActInIn-α)抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入横纹肌辅肌动蛋白α(sm ActInIn-α)，再与HRP标记的横纹肌辅肌动蛋白α(sm ActInIn-α)抗原结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的横纹肌辅肌动蛋白α(sm ActInIn-α)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中横纹肌辅肌动蛋白α(sm ActInIn-α)浓度。



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常见问题之边缘效应：
使用96孔板的ELISA测定中，常发现有“边缘效应”，即外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规ELISA测定中，将板从室温（通常在25℃左右）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地排除“边缘效应”，并且可提高测定的重复性。


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人横纹肌辅肌动蛋白α(sm ActInIn-α)ELISA试剂盒操作注意事项:
1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。



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